芳姜黃酮抗銀屑病作用及機(jī)理研究.pdf

1、銀屑病是一類常見的通常伴有角化細(xì)胞異常增殖等特征的鱗屑丘疹性皮膚病，屬于一種慢性易復(fù)發(fā)的炎性皮膚疾病。銀屑病在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率為0.1-3％，不同國(guó)家的發(fā)病率差異較大，在歐美國(guó)家發(fā)病率高達(dá)2-3%，我國(guó)銀屑病發(fā)病率為0.4%，約有500萬患者。銀屑病患者病程較長(zhǎng)、容易復(fù)發(fā)、有的病例幾乎終生不愈。此外，銀屑病患者易患上其他疾病，如銀屑病關(guān)節(jié)炎、焦慮與抑郁、淋巴瘤和代謝綜合征等，對(duì)患者的身體健康和精神狀況造成很大的影響。近年來，銀屑病新藥

2、研發(fā)取得了較大的進(jìn)展，主要以腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、Janus激酶（JAK）和白介素（IL）及其受體（ILR）等免疫相關(guān)炎癥介質(zhì)為靶點(diǎn)開發(fā)抗銀屑病藥物。針對(duì)這些靶點(diǎn)研發(fā)的銀屑病治療藥物已有多個(gè)上市或進(jìn)入臨床研究，但仍然存在療效和毒副作用等問題。因此，研究高效、低毒的抗銀屑病新藥仍然是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。
　　芳姜黃酮是姜黃油的主要的成分，具有抗腫瘤、抗炎和抗氧化等活性。其抗炎機(jī)理是通過調(diào)控JNK、p38 MAPK、ERK1/2

3、的磷酸化水平以及PI3K/Akt信號(hào)通路，影響NF-κB的活性，控制內(nèi)源性炎癥因子如腫瘤壞死因子（TNF）、白介素（IL）、干擾素（IFN）以及其他相關(guān)致炎因子的表達(dá)。芳姜黃酮在抗炎方面的重要應(yīng)用，引起了課題組極大的關(guān)注。
　　本論文在文獻(xiàn)調(diào)研的基礎(chǔ)上，以抗銀屑病為目標(biāo)，研究芳姜黃酮抑制銀屑病的作用及機(jī)理，開展了芳姜黃酮分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定、芳姜黃酮與銀屑病靶點(diǎn)相互作用和對(duì)小鼠銀屑病的抑制作用及機(jī)理研究。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：

4、r>　?。?）通過文獻(xiàn)調(diào)研，綜述了銀屑病的發(fā)病機(jī)理和當(dāng)前治療藥物的研究進(jìn)展，同時(shí)概述了芳姜黃酮的分離、純化和生物活性的研究進(jìn)展。
　?。?）從姜黃油中分離芳姜黃酮樣品，并進(jìn)行了結(jié)構(gòu)及純度鑒定。采用柱色譜層析富集、反相制備色譜分離和石油醚萃取獲得芳姜黃酮，經(jīng)過質(zhì)譜、核磁共振和高效液相色譜的手段確證了所制備樣品的主要成分為芳姜黃酮，純度為98.6%。
　?。?）研究了芳姜黃酮對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病模型的抑制作用效果。建立了咪喹

5、莫特誘導(dǎo)的小鼠銀屑病模型，通過PASI評(píng)價(jià)、H&E染色發(fā)現(xiàn)芳姜黃酮可以顯著緩解咪喹莫特引起的銀屑病樣皮膚損傷，明顯抑制過度角質(zhì)化現(xiàn)象，能輕微抑制皮膚表皮層細(xì)胞增殖和表皮層的厚度增加，對(duì)皮膚屏障具有保護(hù)作用。
　　（4）研究了芳姜黃酮抑制銀屑病的作用機(jī)理。調(diào)研并整理了銀屑病治療的靶點(diǎn)信息，從 RCSB蛋白數(shù)據(jù)庫獲得相關(guān)靶點(diǎn)的晶體結(jié)構(gòu)，應(yīng)用 Sybyl軟件中Surflex-Dock程序構(gòu)建了17個(gè)靶點(diǎn)的對(duì)接模型，將芳姜黃酮與17個(gè)靶點(diǎn)

6、進(jìn)行對(duì)接預(yù)測(cè)，篩選出芳姜黃酮對(duì)TLR7和p38 MAPK具有潛在的抑制作用；利用免疫組化的方法測(cè)量了小鼠表皮層CD8+ T細(xì)胞、COX-2和NF-κB的含量變化情況，證實(shí)芳姜黃酮可有效抑制表皮層CD8+ T細(xì)胞含量增加，并在低濃度下降低COX-2的含量，不影響表皮層 NF-κB的表達(dá)；采用蛋白免疫印跡法考察銀屑病相關(guān)的激酶磷酸化水平以及免疫因子表達(dá)量變化，發(fā)現(xiàn)芳姜黃酮抑制p38 MAPK的磷酸化和下調(diào)皮膚NF-κB的表達(dá)，提高IL-1β