番茄灰霉病拮抗菌篩選及復(fù)合生物海藻液肥研制.pdf

1、番茄灰霉病菌是由半知菌亞門灰葡萄孢屬（Botrytis cinerea）真菌侵染所引起對番茄危害較重的病害，影響果實產(chǎn)量和品質(zhì)。篩選灰霉病拮抗菌并制備生物菌肥是生物防治植物病害的重要途徑。目前，對生物菌肥的研究大多數(shù)針對一種拮抗菌，單一菌株的防病效果較復(fù)合菌株低，防治效果不理想。鑒此，本研究從寧波番茄保護地健康植株根際土壤篩選出兩株對番茄灰霉病菌有高效抑制作用的菌株LM-Y和LM-N，對其進行鑒定，研究復(fù)合菌株對番茄灰霉病的抑菌特性及適

2、宜發(fā)酵條件，以海藻液為載體制備復(fù)合生物海藻肥，通過室內(nèi)盆栽試驗來初步探究海藻菌肥的防病和促生長效果，為生產(chǎn)復(fù)合微生物肥料提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1、番茄灰霉病拮抗菌的分離鑒定。采用稀釋涂布及平板劃線法分離純化菌株，平板對峙法初篩得到24株對番茄灰霉病菌具有拮抗作用的生防菌。以水稻赤霉病菌和油菜立枯絲核菌為指示菌，復(fù)篩選取對兩種病原菌均有拮抗作用的菌株最終得到2株高效抑制番茄灰霉病菌的菌株，分別命名為LM-Y和LM-N。結(jié)

3、合形態(tài)特征、生理生化分析和16s rDNA序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，鑒定LM-Y為解淀粉芽孢桿菌，LM-N為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌。
　　2、拮抗菌株液體發(fā)酵條件優(yōu)化。拮抗試驗表明菌株LM-Y和LM-N具有親和性，可以混合發(fā)酵。復(fù)合菌株搖床發(fā)酵培養(yǎng)的最適發(fā)酵條件為:初始pH7.0，接種量5％，裝液量90mL(250mL三角瓶)，發(fā)酵時間48h，搖床溫度29℃，轉(zhuǎn)速180r·min-1，最佳接種比例為LM-Y∶LM-N=1∶2，培養(yǎng)所得發(fā)酵液

4、對番茄灰霉菌的抑菌直徑較單菌株分別提高了了44.31％和32.47％。
　　3、復(fù)合生物海藻菌肥的制備及防病增產(chǎn)效果評價。不同濃度復(fù)合生物海藻菌肥處理番茄種子可增加種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢，其中400倍液處理效果最佳。盆栽試驗定期統(tǒng)計番茄灰霉病的發(fā)病情況和測定番茄根際土壤中病原菌數(shù)量變化，測定番茄的株高、莖粗及收獲后的單果重。結(jié)果表明，施用復(fù)合生物海藻液肥（處理5）和復(fù)合菌株發(fā)酵液（處理3）可抑制灰霉病病原菌繁殖，病情指數(shù)比只接種病原