菌株HD-NK413抗菌物質(zhì)的純化及抗馬鈴薯早疫病機理研究.pdf

1、馬鈴薯是世界上繼水稻、小麥和玉米之后的第四大糧食作物，但近年來馬鈴薯早疫病發(fā)生頻繁，造成相當大的危害。小白鏈霉菌菌株HD-NK413對馬鈴薯早疫病菌具有較好的抗菌活性，本試驗主要對該菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)進行初步分離，并研究其對馬鈴薯早疫病菌的抗菌機理。
　　 用薄層層析法分析發(fā)酵液中的有效成分，通過活性炭吸附、硅膠柱層析的方法對HD-NK413的發(fā)酵液中的活性組分進行了分離純化。確定了活性炭吸附的最佳條件為靜態(tài)吸附12h，pH值自然

2、，活性炭顆粒用量與發(fā)酵液體積比為1∶1；采用4倍于活性炭體積的pH6的50％丙酮溶液對吸附有抗菌活性物質(zhì)的活性炭進行洗脫，得到的洗脫液的抗菌活性最高。對50％丙酮洗脫液濃縮后，進行了硅膠柱層析分離，得到了3個分離峰，其中兩個是具有抑菌活性的單一組分，在GF254硅膠板上的遷移率分別為0.83、0.86，分別在272和271nm處有紫外吸收峰，符合核苷類抗生素的紫外吸收特征。
　　 利用分離到的HD-NK413抗生素粗品研究了對馬

3、鈴薯早疫病菌的抗菌機制，明確了其對病原菌菌絲體的抑制作用和殺死作用。菌絲生長抑制試驗結(jié)果表明，抗生素粗品處理的病菌菌絲末端出現(xiàn)了膨脹泡，生長畸形，菌絲多較為短小，菌絲隔膜模糊不清，甚至消失。菌絲殺死試驗結(jié)果表明，用抗生素粗品處理正常生長的菌絲20h后，多數(shù)菌絲體消融，余下的少數(shù)菌絲的細胞壁也變得模糊，原生質(zhì)皺縮，細胞結(jié)構(gòu)受到了嚴重破壞。
　　 對抗生素粗品處理的病原菌菌絲體的生理指標測定結(jié)果表明，該抗生素能夠增大病菌細胞膜的滲透