竹葉黃酮對(duì)肉雞的生物效應(yīng)及作用機(jī)理研究.pdf

1、竹葉黃酮是屬于黃酮類化合物主要從竹葉中提取，目前應(yīng)用在醫(yī)藥衛(wèi)生和食品生產(chǎn)中，但在肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用較少。本文通過研究竹葉黃酮的最佳提取工藝及體外抑菌、抗氧化效果，對(duì)肉雞的安全性評(píng)價(jià)，對(duì)肉雞急性肝損傷的保護(hù)效果，對(duì)肉雞免疫功能的影響，對(duì)盲腸菌群多樣性的影響，在熱應(yīng)激狀態(tài)下和常規(guī)飼養(yǎng)下對(duì)肉雞生產(chǎn)性能等生物效應(yīng)的影響和作用機(jī)理，為其在生產(chǎn)中應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　試驗(yàn)一:應(yīng)用超聲波輔助提取考察浸提劑體積分?jǐn)?shù)、浸提時(shí)間、溫度、液料比對(duì)毛竹、慈

2、竹、琴絲竹、牧竹4種竹葉提取率的影響，并考察了其抑菌活性及抗氧化活性。結(jié)果表明:四種因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響大小依次為:乙醇體積分?jǐn)?shù)B＞反應(yīng)時(shí)間A＞提取溫度C＞液料比D，其最佳提取工藝為:體積分?jǐn)?shù)76％乙醇溶液在液料比10∶1(mL/g)、70℃水浴條件下浸提1.5h。在此工藝條件下，毛竹、慈竹、琴絲竹、牧竹的提取率分別為:16.25％、12.35％、9.58％、5.49％。對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌的敏感性大小為:慈竹＞琴絲竹＞毛竹＞牧竹，對(duì)金黃

3、色葡萄球菌的敏感性大小為:慈竹＞毛竹＞牧竹＞琴絲竹。測(cè)得4種竹葉黃酮的抗氧化活性為:對(duì)氧自由基的清除率:慈竹＞琴絲竹＞毛竹＞牧竹;對(duì)羥自由基的清除率:慈竹＞毛竹＞琴絲竹＞牧竹;對(duì)DPPH自由基的清除率，慈竹＞毛竹＞琴絲竹＞牧竹。表明竹葉黃酮具有較好的抑菌作用和抗氧化活性，其中慈竹提取的竹葉黃酮抑菌作用和抗氧化活性最好。
　　試驗(yàn)二:竹葉黃酮對(duì)肉雞的安全性評(píng)價(jià)。選取200只1d健康肉雞隨機(jī)分成5個(gè)處理組，每個(gè)處理組40只，分為4個(gè)重

4、復(fù)籠飼養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)籠10只。以臨床推薦劑量的1、3、5、10倍對(duì)肉雞連續(xù)7d給藥。結(jié)果表明:給藥期間，肉雞生長(zhǎng)正常，3倍劑量組顯著提高肉雞體重、紅細(xì)胞數(shù)量及白細(xì)胞重量;3、5倍劑量組顯著提高抗氧化指標(biāo)及脾、法氏囊指數(shù)，而劑量過大效果降低;給藥組血清中AST與ALT、BUN與CRE含量與對(duì)照組差異不明顯;10倍劑量組與對(duì)照組相比，主要器官的組織結(jié)構(gòu)均未發(fā)現(xiàn)異常變化。以上說明竹葉黃酮安全、低毒，臨床應(yīng)用安全。
　　試驗(yàn)三:竹葉黃酮對(duì)肉

5、雞急性肝損傷的保護(hù)作用。選取36只37d健康雄性肉雞，隨機(jī)平均分成6組，以CCl4制備急性肝損傷模型。其中為空白組，模型組，陽性藥物組，低、中、高劑量(20mg、40mg、100mg/kg.b.w)竹葉黃酮給藥組。結(jié)果表明:模型組增重率顯著低于其他組(P＜0.05），肝臟、脾臟、腎腫脹明顯，顏色加深，器官指數(shù)相高于空白組;血清中ALT和AST、MDA的活性高于其他組，SOD值低于其他組。陽性藥物組和給藥組血清中主要生化指標(biāo)與空白組差異不

6、顯著，TC、TG維持一定的穩(wěn)定狀態(tài)。同時(shí)，給藥組還能減輕CCl4對(duì)肝細(xì)胞的損害，基本維持肝細(xì)胞的增殖、分化，抑制肝細(xì)胞的過度凋亡。竹葉黃酮可以通過提高機(jī)體抗氧化能力，減輕脂質(zhì)過氧化損傷，保證肝臟細(xì)胞對(duì)脂肪正常代謝來發(fā)揮保肝作用的。本試驗(yàn)中40mg/kg.b.w效果最佳。
　　試驗(yàn)四:竹葉黃酮對(duì)肉雞免疫器官和免疫功能的影響。選取300只1d雄性肉雞，隨機(jī)4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25只。除對(duì)照組外，其余3個(gè)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加2

7、00mg/kg、400mg/kg、800mg/kg劑量的竹葉黃酮，試驗(yàn)為期42 d。結(jié)果顯示:竹葉黃酮可以提高免疫器官指數(shù)，促進(jìn)免疫器官發(fā)育，提高EtRFC％，促進(jìn)脾臟、胸腺和法氏囊淋巴細(xì)胞的增殖和分化，抑制細(xì)胞凋亡。試驗(yàn)組的ND和AI的抗體滴度得到提升，促進(jìn)了脾臟IL-2和IFN-γ基因的表達(dá)，提高血清中IL-2和IFN-γ的含量。試驗(yàn)表明竹葉黃酮具有增強(qiáng)肉雞免疫的功效。
　　試驗(yàn)五:竹葉黃酮對(duì)肉雞盲腸菌群多樣性的影響。試驗(yàn)分組

8、同試驗(yàn)四，使用Illumina MiSeq高通量測(cè)序技術(shù)分析竹葉黃酮對(duì)肉雞盲腸菌群多樣性的影響。結(jié)果顯示:高通量測(cè)序獲得了1，240，937條有效序列，平均每個(gè)樣品34，470條序列;根據(jù)97％的序列相似性得到95，287個(gè)OTUs。其中優(yōu)勢(shì)菌群為厚壁菌門Firmicutes，擬桿菌門Bacteroidetes，放線菌門Actinobacteria和變形菌門Proteobacteria。竹葉黃酮組在各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較在菌群屬水平上差異

9、顯著。結(jié)果表明竹葉黃酮能顯著影響肉雞腸道菌群種類的多樣性，并呈劑量依賴性。
　　試驗(yàn)六:竹葉黃酮對(duì)熱應(yīng)激下肉雞生產(chǎn)性能的研究。選取7d肉雞150只，隨機(jī)分成5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。除對(duì)照組外，其余4個(gè)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加400mg/kg、800mg/kg、1600g/kg、3200mg/kg竹葉黃酮，試驗(yàn)期5周。結(jié)果顯示，添加竹葉黃酮可以降低料重比，提高屠宰性能，改善肉色，降低煮熟損失率、提高系水力和肌肉嫩度。竹葉黃

10、酮添加組血清中MDA含量、AST活性顯著下降，T-AOC、SOD活性升高;肝組織SOD上升，MDA含量下降;胸肌中T-AOC、SOD活性提高;腿肌中SOD活性提高， MDA含量降低。說明竹葉黃酮能通過提高肉雞抗氧化能力，從而改善肉雞熱應(yīng)激下的生產(chǎn)性能，提高其屠宰性能，改善肌肉品質(zhì)。本試驗(yàn)中1600mg/kg竹葉黃酮添加量抗熱應(yīng)激效果最佳。
　　試驗(yàn)七:竹葉黃酮通過遺傳途徑對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響。試驗(yàn)分組同試驗(yàn)四。竹葉黃酮能促進(jìn)肉雞生

11、長(zhǎng)，提高飼料轉(zhuǎn)化率，提高屠宰性能，改善肉質(zhì)。同時(shí)，竹葉黃酮顯著提高了血液中SOD、T-AOC、CAT的活力，并降低了MDA含量，降低血液中TG、TC的含量，提高HDL-C含量，從而影響肉雞血脂水平;對(duì)ALB、AST、BUN值無顯著影響。竹葉黃酮還能通過調(diào)節(jié)肝臟中PPARγ、ATGL、ADSL基因和胸肌中的LPL基因、ADSL基因的表達(dá)來影響肉雞的脂肪代謝，提高肌肉中肌苷酸含量，從而改善雞肉風(fēng)味。
　　綜上所述，竹葉黃酮在體外具有抑

12、菌、抗氧化作用，10倍臨床給藥劑量對(duì)肉雞安全、無毒。竹葉黃酮對(duì)CCL4造成的肝損傷能通過提高機(jī)體的抗氧化能力，促進(jìn)肝細(xì)胞增殖分化、減少凋亡作用發(fā)揮保肝功能。日糧中添加竹葉黃酮能提高脾臟IL-2和INF-γ基因的表達(dá)，提高血清中IL-2和INF-γ的含量，促進(jìn)免疫器官的發(fā)育而增強(qiáng)肉雞的免疫功能;增加盲腸優(yōu)勢(shì)菌群的豐度。竹葉黃酮通過提高抗氧化水平緩解熱應(yīng)激對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響;提高正常飼養(yǎng)肉雞的生產(chǎn)性能，對(duì)肝臟中PPARγ、ATGL、ADS