棗愈傷組織的誘導(dǎo)及多倍體誘變研究.pdf

1、本試驗(yàn)在大田條件下，以二倍體冬棗(Ziziphusjujubacv.Dongzao)和梨棗(Z.jujubacv.Lizao)為試材，在誘導(dǎo)生成愈傷后，用秋水仙素對(duì)愈傷進(jìn)行誘變，首次由愈傷途徑獲得了四倍體植株；以冬棗和辣椒棗(Z.jujubacv.Lajiaozao)葉片為試材，在離體條件下誘導(dǎo)愈傷的形成，并利用浸泡和混培等方法進(jìn)行秋水仙素處理。對(duì)誘變的四倍體和二倍體進(jìn)行了形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)的比較。此外，對(duì)組培條件下愈傷生成和誘變過(guò)程中出現(xiàn)

2、的褐化現(xiàn)象進(jìn)行了分析。 1.在田間大樹(shù)截干條件下，干徑、截口覆蓋方式、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類和濃度、硝酸銀濃度等對(duì)截口愈傷的形成影響很大，以截口莖粗在2.2cm～4.2cm，采用泥+黑袋為覆蓋物，TDZ4.0mg/L和硝酸銀2.0mg/L處理截口效果最好，大約5d就有愈傷生成。 2組織培養(yǎng)條件下，不同品種葉片愈傷組織形成需要的培養(yǎng)基種類、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類和濃度不同，對(duì)于冬棗而言，適宜的培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基，適宜的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類

3、和濃度為T(mén)DZ1.0mg/L；而對(duì)于辣椒棗而言，以WPM培養(yǎng)基，TDZ0.5mg/L為宜。兩個(gè)品種適宜的培養(yǎng)條件是25～34℃，暗培養(yǎng)14d。3.大田條件下，愈傷的誘變效果因品種、秋水仙素濃度和處理時(shí)間而不同，對(duì)于梨棗而言，0.05﹪秋水仙素處理24h效果最好，愈傷變異率達(dá)到13.3﹪；對(duì)于冬棗來(lái)說(shuō)，0.05﹪秋水仙素處理18h效果最好，愈傷變異率達(dá)到6.7﹪。4.組培條件下，誘變材料、誘變方法和誘變時(shí)間對(duì)愈傷的誘變效果不同。對(duì)于冬棗而

4、言，用0.01﹪秋水仙素浸泡繼代的葉片愈傷4d，變異率最高，達(dá)13.3﹪；混培法中，葉片預(yù)培養(yǎng)10d形成的愈傷，用0.004﹪的秋水仙素處理15d的變異率最高，達(dá)6.7﹪。 5.不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度對(duì)于冬棗葉片切割愈傷的增值效果不同，以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加0.5mg/L的TDZ，效果最好。 6.在大田條件下，誘變得到的四倍體與其二倍體對(duì)照相比有許多不同，具體表現(xiàn)為葉片變厚、革質(zhì)化加重，葉色變深，葉長(zhǎng)、葉寬增大

5、，葉形指數(shù)變小，葉緣鋸齒增大、鋸齒數(shù)目減少，且變異植株葉片全部表現(xiàn)多倍體特征；細(xì)胞學(xué)鑒定發(fā)現(xiàn)，梨棗和冬棗的染色體數(shù)均為2n=2x=24條，而變異株染色體數(shù)為2n=4x=48條，葉片氣孔明顯變大，氣孔密度減小，保衛(wèi)細(xì)胞中葉綠體數(shù)目增多；以新生棗頭莖尖或幼葉為試材，流氏細(xì)胞儀測(cè)定DNA含量表明，變異株中存在DNA含量加倍的細(xì)胞。 7.組培條件下，秋水仙素對(duì)愈傷的傷害作用表現(xiàn)為褐化現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致愈傷死亡。本試驗(yàn)通過(guò)在冬棗葉片愈傷培