雞PNPLA3基因多態(tài)性及組織表達(dá)規(guī)律的研究.pdf

1、PNPLA3(脂肪細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)素)是近幾年發(fā)現(xiàn)的與能量平衡和脂肪代謝有關(guān)的非分泌型蛋白，作為PNPLAs家族的一員，PNPLA3同時(shí)具有脂肪分解酶活性和脂肪轉(zhuǎn)移酶活性。在人PNPLA3基因的研究發(fā)現(xiàn)該基因在脂肪合成和分解代謝中有重要作用，與人的體重增長(zhǎng)及肥胖等密切相關(guān)。目前尚未見該基因遺傳變異對(duì)雞生長(zhǎng)發(fā)育及代謝影響的報(bào)道。本研究主要進(jìn)行了雞PNPLA3基因遺傳變異與固始雞資源群經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)分析及該基因在絲毛烏骨雞不同生長(zhǎng)階段的組織表達(dá)差異

2、研究。
　　 本試驗(yàn)利用混合DNA池測(cè)序技術(shù)對(duì)雞PNPLA3基因全長(zhǎng)序列變異位點(diǎn)進(jìn)行了篩選，用PCR-RFLP技術(shù)分析了篩選出的變異位點(diǎn)固始雞安卡雞F2代資源群中的分布及群體遺傳特性，_用SHEsis軟件進(jìn)行突變位點(diǎn)之間的連鎖不平衡分析，PHASE2.0軟件進(jìn)行單倍型構(gòu)建。并進(jìn)行了各突變位點(diǎn)及單倍型與生長(zhǎng)性狀、屠體性狀、肉質(zhì)性狀等經(jīng)濟(jì)性狀及血液生化指標(biāo)的關(guān)聯(lián)分析，同時(shí)進(jìn)行了各突變位點(diǎn)對(duì)其顯著相關(guān)性狀的加性效應(yīng)與顯性效應(yīng)研究。采用

3、實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)對(duì)絲毛烏骨雞PNPLA3基因不同生長(zhǎng)階段的組織表達(dá)進(jìn)行了測(cè)定。主要結(jié)果如下：
　　 1、在雞PNPLA3基因第6外顯子、第7內(nèi)含子、第8外顯子共發(fā)現(xiàn)3處突變位點(diǎn)，分別命名為g.40006G>T、g.42344T>C和g.42404A>T，其中，g.40006G>T突變位點(diǎn)導(dǎo)致了氨基酸的變化(賴氨酸→天冬酰胺)。群體遺傳學(xué)研究表明，三個(gè)位點(diǎn)的突變純合型個(gè)體均較少，基因型頻率較低。3個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)信息含量均在0.25

4、到0.5之間，均屬于中度多態(tài)。
　　 2、位于第7內(nèi)含子的g.42344T>C位點(diǎn)與第8外顯子的g.42404A>T位點(diǎn)處于強(qiáng)連鎖不平衡狀態(tài)，這兩個(gè)位點(diǎn)構(gòu)成3種單倍型(頻率>0.01％)：H1(C-T)、H2(T-T)、H3(T-A)，其中C-T型頻率最高，達(dá)到74.8％。
　　 3、關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明：3個(gè)位點(diǎn)均與體重、屠體重及主要內(nèi)臟器官重存在顯著關(guān)聯(lián)(P<0.05)，且具有明顯的優(yōu)勢(shì)基因型，而與腹脂重、腹脂率等脂肪性

5、狀的相關(guān)性不顯著(p>0.05)。g.40006G>T位點(diǎn)對(duì)顯著相關(guān)的體重及屠體性狀具有顯著的加性效應(yīng)(p<0.05)，而g.42344T>C和g.42404A>T位點(diǎn)對(duì)其相關(guān)性狀的顯性效應(yīng)顯著(p<0.05)。單倍型組合型與10周齡體重、12周齡體重、屠體重等生長(zhǎng)性狀和屠體性狀顯著相關(guān)(p<0.05)。
　　 4、在對(duì)烏雞公雞1日齡，4、8、12周齡的肝臟、心臟、肌肉的的PNPLA3的表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，1日齡、4周齡、12周齡時(shí)，

6、PNPLA3基因均在肝臟中表達(dá)量最高，其中12周齡的肝臟表達(dá)量顯著高于肌肉和心臟組織(P<0.05)；PNPLA3基因在肝臟中的表達(dá)隨著生長(zhǎng)發(fā)育呈現(xiàn)出先減少后增加的趨勢(shì)，在12周齡時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高，而在肌肉和心臟中的表達(dá)呈現(xiàn)出增加-減少-增加的趨勢(shì)。
　　 由以上試驗(yàn)結(jié)果，可得出如下結(jié)論：
　　 1、雞PNPLA3基因g.40006G>T、g.42344T>C和g.42404A>T突變位點(diǎn)均與生長(zhǎng)性狀及屠體性狀存在顯著關(guān)