鱗翅目蔬菜害蟲殺蟲綠僵菌菌株的篩選、鑒定及培養(yǎng)條件研究.pdf

1、以菜青蟲、小菜蛾、夜蛾及螟蛾為代表的鱗翅目害蟲是危害蔬菜的主要害蟲，尤其威脅十字花科、豆科、茄瓜類以及旋花科蔬菜的生長、產(chǎn)量和商品品質(zhì)。長期以來，人們?yōu)榱朔乐芜@些害蟲，連續(xù)大量地使用化學(xué)農(nóng)藥，頻繁地更換農(nóng)藥種類，甚至于使用高毒、劇毒農(nóng)藥，直接威脅到人類健康，使害蟲的抗藥性越來越強，防治成本越來越高,而且造成對環(huán)境和生物多樣性的極大傷害，因此生物農(nóng)藥逐漸受到了廣泛關(guān)注。金龜子綠僵菌是一類重要的生防真菌，其具有的多樣性菌株對多種害蟲具有或廣

2、譜或?qū)Ｒ坏臍⑾x活性，有不污染環(huán)境、無殘留、對人畜無害、害蟲不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點，已經(jīng)越來越廣泛地用于蔬菜害蟲以及多種作物及林木害蟲的生物防治。
　　 本研究從實驗室收集的多個殺蟲綠僵菌菌株中，以4種鱗翅目蔬菜害蟲為對象，篩選具有毒力高、殺蟲譜廣的金龜子綠僵菌菌株,并對所篩選出的菌株的生物特征、分類學(xué)地位、培養(yǎng)條件、殺蟲毒力等進行了研究，并根據(jù)蔬菜害蟲特點對菌株制劑進行了初步探索。由于該菌株對蠐螬也有良好殺蟲作用，本研究還對該制劑

3、對蠐螬的殺蟲效率進行了初步測試。主要研究結(jié)果如下：①從現(xiàn)存菌株中篩選出一株對多種鱗翅目害蟲有良好殺蟲活性的綠僵菌菌株CQMa128。根據(jù)菌株的形態(tài)特征、生物學(xué)特征和rDNA 序列比對結(jié)果，確定了該菌株的分類學(xué)地位為金龜子綠僵菌大孢變種（Metarihzium anisopliae var.majus）。②以CQMa128菌株孢子懸液用點滴法分別接種菜青蟲、小菜蛾、玉米螟、家蠶4 齡幼蟲，1.0 x 108 mL-1 濃度的孢懸液對菜青蟲

4、、小菜蛾、玉米螟的校正死亡率分別為100％、83.3％、76.7％，而家蠶的累計死亡率僅為10％,低于此濃度家蠶死亡率極低，和空白對照沒有顯著差異。證明該菌株對菜青蟲、玉米螟、小菜蛾有很高侵染能力與殺蟲活性，而對家蠶相對安全。將所獲生測數(shù)據(jù)建立了CQMa128菌株與四種鱗翅目昆蟲的時間-劑量-死亡率模型(time-dose-mortalitymodel TMD)，分析顯示，所建模型均通過Hosmer-Lemeshow 擬合異質(zhì)性檢驗，并

5、由模型估計出了該菌株對鱗翅目昆蟲的劑量效應(yīng)和時間效應(yīng)。③通過單因素試驗，測試了不同pH、碳源、氮源及微量元素對金龜子綠僵菌CQMa128菌株液體發(fā)酵生長和產(chǎn)孢的影響，確定了其生長和產(chǎn)孢的最適單因素培養(yǎng)條件參數(shù)，該菌株的最適生長PH 為7.0、最佳碳源為蔗糖、最佳氮源為酵母膏，添加0.01％的Mg2+能夠最大促進該菌株的生長與產(chǎn)飽。在此基礎(chǔ)上，通過碳源、氮源及微量元素3個水平的正交試驗，確定菌株的最佳液體培養(yǎng)條件為：最適培養(yǎng)液pH 為7.

6、0，1L 培養(yǎng)液中以10.0g 蔗糖為碳源、3g 酵母膏為氮源、1.5g蛋白胨并添加0.01％Mg2+的營養(yǎng)配方，可以使CQMa128菌株產(chǎn)孢量比基礎(chǔ)培養(yǎng)基增加一倍，生物量增加51.9％。為大規(guī)模真菌農(nóng)藥生產(chǎn)提供依據(jù)。④對多種常用表面活性劑進行了篩選，從中篩選出能有效分散孢子，延長孢子保存時間的表面活性劑SP80、 T80.助劑、色拉油與孢子粉的重量百分比最佳的比例分別為8％、25％-30％、60％-70％，獲得了在水中分散性好、萌發(fā)率