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文檔簡介
1、催乳素(Prolactin,PRL)具有抑制卵泡生長發(fā)育,調(diào)節(jié)母禽就巢和孵卵等母性行為的重要作用,血漿中PRL水平受到PRL基因的調(diào)控。本研究旨在分析鵝PRL基因5’-UTR的多態(tài)性及其與鵝重要經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)性。試驗(yàn)采用萊茵鵝、朗德鵝、白羅曼鵝、揚(yáng)州白鵝、雁鵝以及皖西白鵝與四川白鵝的雜一代(皖川白鵝)作為研究群體。從鵝血液中提取基因組,利用PCR技術(shù)克隆PRL基因的5’-UTR及部分調(diào)控區(qū)序列,長度為268bp(PRL268);利用測(cè)序
2、、結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、SNP檢測(cè)、雙報(bào)告基因表達(dá)驗(yàn)證及關(guān)聯(lián)分析等方法進(jìn)行PRL268序列功能及其與鵝重要經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)性研究。結(jié)果表明:
(1)PRL268序列1~13bp之間的DNA平均彎曲指數(shù)為33.99±5.88,33~53bp和61~70bp之間分別為51.74±3.81和52.17±3.96,但84~113bp之間僅為18.05±6.06,隨后出現(xiàn)120bp(45.88)的波峰和145~163bp的綿延峰,顯示這些區(qū)域DN
3、A彎曲可能具有功能上的特異性。分析PRL268序列的潛在轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn),結(jié)果表明該片段存在TBP、NF-1、NF-E2、TATA-box、Pit-1、PR、Sp1、AP-1、CAC-binding_pro等調(diào)控元件,而由于DNA-loop的特性,拉近了一些結(jié)合位點(diǎn)之間的線性距離。(2)在位距PRL基因CDS起點(diǎn)上游10bp處存在一個(gè)T→G的突變位點(diǎn)(T-10G,PRL268T/G)。PRL268G在萊茵鵝、白羅曼鵝和郎德鵝中基因頻率均
4、在0.90以上,揚(yáng)州白鵝為0.1563,皖川白鵝和雁鵝分別為0.3517和0.5566。(3)雙報(bào)告基因分析顯示,PRL268G啟動(dòng)子的效率比PRL268T啟動(dòng)子提高26.14%(p<0.01)。在T-10G位點(diǎn)的T被替換成G后,啟動(dòng)子效率顯著提高了。(4)根據(jù)基因頻率分布和鵝產(chǎn)蛋水平,PRL268G在萊茵鵝、朗德鵝和白羅曼鵝中為優(yōu)勢(shì)基因,PRL268T基因在揚(yáng)州白鵝中為優(yōu)勢(shì)基因。結(jié)果顯示,在不同產(chǎn)蛋水平的鵝群中,基于T-10G位點(diǎn)的基
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