毛殼菌株的篩選鑒定以及抗菌物質發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、農業(yè)生產中每年因為農作物病蟲害造成很多植物死亡或者減產，給糧食生產帶來十分巨大的損失。生物防治植物病蟲害中具有持續(xù)時間長、防治效果顯著、安全性好并且不使生物產生抗藥性。因此，生物防治被認為是未來農業(yè)病蟲害防治中主要的防治方法。毛殼菌是一種主要的生物防治菌，它具有作為很好的生物防治菌劑的能力。不僅可以通過競爭作用，重寄生作用，誘導植物產生抗性還可以產生抗菌物質抑制植物病原菌。
　　本課題主要研究從特定環(huán)境土壤中篩選具有生物防治功能的

2、毛殼菌，并初步研究其代謝物發(fā)酵條件。本實驗，采用分離培養(yǎng)基從樣品中篩選具有纖維素降解能力的微生物，通過在顯微鏡下觀察微生物形態(tài)結構，篩選發(fā)現其中有8株是毛殼菌菌株分別為G12、G14、G15、H6、H10、I3、I4、I5。分子水平鑒定主要是通過 ITS序列分析，鑒定微生物種屬關系，發(fā)現八株菌株與球毛殼菌相似度高達94％以上。通過與病原菌對峙實驗作為復篩，發(fā)現菌株H10對核盤菌、立枯絲核菌、尖孢鐮刀菌均有較好的生物防治能力。而且其生長速

3、度也相對較快，在28℃條件下，4d就能長滿9cm的平板，在3d時候就開始有暗色的子囊殼產生。
　　通過產酶培養(yǎng)基誘導，每天測毛殼菌H10菌株纖維素類酶活，發(fā)現28℃、170rpm條件下，培養(yǎng)2d酶活達到最大，其中濾紙酶活、外切葡聚糖酶活、內切葡聚糖酶活、β-葡萄糖苷酶活分別為0.55U、0.35U、0.47U、0.47U。接著通過在28℃、170rpm條件下，PDB液體發(fā)酵培養(yǎng)。經過研究發(fā)現，液體培養(yǎng)過程中菌體幾乎不產生生殖結構，

4、沒有子囊殼、以及子囊孢子等結構的存在。推測可能是由于氧氣量以及附著物的原因，造成菌絲無法產生生殖結構。進一步研究在不同的pH、溫度條件下對代謝物抑菌能力的影響。將發(fā)酵液在0.1MPa，40℃下進行濃縮。研究發(fā)現，在初始pH為6.5時，抑菌率達到最大至47.32%。在發(fā)酵時間為13d，代謝物的抑菌能力最大至43.11%。研究還發(fā)現菌體量的大小對代謝物的產量也有影響。
　　盡管本課題主要是基礎研究，但是它擴大了生物防治的菌種資源，并且