NA Gase與凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)發(fā)育的相關(guān)性及該酶的活力調(diào)控研究.pdf

1、分別以凡納濱對(duì)蝦的殼膜和內(nèi)臟為材料，通過(guò)勻漿、離心，獲NAGase粗酶液。通過(guò)對(duì)不同生長(zhǎng)期凡納濱對(duì)蝦NAGase的比較研究，結(jié)果顯示不同生長(zhǎng)期凡納濱對(duì)蝦殼膜和內(nèi)臟NAGase的比活力有不同的變化規(guī)律，但最終都升穩(wěn)在一定值。殼膜和內(nèi)臟的NAGase最適pH都是5.5，pH穩(wěn)定范圍基本都是5.0-7.0，最適溫度分別為30-35℃和37-40℃，溫度穩(wěn)定性均較差。酶動(dòng)力學(xué)研究表明，不同生長(zhǎng)期對(duì)蝦殼膜和內(nèi)臟NAGase的Km、Vm活化能Ea均

2、存在不同程度的差異；同生長(zhǎng)期的殼膜NAGase的Km值均比內(nèi)臟NAGase的Km值高。
　　 比較健康和患紅體病的凡納濱對(duì)蝦殼膜與內(nèi)臟NAGase的活力和性質(zhì)的差異。結(jié)果表明：對(duì)蝦患紅體病前后體內(nèi)的NAGase活力、基本酶學(xué)性質(zhì)等均存在差異。患病后殼膜NAGase比活力有輕微的上升，而內(nèi)臟NAGase比活力則發(fā)生較大幅度地下降；患病后，殼膜與內(nèi)臟NAGase的催化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)常數(shù)Km和Vm值、活化能均較高，但其最適溫度較低，pH穩(wěn)

3、定性及熱穩(wěn)定性較差。同時(shí)，不同生長(zhǎng)期、對(duì)蝦患病前后，殼膜與內(nèi)臟來(lái)源的NAGase對(duì)外界各影響因子(Hg2+、Zn2+、Cu2+、Cd2+、Pb2+、Al3+等重金屬離子污染物；乙醇、甲醛、苯酚、甲醇、二氧六環(huán)、DMF、DMSO等有機(jī)污染；脲、NBS、SDS等常用化學(xué)修飾劑及變性劑)的敏感性也發(fā)生了變化。
　　 研究養(yǎng)殖常用藥物對(duì)凡納濱對(duì)蝦殼膜與內(nèi)臟NAGase的活力調(diào)控。結(jié)果表明：次氯酸鈉、三氯異氰尿酸對(duì)兩種來(lái)源的酶的抑制為不可

4、逆過(guò)程。青霉素鉀、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素等對(duì)殼膜與內(nèi)臟來(lái)源的NAGas活力基本上沒有影響；鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)兩種來(lái)源的酶有激活作用，而諾氟沙星和磺胺甲噁唑?qū)γ富盍t有不同程度的抑制作用?；前芳讎f唑?qū)つAGase表現(xiàn)為混合型可逆抑制，對(duì)內(nèi)臟NAGase表現(xiàn)為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制；諾氟沙星對(duì)內(nèi)臟NAGase為混合型可逆抑制?？疾鞄追N養(yǎng)殖常用維生素對(duì)內(nèi)臟NAGase活力的影響，其中VB12、煙酸、核黃素等對(duì)酶活力基本上沒有影響；而VB1、VB6、

5、抗壞血酸等對(duì)該酶活力均有不同程度的抑制作用，進(jìn)一步研究了VB6的抑制作用動(dòng)力學(xué)，其對(duì)酶的抑制作用為非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制。
　　 對(duì)凡納濱對(duì)蝦進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)，研究重金屬離子對(duì)對(duì)蝦NAGase活力影響，在不同時(shí)間取樣并考察Cu2+、Zn2+、Cd2+、pb2+、Hg2+等重金屬離子對(duì)凡納濱對(duì)蝦殼膜及內(nèi)臟NAGase活力的影響。結(jié)果顯示5種重金屬離子在低濃度下短時(shí)間內(nèi)對(duì)凡納濱對(duì)蝦殼膜與內(nèi)臟的NAGase活力沒有顯著影響，48h后隨作用時(shí)間的