水稻黃單胞菌水稻致病變種中7個與致病相關(guān)基因的功能鑒定.pdf

1、水稻白葉枯病是由植物病原細(xì)菌水稻黃單胞菌水稻致病變種(Xanthomonas oryzae pv.oryzae以下簡稱Xoo)引起的，它是最嚴(yán)重的水稻病害之一。
　　 hrpG、hrpX是Xoo的兩個關(guān)鍵致病基因。為了得到研究毒性基因表達調(diào)控的hrpG、hrpX突變體，我們通過同源自殺質(zhì)粒整合的方法構(gòu)建了hrpG、hrpX的突變體，致病性互補檢測試驗結(jié)果顯示：hrpG、hrpX的突變體在水稻上完全喪失了致病性，而hrpG、hrp

2、X互補株能恢復(fù)其在水稻上的致病性，說明我們的突變體構(gòu)建成功。
　　 本實驗室梁瑩曾經(jīng)構(gòu)建過pdeA、pcaD、pin的突變體，但是沒有成功構(gòu)建其互補株，無法確認(rèn)這些突變體的正確性，為了了解這幾個基因在致病中的作用，我們構(gòu)建了pdeA、pcaD、pin的突變體并成功互補。致病性檢測發(fā)現(xiàn)，pdeA、pcaD、pin的突變體在水稻上的致病性顯著降低，而互補株能恢復(fù)其在水稻上的致病性。
　　 為了進一步了解rpfG的作用，我們也

3、成功的構(gòu)建了rpfG的突變體以及rpfG、RpfG的HDc結(jié)構(gòu)域的過量表達株。致病性檢測結(jié)果顯示：rpfG的突變體及rpfG、RpfG的HDc結(jié)構(gòu)域的過量表達株在水稻上的致病性顯著降低，rpfG突變后對過敏反應(yīng)沒有影響，但是它能減少可擴散性信號因子、胞外多糖、胞外木聚糖酶和胞外淀粉酶的產(chǎn)生。rpfG的互補株能恢復(fù)這些表型，RpfG的HDc結(jié)構(gòu)域的單獨互補只能部分恢復(fù)這些表型，RpfG的REC結(jié)構(gòu)域單獨互補時則對這些表型沒有影響。這些結(jié)果

4、表明：rpfG對Xoo的致病性是重要的，而REC結(jié)構(gòu)域?qū)pfG基因功能的完整性則是必須的。
　　 RsmA(repressor of secondary metabolism)/CsrA(carbon storageregulator)在許多細(xì)菌中是一個轉(zhuǎn)錄后全局調(diào)控因子。RsmA/CsrA在動植物病原細(xì)菌的致病過程中起重要作用。雖然.rsmAXcc在Xcc中的作用已經(jīng)知，但是rsmAxoo在Xoo中的作用還不清楚。由于Xcc

5、中的rsmAxcc與Xoo中的rsmAXoo的一致性只有93％，所以rsmAXcc在Xoo中作用還是值得我們進一步研究的。
　　 為了進一步了解rsmAXoo的作用，我們也成功的構(gòu)建了rsmAXoo的突變體及互補株。實驗結(jié)果顯示rsmAXoo的突變體完全喪失了引起過敏反應(yīng)的能力，但是它的突變體中的可擴散性信號因子、胞外多糖、胞外纖維素酶和胞外淀粉酶的產(chǎn)量明顯下降。另外，rsmAXoo突變以后還增加了細(xì)胞內(nèi)糖原的產(chǎn)生，能形成生物膜