植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)

1、一、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類(lèi)型？其理論依據(jù)是什一、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類(lèi)型？其理論依據(jù)是什么？么？（1）廣義的植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）是指在無(wú)菌和人工預(yù)知的控制條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對(duì)離體的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或生長(zhǎng)、分化成完整植株的技術(shù)。狹義的植物組織培養(yǎng)僅指對(duì)植物的組織（如分生組織、表皮組織、薄壁組織等）及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織（callus）進(jìn)行離體培養(yǎng)的

2、技術(shù)。（2）類(lèi)型：植株的培養(yǎng)；胚胎培養(yǎng)；器官培養(yǎng)；組織培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)；原生質(zhì)體培養(yǎng)。（3）植物細(xì)胞全能性（totipotency）是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。它是指一個(gè)生活的植物細(xì)胞，只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核，它就會(huì)有一整套發(fā)育成一個(gè)完整植株的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)臈l件下，這些信息可以表達(dá)，再生成一個(gè)完整植株。三、試述目前植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用。三、試述目前植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用。答：（1）植物離體快繁、（2）無(wú)病毒苗木培育、（3）培育新品種或

3、創(chuàng)制新物種、（4）次生代謝物生產(chǎn)、（5）種質(zhì)資源保存（6）人工種子。一、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。一、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。培養(yǎng)基的滅菌方法培養(yǎng)基的滅菌方法：高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅茵法：培養(yǎng)基消毒滅菌時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，也不可超過(guò)滅菌鍋規(guī)定的壓力范圍（1.15kgfcm2或O.15MPa，溫度126℃)；否則，培養(yǎng)基中的蔗糖、有機(jī)物質(zhì)，特別是維生素類(lèi)物質(zhì)就會(huì)分解，導(dǎo)致培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。過(guò)濾除菌法過(guò)濾除菌法：

4、過(guò)濾滅菌的原理是溶液通過(guò)濾膜后，細(xì)菌的細(xì)胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。器具的滅菌方法器具的滅菌方法：（1）干熱滅菌法干熱滅菌法干熱滅菌法是將器具長(zhǎng)時(shí)間放在高溫下消除雜菌的一種方法。其具體做法是將需要滅菌的器具(玻璃器皿或器械)先用鋁箔包好，放入溫度設(shè)定為150℃的恒溫干燥箱內(nèi)，保溫2h，取出冷卻后便可以使用。（2）高壓蒸汽滅茵法）高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅菌法是將需滅菌的玻璃器皿、器械或培養(yǎng)基等放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，通過(guò)高溫高壓進(jìn)行滅菌

5、的一種方法。一般在1.06kg／cm2的壓力下(121℃)下保持15～20min，就可達(dá)到滅菌效果。對(duì)于無(wú)菌操作所用的各種器械，如鑷子、解剖刀、解剖針等，可采用灼燒滅菌。一般的消毒辦法是把它們先在95％酒精中浸一下，然后再置火焰上灼燒，然后放在滅過(guò)菌的支架上，待冷卻后使用。二、簡(jiǎn)述植物材料消毒的一般過(guò)程。二、簡(jiǎn)述植物材料消毒的一般過(guò)程。第一步：材料的修整、刷洗、沖洗。第二步：是用洗衣粉水或肥皂水浸洗并攪動(dòng)。第三步：材料的表面滅菌。D(2

6、，4－二氯苯氧乙酸)、NAA(萘乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)，它們作用的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?4－DNAAIBAIAA。在培養(yǎng)基中加入細(xì)胞分裂素的目的，主要是為促進(jìn)細(xì)胞分裂和由愈傷組織或器官上分化不定芽。作用的強(qiáng)弱順序?yàn)椋篢DZ，4PUZT2－iP6－BAKT(7)瓊脂：它的主要作用是使培養(yǎng)基在常溫下凝固，同時(shí)不參與代謝(8)其他成分：①活性炭減少一些有害物質(zhì)的影響，性炭使培養(yǎng)基變黑，有利于某些植物生根，對(duì)形態(tài)發(fā)生和器官形成有

7、良好的效應(yīng)。②硝酸銀起到促進(jìn)愈傷組織器官發(fā)生或體細(xì)胞胚胎發(fā)生的作用，并能使某些原來(lái)再生困難的物種分化出再生植株。③抗生素防止由外植體內(nèi)生菌造成的污染，減少培養(yǎng)物中材料的損失。④防止酚類(lèi)物質(zhì)污染的添加劑洗滌剛切割的外植體傷口表面，或過(guò)濾滅菌后加入固體培養(yǎng)基的表層.一、簡(jiǎn)述植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞分化、脫分化與再分化的概念一、簡(jiǎn)述植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞分化、脫分化與再分化的概念。（1）植物細(xì)胞全能性）植物細(xì)胞全能性（totipotencytoti

8、potency）是指一個(gè)生活的植物細(xì)胞，只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核，它就會(huì)有一整套發(fā)育成一個(gè)完整植株的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)臈l件下，這些信息可以表達(dá)，再生成一個(gè)完整植株。（2）細(xì)胞）細(xì)胞分化(differentiation)(differentiation)是指生物在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞由一般變?yōu)樘厥獾默F(xiàn)象，即普通形態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞，向著不同形態(tài)結(jié)構(gòu)的方向發(fā)展，從而在機(jī)能上也各不相同。（3）脫分化脫分化(dedifferentiation)(

9、dedifferentiation)由失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂，形成一種高度液泡化的呈無(wú)定形態(tài)的薄壁細(xì)胞即愈傷組織的現(xiàn)象（4）再分化（）再分化（redifferentiationredifferentiation）由無(wú)分化的愈傷組織的細(xì)胞再轉(zhuǎn)變成為具有一定結(jié)構(gòu)，執(zhí)行一定生理功能的細(xì)胞團(tuán)和組織，進(jìn)而構(gòu)成一個(gè)完整的植物體或植物器官的現(xiàn)象（或過(guò)程），二、再分化有哪幾種方式？它們的特點(diǎn)是什么？二、再分化有哪幾種方式？它們的特

10、點(diǎn)是什么？再分化有兩種途徑，一種是器官發(fā)生器官發(fā)生(ganogenesis)(ganogenesis)途徑途徑，一種是胚胎胚胎發(fā)生發(fā)生(embryogenesis)(embryogenesis)途徑途徑。前者具體包括：①先形成芽，后在芽基部長(zhǎng)根；②先形成根，再?gòu)母啃纬裳浚虎墼谟鷤M織不同部位分別形成芽和根，然后根、芽的維管束接通形成完整植株；④僅形成芽或根（如茶樹(shù)的花粉愈傷組織誘導(dǎo)器官分化時(shí)，往往只形成根，而芽的發(fā)生則十分困難）。在

11、大多數(shù)情況下，再分化過(guò)程是在愈傷組織細(xì)胞中發(fā)生的，但在有些情況下，再分化可以直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞中，無(wú)須經(jīng)歷愈傷組織階段。四、試述優(yōu)良愈傷組織應(yīng)用具備的特點(diǎn)及獲得優(yōu)良愈傷組織的方四、試述優(yōu)良愈傷組織應(yīng)用具備的特點(diǎn)及獲得優(yōu)良愈傷組織的方法。法。特點(diǎn)（1）高度的胚性或再分化能力，以便從這些愈傷組織得到再生植株。（2）容易散碎，以便用這些愈傷組織建立優(yōu)良的懸浮系，并且在需要時(shí)能從中分離出全能性原生質(zhì)體。（3）旺盛的自我增殖能力，以便用這些愈