福建省(木奈)、李、桃種質(zhì)資源的ISSR分子分析.pdf

1、ISSR（Inter simple sequence repeats）是一種新型的分子標(biāo)記技術(shù)，它能夠反應(yīng)植物在遺傳物質(zhì)DNA水平下的差異，不受任何環(huán)境條件影響，在遺傳上多為共顯性。ISSR分子標(biāo)記方法簡便，重復(fù)性好，結(jié)果可靠。ISSR遺傳標(biāo)記在部分作物及果樹的親本鑒定和雜交種子純度檢測上已得到了行之有效的應(yīng)用。但將該項(xiàng)高新技術(shù)應(yīng)用到福建?。灸危⒗?、桃的品種鑒定上，至今在國內(nèi)外未見報道。福建特色水果（木奈）的起源及其和桃、李的親緣關(guān)

2、系也存在爭議。因此，本文擬通過ISSR分析進(jìn)一步探討它們之間的親緣關(guān)系。 （木奈）（Prunus salicina Lindl． Var． cordata J．Y．Zhang et al．）是福建特產(chǎn)佳果，已有400多年的栽培歷史，棟的主要品種有‘花（木奈）’、‘青（木奈）’、‘油（木奈）’。（木奈）、李、桃都屬于薔薇科（Rosaceae）李屬（Prunus）植物，但對（木奈）的起源問題存在不同的意見。本研究以福建省主栽的（木奈

3、）、李、桃等69份品種資源為對象，運(yùn)用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對其進(jìn)行研究，分析探討它們之間的親緣關(guān)系與遺傳多樣性。主要結(jié)果如下： 1．本研究針對（木奈）、李富含酚類化合物和多糖等物質(zhì)導(dǎo)致DNA提取和純化困難的特點(diǎn)，進(jìn)行綜合設(shè)計，探索出一套操作簡便、快速、準(zhǔn)確、高質(zhì)量的（木奈）、李、桃DNA提取和純化技術(shù)。 2．在前人研究的基礎(chǔ)上，本研究分別從引物退火溫度、dNTPs濃度、模板DNA濃度、引物濃度和Taq酶量等方面去優(yōu)化擴(kuò)增

4、體系，探索出一套適合于分析（木奈）、李、桃種質(zhì)資源的ISSR反應(yīng)體系。 3．本試驗(yàn)從96個ISSR引物中，篩選出16個多態(tài)性豐富、重復(fù)性好的引物。用篩選的16個引物對69份薔薇科李屬果樹品種資源進(jìn)行ISSR分析，共擴(kuò)增出119條譜帶，其中多態(tài)性譜帶為108條，多態(tài)性比率為90．8％。 4．根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果在DS=0．562處做第一等級劃分，可將69個樣本分為4類。第一類包括所有的（）和李；第二類只有青梅；第三類只有紅葉李；第

5、四類包括所有的桃。第一等級劃分出了（）、李與桃品種間的差異，由此我們可以斷定（木奈）與李的親緣關(guān)系要比桃近。在DS=0．742處做第二等級劃分，可將第一大類再劃分為9組。 5．試驗(yàn)結(jié)果表明，供試的69份薔薇科李屬果樹品種資源兩兩之間的GS值在0．330～0．952之間。油棟和青（）間相似度最高，遺傳相似系數(shù)最高為0．952，青棟與安格諾李最高相似系數(shù)為0．923，供試的（）與李平均相似系數(shù)為0．771。而櫬與桃之間遺傳相似系數(shù)最