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文檔簡介
1、1、概念:組織培養(yǎng):利用植物離體器官、組織或細胞(包括原生質(zhì)體),在適宜的人工培養(yǎng)基上和無菌條件下進行培養(yǎng),使其生長、增殖、進而發(fā)育形成小植株的方法。也稱之為離體培養(yǎng)(Invitroculture)。愈傷組織:原指植物在受傷后,于傷口表面形成的一團薄壁細胞。在組織培養(yǎng)中,指在人工培養(yǎng)基上由外植體長出來的一團無序生長的薄壁細胞。外植體:由活植物體上切取下來的可以用于組織培養(yǎng)的組織或器官2、為什么說愈傷組織是最為常見的培養(yǎng)方式?原因:大部分
2、組織培養(yǎng)經(jīng)歷callus再生途徑長出植株;callus可以用于懸浮培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)。3、組織培養(yǎng)的類型有哪些?a按培養(yǎng)方法:固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、看護培養(yǎng)、微室培養(yǎng)、包埋培養(yǎng)等b按培養(yǎng)過程:初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)4、組織培養(yǎng)在園藝業(yè)(農(nóng)業(yè))上的應用有哪些?a倍性育種:花藥培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)b突變體篩選:愈傷組織培養(yǎng)c創(chuàng)造新種質(zhì):細胞融合d克服胚敗育:胚培養(yǎng)e植物性藥物和生物制品的生產(chǎn)5、在組織培養(yǎng)技術的發(fā)展中做出巨大貢獻的人。6、一個正規(guī)的組織
3、培養(yǎng)實驗室應具備哪些基本儀器?有何用途?烘箱,冰箱,滅菌鍋,超凈工作臺,酸度計,搖床,顯微鏡,天平,培養(yǎng)箱。玻璃器皿,微孔過濾器,細胞計數(shù)器,接種用具。7、一個正規(guī)的組織培養(yǎng)實驗室應具備哪些房間?洗滌室(區(qū)),制備室(區(qū)),滅菌室(區(qū)),貯放室(區(qū)),操作室(區(qū)),培養(yǎng)室(區(qū)),觀察室(區(qū)),藥品室(區(qū))8、詳細敘述組織培養(yǎng)過程中的基本技術規(guī)程洗滌,滅菌,無菌操作~9、培養(yǎng)基的類型有哪些?a按性質(zhì)分:基本培養(yǎng)基,完全培養(yǎng)基b按狀態(tài)分:固
4、體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基10、培養(yǎng)基的主要成分有哪些?各有何作用?a無機營養(yǎng)成分:大量元素(氮,磷,鉀,鈣,鎂,硫)微量元素(硼、錳、鋅、鉬、銅、鈷、氯、鐵)b有機營養(yǎng)成分:含氮有機物(維生素、氨基酸)碳源和能源,植物激素c其他成分:活性炭,瓊脂,抗生素,緩化劑11、配制培養(yǎng)基的基本步驟及注意事項有哪些?選擇,配置(取樣,加成分,測PH)12、什么是人工種子?有哪些特點與優(yōu)點?人工種子:(artificialseeds)亦稱體細胞種子。任何
5、一種經(jīng)人工種皮包被或裸露的,具有形成完整植株能力的繁殖體均可稱之為人工種子。優(yōu)點:a可以固定雜種優(yōu)勢;b解決部分名貴植物自然繁殖難的問題;c可以迅速繁殖生物工程產(chǎn)生的新材料;d在包裹材料中,可以加入農(nóng)藥化肥激素等;e可以產(chǎn)生無毒苗,用于脫毒;f批量生產(chǎn)、成本低、發(fā)芽率和生長速率一致;病毒的汁液感染法(saptransmission)是一種用于檢驗病毒的所有方法中最為敏感的方法,由受檢植株上取下葉片,置于等容積(WV)的緩沖液(0.1mo
6、lL磷酸鈉)中,用研缽和研桿將葉片研碎。在指示植物(對某種或某些特定病毒非常敏感的植物)的葉片上撒上少許600號金剛砂,然后用受檢植物的葉汁輕輕涂于其上。適當用力摩擦,以使指示植物葉表面細胞受到感染,但又不要受傷葉片。大約5min后,用水輕輕洗去接種葉片上的殘余汁液。把接過種的指示植物放在一間溫室或防蚜蟲罩內(nèi),株間以及與其他植物間都要隔開一定距離。23、滅菌和消毒有何區(qū)別?為什么?a滅菌:用物理或化學方法,殺死物體表面和孔隙內(nèi)一切微生物
7、或生物體,即所有生命的物質(zhì)全部殺死。b消毒:殺死、消除或抑制部分微生物,使之不發(fā)生作用。24、常用的滅菌方法各有哪些優(yōu)缺點?a干熱滅菌:160180℃1.52.0hb濕熱滅菌:121℃2040minc接種前用酒精棉球擦試,并在酒精燈火焰上灼燒滅菌。d紫外燈照射(接種室、超凈臺、接種箱):波長260nm,距離小于1.2m,2030min。e臭氧滅菌機:12hf熏蒸滅菌:58mlm3甲醛5gm3高錳酸鉀;冰醋酸;13%高錳酸鉀或3%來蘇兒。
8、g接種臺噴霧消毒:75%酒精。25、采用高壓蒸汽滅菌時,應注意哪些事項?26、根據(jù)發(fā)育方向,初代培養(yǎng)可分為幾種類型?a叢生芽的發(fā)育b不定芽的發(fā)育c胚狀體的發(fā)育d原球莖的發(fā)育27、組培成苗途徑有幾條28、理解無菌無菌操作含義29、污染、褐變和玻璃化產(chǎn)生的原因及預防對策是什么?污染:在組培過程中培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌,導致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。a污染原因:細菌、真菌為病源菌;污染途徑有外植體帶菌,培養(yǎng)基及器皿滅菌不徹底,操作人員未遵守操作規(guī)程,
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