某馬場(chǎng)H3N8亞型馬流感病毒的分離鑒定及對(duì)犬易感性的實(shí)驗(yàn).pdf

1、2007年12月，北京某馬場(chǎng)共有23匹馬，一周內(nèi)有21匹相繼發(fā)病，根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查和臨床癥狀初步疑似馬流感。采集病馬的鼻汁，經(jīng)處理后接種SPF雞胚，分離到一株馬流感病毒，經(jīng)HI和基因序列分析試驗(yàn)鑒定為H3N8亞型馬流感病毒，毒株命名為A/Equine/Huabei/2/2007(H3N8)，簡(jiǎn)稱EHB07，雞胚半數(shù)感染量為106.5EID50/0.1 ml。確診本次疫情由H3N8亞型馬流感病毒感染引起。EHB07的HA基因與鴨源毒株A/

2、Duck/Ukraine/1963(H3N8)、A/Nanchang/1681/1992(H3NS)和中國(guó)吉林分離株A/Equine/Jilin/1/1989(H3N8)的同源性較低(本毒株為迄今為止唯一的一株從馬體分離到的禽源流感毒株)(Guo Y，1992)，分別為76.85，77.1％和77.8％，與其它馬源毒株的同源性較高，為90.4％～99.1％，其中與2005年意大利巴里分離毒株A/Equine/Bari/2005(H3N8

3、)的同源性最高，達(dá)99.1％。與日本茨城分離毒株已發(fā)表的部分序列比較發(fā)現(xiàn)，二者的同源性為97.63％。EHB07的NA基因和2007年日本分離株A/Equine/Ibaraki/1/07(H3N8)處于同一分支內(nèi)，親緣關(guān)系最近，同源率97.3％；與鴨源毒株和中國(guó)吉林分離的馬源毒株差異較大，同源性差，同源率為74.8％～77.2％，其中與吉林株的核苷酸同源率為74.9％。除此以外，本實(shí)驗(yàn)毒株與世界上分離的其它馬源毒株的同源率為90.0％～

4、98.7％，與2002年美國(guó)肯塔基州的分離毒株同源性最高，達(dá)98.7％。因此，也說明本實(shí)驗(yàn)分析的毒株起源于馬，而非禽類。與1992年本地發(fā)生的馬流感疫情相比，本次疫情具有流行范圍小、傳播速度慢、病情緩和、容易治療、恢復(fù)迅速的特點(diǎn)。
　　 2004年～2006年美國(guó)連續(xù)發(fā)生犬流感疫情，而且初步研究確定犬流感是由H3N8亞型馬流感病毒感染引起，受到全世界的關(guān)注。為了確定A/Equine/Huabei/2/2007(H3N8，F(xiàn)4)毒

5、株對(duì)犬的易感性，我們選擇14只寵物犬進(jìn)行了攻毒試驗(yàn)。以105.5EID50/只(條)的劑量經(jīng)滴鼻點(diǎn)眼和靜脈注射的途徑進(jìn)行攻毒，攻毒后定期檢查犬的臨床癥狀表現(xiàn)、體溫、血常規(guī)、血清生化并采集鼻咽拭子，并按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)于攻毒后6天、14天分別剖殺試驗(yàn)犬，采集臟器病料進(jìn)行病毒分離和病理組織學(xué)觀察。結(jié)果所有攻毒犬無(wú)任何臨床感染的癥狀，體溫、血細(xì)胞數(shù)量、生化指標(biāo)均無(wú)任何異常，病例組織學(xué)觀察未見明顯病變，病毒分離除了有一條金色尋回獵犬的鼻咽拭子分離到病