新城疫F48E9毒株與Lasota毒株感染雞后外周血部分細胞因子差異表達的研究.pdf

1、新城疫病毒是危害世界養(yǎng)禽業(yè)最主要的病毒之一，新城疫病毒的危害性因毒株的不同而呈現(xiàn)出一定的差異。外周血是新城疫病毒在機體內(nèi)傳播重要的載體，同時外周血淋巴細胞也通過表達細胞因子控制病毒在體內(nèi)的傳播。為了解新城疫病毒強毒株與弱毒株在外周血中的載量變化規(guī)律以及不同毒力的新城疫病毒感染所引起的外周血淋巴細胞中細胞因子的差異表達狀況，在本研究中，使用了新城疫病毒強毒株F48E9株與弱毒株Lasota株分別感染SPF成年雞，同時使用一組未感染病毒的成

2、年雞作對照。在感染后0天、3天、7天、10天、14天、21天這6個時間點分別采集三組成年雞的外周血，進行外周血總RNA的提取并且反轉錄，最后使用Real-time PCR技術對IFNalpha、IFNgamma、IL-2、IL-6、IL-10、IL-13、IL-15、IL-16、IL-18這9種細胞因子mRNA以及新城疫病毒F48E9毒株與Lasota毒株在外周血中的載量進行檢測。
　　 實驗結果表明，新城疫病毒F48E9株在外

3、周血中的載量在感染病毒后迅速升高，在感染后7天達到峰值，拷貝數(shù)為8.56×106copies/mL，而后又迅速下降。與之相比，新城疫病毒Lasota株在外周血中的載量在感染后上升緩慢，于感染后10天達到峰值，拷貝數(shù)為6.60×106copies/mL，之后在外周血中的載量緩慢下降。兩毒株相比，F(xiàn)48E9株的峰值高于Lasota株的峰值，且F48E9株峰值出現(xiàn)早于Lasota株峰值出現(xiàn)時間。
　　 在細胞因子表達檢測方面，無論新城

4、疫病毒F48E9株還是新城疫病毒Lasota株均能夠引起IFN-γ在感染后的高效的表達，且其各自峰值與對照組相比呈現(xiàn)顯著差異；新城疫病毒F48E9毒株與新城疫病毒Lasota毒株相比，更能夠迅速的誘導外周血淋巴細胞當中IFN-α與IFN-γ表達，且F48E9毒株與Lasota毒株相比F48E9誘導IFN-α表達的能力更強，而Lasota株誘導IFN-γ表達的能力更強。IL-2的mRNA的表達情況有所不同，僅Lasota株能夠誘導其高效表

5、達且其峰值與對照組相比呈現(xiàn)顯著差異，而F48E9株對IL-2的誘導效應不明顯；與之相反，IL-10、IL-16、IL-18這三種細胞因子僅F48E9株能夠誘導高效表達且其峰值與對照組相比呈現(xiàn)顯著差異。同時在研究中還發(fā)現(xiàn)無論是F48E9株還是Lasota株均能夠誘導IL-13的高效表達，而二者對IL-15表達誘導的峰值與對照組相比無顯著差異。在實驗中還發(fā)現(xiàn)在感染了新城疫病毒的成年雞外周血中各個時間點均不能檢測到IL-6的mRNA表達，而在

6、各個時間點的對照組成年雞外周血中卻能夠檢測到IL-6的mRNA表達。
　　 實驗證明，F(xiàn)48E9在外周血中載量的變化呈現(xiàn)上升迅速而下降迅速的趨勢，而Lasota在在外周血中載量的變化呈現(xiàn)上升緩慢而下降迅速的趨勢，F(xiàn)48E9毒株感染的成年雞在外周血中載量的峰值時間先于并高于Lasota毒株感染的成年雞。在新城疫病毒感染過程當中，各個細胞因子的表達在F48E9毒株與Lasota毒株之間存在一定的差異，可能與感染病毒的毒力以及外周血中