黃粉蟲抗菌物質(zhì)的提取、活性測定及應(yīng)用研究.pdf

1、為了給黃粉蟲抗菌物質(zhì)的開發(fā)利用提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)，本論文測定了黃粉蟲幼蟲和成蟲產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對常見的病原細(xì)菌和真菌的抑制作用效果，初步研究了其抑菌作用機(jī)制，同時(shí)研究了這些抗菌物質(zhì)對果品的防腐應(yīng)用。獲得的主要結(jié)果如下：
　　 1.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的提取
　　 通過10種不同溶劑：甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、苯等對黃粉蟲幼蟲勻漿物進(jìn)行浸泡提取，用提取物對大腸桿菌進(jìn)行抗菌試驗(yàn)，篩選出打孔加樣抑菌圈法作為最佳測定方

2、法，乙酸乙酯為最佳提取溶劑。用4種不同的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)黃粉蟲幼蟲產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，最終確定最佳誘導(dǎo)方法為菌液注射法（誘導(dǎo)后飼養(yǎng)48h）。對黃粉蟲幼蟲和成蟲體內(nèi)的抗菌物質(zhì)進(jìn)行誘導(dǎo)，用乙酸乙酯提取，利用硅膠柱層析法對粗提物進(jìn)行分離。
　　 2.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的抗細(xì)菌、真菌活性
　　 利用打孔加樣抑菌圈法檢測幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對4種細(xì)菌的抗菌活性，利用生長速率法測定抗菌物質(zhì)對5種病原真菌的抗菌活性。結(jié)果表明：兩類蟲體的抗菌物質(zhì)對所測

3、4種細(xì)菌（包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌）均有顯著的抑菌效果：其中黃粉蟲幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對大腸桿菌的抑制效果均強(qiáng)于氨芐青霉素(100mg/mL)，且誘導(dǎo)后幼蟲抗菌物質(zhì)對大腸桿菌的抑制效果略強(qiáng)于成蟲，抑菌圈直徑約為27.40mm（含加樣孔直徑）?？咕镔|(zhì)對大腸桿菌均有較好的抑菌作用，且熱穩(wěn)定性較好。MIC檢測結(jié)果表明幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)經(jīng)0.05％吐溫-20溶液稀釋后對大腸桿菌的MIC最低為6.25mg/mL，對金黃色葡萄球菌的MIC最低

4、為12.5mg/mL;且幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)的0.05％吐溫-20稀釋液在最小抑菌濃度時(shí)對這兩種菌有抑菌作用。通過對黃粉蟲抗菌物質(zhì)對大腸桿菌致死曲線的測定，結(jié)果表明抗菌物質(zhì)對大腸桿菌不是抑菌作用，而是殺菌作用。
　　 黃粉蟲幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對5種受試的果蔬病原真菌均有顯著的抑菌效果：200mg/mL抗菌物質(zhì)對番茄枯萎病菌的體外抑制效果最好（幼蟲抗菌物質(zhì)菌絲生長抑制率為62.34％，成蟲為60.61％），對蘋果炭疽病菌的體外抑制效

5、果最差（幼蟲抗菌物質(zhì)菌絲生長抑制率為29.55％，成蟲為27.27％）；并且抗菌物質(zhì)對番茄枯萎病菌是致死效應(yīng)，在接觸6d和12d后轉(zhuǎn)移，7d后含200mg/mL的黃粉蟲抗菌物質(zhì)的平板上仍未見番茄枯萎病菌有生長現(xiàn)象。
　　 3.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的防腐應(yīng)用
　　 用不同濃度的黃粉蟲抗菌物質(zhì)，通過損傷接種的方式對4種果蔬病原真菌進(jìn)行體內(nèi)抑制作用實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：抗菌物質(zhì)對蘋果炭疽病害、梨黑星病害、棗炭疽病害和番茄枯萎病害有明顯的抑

6、制作用，在三種不同濃度下均能降低果蔬的腐爛率，幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)濃度為200mg/mL時(shí)，番茄腐爛率（與無菌水相比）分別下降了34.97％、31.31％，效果最明顯。與體外抑制作用效果相比，體內(nèi)抑制作用的效果雖然有所降低，但直接證明了黃粉蟲抗菌物質(zhì)對果蔬病害有抑制作用。
　　 黃粉蟲抗菌物質(zhì)的防腐應(yīng)用試驗(yàn)結(jié)果表明：抗菌物質(zhì)對番茄的整果保鮮效果較明顯，保鮮時(shí)間最長可達(dá)30d;抗菌物質(zhì)和熱水浸果結(jié)合使用，對番茄整果保鮮效果更好，保鮮