云貴川和甘肅地區(qū)小麥條銹菌群體的MFLP分析.pdf

1、小麥條銹病是由小麥條銹菌Pucciniastriiformisf.sp.tritici引起的真菌性病害,是嚴(yán)重危害世界許多國(guó)家小麥生產(chǎn)的主要流行病害。目前我國(guó)是世界上最大的小麥條銹病流行區(qū)。種植抗病品種是防治小麥條銹病最經(jīng)濟(jì)有效的措施,但是由于條銹菌新毒性小種的不斷產(chǎn)生和發(fā)展,抗病品種的抗性喪失現(xiàn)象十分嚴(yán)重。小麥條銹菌屬專性寄生菌,無(wú)法人工培養(yǎng),基于鑒別寄主來(lái)進(jìn)行的常規(guī)小種鑒定及監(jiān)測(cè)方法繁雜、費(fèi)工費(fèi)時(shí),嚴(yán)重制約了小麥條銹菌群體遺傳與生物

2、學(xué)研究。
　　 微衛(wèi)星錨錠片段長(zhǎng)度多態(tài)性(MFLP)是建立在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上、結(jié)合了擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP)和微衛(wèi)星錨錠引物技術(shù)(SSR—anchorprimer)雙重原理的新一代分子標(biāo)記技術(shù)。本研究建立了適用于專性寄生銹菌的MFLP技術(shù),并首次利用該技術(shù)對(duì)來(lái)自云南、貴州、四川和甘肅地區(qū)的73個(gè)菌系進(jìn)行了分子多態(tài)性分析,初步揭示了以上地區(qū)小麥條銹菌群體的MFLP聚類結(jié)構(gòu)及區(qū)間關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.通過(guò)

3、對(duì)DNA提取、限制性內(nèi)切酶二次酶切、PCR雙重?cái)U(kuò)增等實(shí)驗(yàn)因素的選擇優(yōu)化,建立了適用于小麥條銹菌研究的MFLP分子標(biāo)記分析體系。
　　 2.從456對(duì)MFLP引物組合中,篩選出13對(duì)帶型質(zhì)量好、分辨率高并具有一定多態(tài)性的引物組合,在供試73個(gè)小麥條銹菌菌系的基因組中,13對(duì)引物共擴(kuò)增出42條多態(tài)性條帶。
　　 3.對(duì)云南、貴州、四川以及甘肅四個(gè)省份的73個(gè)小麥條銹菌標(biāo)樣或菌系進(jìn)行了MFLP聚類分析,結(jié)果表明被測(cè)菌系的相似系

4、數(shù)的基值為0.47,在相似系數(shù)0.60處,被測(cè)菌系可劃分為A,B兩組,沒(méi)發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)組群。MFLP聚類結(jié)果不能明確區(qū)分甘肅和云貴川條銹菌群體,可能與區(qū)間存在廣泛的菌源交流有關(guān)。
　　 4.從來(lái)自云貴川的27個(gè)小麥條銹菌菌系的MFLP聚類分析結(jié)果可以看出,其相似系數(shù)基值為0.43,在相關(guān)系數(shù)0.61以上,可劃分為2組。在第一組中,除2個(gè)四川菌系外,其余均為云貴菌系,第二組中,除3個(gè)云貴菌系外,多數(shù)為四川菌系,說(shuō)明云貴川地區(qū)的小麥條銹菌