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文檔簡介
1、Ⅰ型鴨病毒性鴨肝炎(duck hepatitis virus,DVH)是雛鴨的一種高度致死性的、傳播迅速的病毒性疾病。感染Ⅰ型鴨肝炎病毒(DHV-Ⅰ)的雛鴨發(fā)病率和死亡率很高,免疫接種是目前預防和控制鴨肝炎的主要手段。但是,DHV仍然時有發(fā)生,給養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大的經濟損失。目前臨床上急需簡便快捷的檢測鴨肝炎病毒抗體水平的檢測方法,作為DHV抗體監(jiān)測參考標準,指導養(yǎng)鴨生產。本研究旨在優(yōu)化本實驗室已建立的DHV-Ⅰ抗體乳膠凝集試驗方法,觀測
2、蛋鴨和雛鴨的DHV-Ⅰ抗體變化曲線。具體研究成果如下:
1.采用差速超高速離心的方法純化病毒,用磷鎢酸負染電鏡觀察、鑒定,可見清晰完整的DHV-Ⅰ病毒粒子,有個別病毒的的核酸部分尚未降解,病毒粒子直徑約為20-40nm,核衣殼為對稱的二十面體。
2.將經過純化病毒滅活后用于致敏聚苯乙烯乳膠,優(yōu)化檢測DHV-Ⅰ抗體的LAT方法。血清抗體的檢測標準為:用倍比稀釋的試驗鴨血清與致敏后的乳膠進行反應,能夠在3-5分鐘
3、內產生肉眼可見顆粒。
3.用LAT方法觀察經過四次鴨肝炎弱毒疫苗免疫的蛋鴨血清中的DHV-Ⅰ抗體,得到了高免蛋鴨隨時間變化的DHV-Ⅰ抗體變化曲線。研究發(fā)現第二次免疫后10天到第四次免疫后10天抗體水平較高,抗體效價維持在8以上,第四次免疫后20天抗體水平急劇下降至2左右。因此,如要獲得高免卵黃抗體,需對蛋鴨進行多次免疫并適時檢測其抗體水平。
4.用LAT方法監(jiān)測無母源抗體雛鴨的DHV-Ⅰ抗體變化,獲得了無母
4、源抗體雛鴨免疫后隨時間變化的DHV-Ⅰ抗體變化規(guī)律,研究發(fā)現,無母源抗體的雛鴨經DHV-Ⅰ弱毒疫苗免疫后一個星期抗體水平達到最高,可達到7.1,之后略有下降,直到免疫后20天抗體效價維持在5左右,而注射卵黃抗體的雛鴨在注射抗體后的第3天抗體水平達到最高,可達7.7,免疫后7天抗體水平逐漸下降至5左右。因此,對人工主動免疫和被動免疫進行比較發(fā)現DHV-Ⅰ弱毒疫苗免疫更適用于雛鴨早期免疫,而高免DHV-Ⅰ卵黃抗體則適用于DVH的治療和緊急預
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