廣譜拮抗菌WB3的激光誘變篩選與復(fù)合菌肥的生物防治應(yīng)用.pdf

1、目的：鑒定細(xì)菌WB3的種屬并確認(rèn)其拮抗范圍；通過(guò)激光對(duì)拮抗菌WB3進(jìn)行誘變篩選，以篩選出拮抗能力得到有效提高并可穩(wěn)定遺傳的突變菌株；使其與另一株具有廣譜拮抗性的枯草芽孢桿菌QM3進(jìn)行混合培養(yǎng)發(fā)酵，將發(fā)酵菌液與生化黃腐酸菌肥配制成可應(yīng)用于田間病害防治的復(fù)合生物菌肥。 方法：通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)以及16SrRNA序列分析對(duì)已分離得到的WB3進(jìn)行菌種鑒定；做WB3針對(duì)12株常見(jiàn)植物病害的平板拮抗實(shí)驗(yàn)來(lái)初步確認(rèn)其拮抗范圍；采

2、用He—Ne激光照射具有拮抗能力的枯草芽孢桿菌WB3，同時(shí)以番茄早疫病菌作為指示菌，以期獲得誘變效果最佳且能穩(wěn)定遺傳的正向突變菌株；嘗試將QM3與WB3進(jìn)行混合培養(yǎng)，包括平板交叉劃線、液體搖瓶培養(yǎng)等方法，觀察混合培養(yǎng)下的細(xì)菌總數(shù)以及拮抗能力的變化；通過(guò)改進(jìn)玉米粉液體培養(yǎng)基來(lái)摸索適合二者混合培養(yǎng)的工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基；將混合拮抗菌液與生化黃腐酸菌肥進(jìn)行復(fù)配獲得復(fù)合生物防治菌肥，并進(jìn)行田間應(yīng)用試驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)其防治效果。 結(jié)果：WB3經(jīng)鑒定是一

3、株枯草芽孢桿菌，且對(duì)12株植物致病真菌均具有拮抗效應(yīng)，是一株廣譜拮抗細(xì)菌；30min He—Ne激光輻照對(duì)WB3有明顯的誘變作用，所篩選出的最佳突變株WB3’對(duì)指示菌的拮抗能力有顯著的提高并能穩(wěn)定遺傳：QM3與WB3’可以較好地共同生長(zhǎng)，且混合拮抗菌發(fā)酵液在拮抗能力方面出現(xiàn)了互補(bǔ)提高的現(xiàn)象；復(fù)合生物菌肥相較于化學(xué)農(nóng)藥，在番茄等植物大田試驗(yàn)的防病、治病以及促生等效應(yīng)方面具有全面優(yōu)勢(shì)。 結(jié)論：運(yùn)用He—Ne激光誘變方法可以提高WB3