豬舍環(huán)境氣載需氧菌的檢測及大腸桿菌氣溶膠的發(fā)生與傳播.pdf

1、微生物氣溶膠是畜禽舍環(huán)境污染的重要因素之一，氣溶膠的生物污染可以引起一系列傳染病的流行。目前，對(duì)畜禽舍環(huán)境中氣載微生物的研究，主要集中在某一特定時(shí)間段內(nèi)和某些特定的病原菌上。關(guān)于畜禽舍環(huán)境中氣載需氧菌在一年四季中的動(dòng)態(tài)變化、分布規(guī)律以及其傳播特點(diǎn)涉及較少。因此，本研究以山東省最常見的封閉式和半封閉式豬舍為研究對(duì)象，于2008年3月到2009年2月對(duì)其環(huán)境中氣載需氧菌進(jìn)行檢測，并對(duì)其分布特征和危害進(jìn)行了分析和評(píng)估；同時(shí)，以大腸桿菌為指示菌

2、，利用其ERIC（Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus）序列的特點(diǎn)和對(duì)不同抗生素耐藥性的差異，來分析不同來源大腸桿菌的同源性，從而揭示了微生物氣溶膠傳播的特點(diǎn)。
　　 本實(shí)驗(yàn)從2008年3月到2009年2月，以5％血瓊脂培養(yǎng)基為采樣介質(zhì)，利用Andersen-6級(jí)微生物空氣采樣器收集豬舍環(huán)境中空氣樣品，然后通過培養(yǎng)計(jì)數(shù)，分析氣載需氧菌濃度的動(dòng)態(tài)變化和粒徑分布特點(diǎn)。封閉式豬

3、舍環(huán)境氣載需氧菌濃度在9.07×104～28.23×104 CFU/m3空氣；半封閉式豬舍環(huán)境氣載需氧菌濃度為12.02×104～24.95×104 CFU/m3空氣。冬季最高，夏季最低。氣載需氧菌主要分布在采樣器的A-D級(jí)上，F(xiàn)級(jí)最少。豬舍環(huán)境中氣載需氧菌含量不僅高，而且季節(jié)性波動(dòng)較大，每天約有4.0×105CFU和4.9×106 CFU氣載需氧菌可分別進(jìn)入人和豬的小支氣管或直接侵入肺泡，從而對(duì)人及豬的健康構(gòu)成潛在威脅。
　　

4、 采用同一工作日由豬的糞便、舍內(nèi)、外空氣中分離到的大腸桿菌菌株，每個(gè)取樣點(diǎn)取10株，選擇氟哌酸（NOR）、頭孢哌酮（CFP）、氯霉素（CMP）、復(fù)合磺胺（SXT）、慶大霉素（GEN）、鏈霉素（STR）、四環(huán)素（TET）、利福平（RIF）、紅霉素（ERY）、青霉素（P-G）、妥布霉素（TOB）、呋喃妥因（Ni）十二種藥敏紙片，進(jìn)行耐藥性測定。結(jié)果顯示，豬舍內(nèi)、舍外下風(fēng)向空氣中分離到的菌株都對(duì)RIF、ERY、P-G耐藥，這在一定程度上可以證

5、明舍內(nèi)微生物氣溶膠包括耐藥細(xì)菌可隨氣體交換傳播到周圍環(huán)境中，使其周圍環(huán)境受到微生物污染。
　　 采用Andersen-6級(jí)空氣微生物樣品收集器和RCS-離心式采樣器分別在4個(gè)豬場舍內(nèi)空氣、舍外上風(fēng)向10、50m和下風(fēng)向10、50、100、200、400 m不同距離收集大腸桿菌氣溶膠，計(jì)算每一個(gè)采樣點(diǎn)的大腸桿菌的濃度；與此同時(shí)，采集豬的糞便、分離大腸桿菌。利用ERIC-PCR鑒定技術(shù)，擴(kuò)增不同測量點(diǎn)收集的大腸桿菌的DNA條帶，形成

6、聚類圖譜。通過每一個(gè)采樣點(diǎn)分離的大腸桿菌遺傳相似性分析以及大腸桿菌濃度變化比較，確認(rèn)動(dòng)物舍微生物氣溶膠向舍外環(huán)境的傳播模式。結(jié)果顯示：4個(gè)豬場舍內(nèi)空氣中大腸桿菌的濃度為21～35 CFU/m3空氣，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于舍外上風(fēng)和舍外下風(fēng)處的大腸桿菌濃度（P<0.05），但是舍外下風(fēng)不同距離間的大腸桿菌濃度差異并不顯著（P>0.05）。ERIC-PCR結(jié)果表明，52.4％糞便大腸桿菌（4個(gè)豬舍分別為：2/4，50％；2/4，50％；3/6，50％；4