小麥硬脂?；泽w蛋白脂肪酸去飽和酶基因(TaSSI1-1)的功能分析.pdf

1、SSI2基因編碼硬脂酰基載體蛋白脂肪酸去飽和酶，催化硬脂酸生成油酸，擬南芥ssi2突變體增強了植株對細菌、卵菌病原菌和黃瓜花葉病毒的抗性。本研究從蘇麥3號中克隆到4個TaSSI2基因，通過生物信息學分析，亞細胞定位分析，激素誘導下的表達分析，并利用短柄草轉基因和BSMV-VIGS體系下調基因表達分析其在赤霉病抗性白粉病抗性方面的作用，對TaSSI2-1的分子生物學性質進行了鑒定。主要研究結果如下:
　　1.同源克隆得到小麥TaSS

2、I2-1、TaSSI2-2、TaSSI2-3、TaSSI2-4基因并進行序列分析。TaSSI2-1與TaSSI2-2開放閱讀框(ORF)編碼392個氨基酸，兩者序列相似性為98％，TaSSI2-3ORF編碼391個氨基酸，TaSSI2-4ORF編碼333個氨基酸，兩者相似度為99％。聚類分析表明，TaSSI2-3、TaSSI2-4與已報道的OsSSI2具有較高相似性。
　　2.利用煙草和洋蔥表皮細胞進行亞細胞定位分析，結果表明，T

3、aSSI2-1可能定位在高爾基體分泌的囊泡中。
　　3.實時熒光定量PCR分析TaSSI2-1基因的表達。結果顯示，茉莉酸甲酯處理抑制TaSSI2-1基因的表達，處理24h后，抑制效果最明顯，表達量僅為未處理時的5％。TaSSI2-1基因不響應水楊酸的誘導。
　　4.利用BSMV-VIGS沉默TaSSI2-1基因后，輝縣紅提高了對白粉病的抗性。葉部離體培養(yǎng)鑒定TaSSI2-1基因下調后，增強了對禾谷鐮刀菌的敏感性，并且，在小

4、麥穗部沉默TaSSI2-1基因后，有利于赤霉菌的侵染和發(fā)生，說明TaSSI2-1基因在白粉病與赤霉病抗病過程中發(fā)揮不同的作用。
　　5.TaSSI2-1基因的短柄草遺傳轉化。在短柄草中過量表達TaSSI2-1基因，T2代純系進行葉片離體培養(yǎng)鑒定，發(fā)現(xiàn)過表達TaSSI2-1基因可以提高短柄草對赤霉病的抗性。
　　6.BSMV-VIGS應用的拓展。利用該技術成功沉默小麥近緣種粗山羊草AL8/78及野生二粒小麥AS14中的PDS基