蠟蚧輪枝菌抗逆菌株的篩選及殺蟲活性的測定.pdf

1、蠟蚧輪枝菌(Verticillium lecanii)是一種廣泛分布的蟲生真菌，能夠寄生刺吸式和咀嚼式口器害蟲，可用于溫室及田間防治農(nóng)業(yè)害蟲。本文對蠟蚧輪枝菌的(V3450、Vp28、V16063)3個菌株進行紫外誘變處理，并對發(fā)酵培養(yǎng)基做出篩選，測定了菌株的殺蟲活性，探究性的進行了蠟蚧輪枝菌新劑型的研究。
　　 蠟蚧輪枝菌3個菌株在室內(nèi)紫外線(功率20w、波長253.7nm、照射距離為60cm)分別照射0.5、1、2、3、4、

2、5、6min，結(jié)果表明孢子的萌發(fā)率隨照射時間的延長而降低，照射2min時正突變率最高，V3450、Vp28、V16063分別為12.5％、11.88％、19.57％。對照射處理獲得的正突變菌株進行菌絲生長和分生孢子產(chǎn)孢量比較試驗，誘變菌株以紫外照射2min最佳。獲得的3個誘變菌株經(jīng)16代轉(zhuǎn)接培養(yǎng)后性狀仍穩(wěn)定，誘變菌株在室外紫外光下分生孢子的萌發(fā)率高于出發(fā)菌株，表明誘變菌株抗紫外線能力增強，遺傳穩(wěn)定。
　　 在5個(120:1、6

3、0:1、30:1、20:1、10:1)C、N摩爾比中，蠟蚧輪枝菌的產(chǎn)孢量在20:1時最高。在6種碳源（葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉、白砂糖、馬鈴薯）中，馬鈴薯培養(yǎng)基的孢子產(chǎn)量最高，馬鈴薯濃度的比較試驗中，24％濃度為最佳。6種氮源（黃豆粉、尿素、硝酸鈉、蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏）中，牛肉浸膏的孢子產(chǎn)量最高，黃豆粉次之，從價格因素考慮，以黃豆粉為氮源。黃豆粉在濃度為3.5％時孢子產(chǎn)量最高。對馬鈴薯、黃豆粉不同的濃度組合比較選擇，孢子產(chǎn)量最大

4、的馬鈴薯、黃豆粉的濃度分別為21％、4％。液體培養(yǎng)基瓶裝量(50/250、100/250、150/250mL/mL)以50mL/250mL孢子產(chǎn)量最大，接種量(1％、5％、10％)以10％孢子產(chǎn)量最大。
　　 蠟蚧輪枝菌3個菌株殺蟲活性的測定中，茶蚜的死亡率隨菌株孢子濃度的升高而增大，相對死亡率在第4、6d最高，V16063對茶蚜的毒殺作用最好，LC50為2.51×107孢子/mL，LT50為2.23d。朱砂葉螨卵的孵化率隨孢子

5、濃度的升高而降低，V16063對朱砂葉螨卵孵化率的抑制作用最好，LC50為3.16×107孢子/mL。柑橘全爪螨死亡率隨菌株孢子濃度的升高而增大，相對死亡率在第4d最高，Vp28的毒殺作用最好，LC50為8.51×105孢子/mL。
　　 蠟蚧輪枝菌無紡布菌條的制作，培養(yǎng)基中分別添加適量的Zn2＋、Cu2＋、Mo2＋、煙酸均可以促進蠟蚧輪枝菌產(chǎn)孢量的增加；同時添加Zn2＋、Cu2＋、Mo2＋、煙酸，孢子產(chǎn)量為7.81×108孢子