雛鴨病毒性肝炎病毒致病機理研究.pdf

1、本研究采用鴨肝炎病毒標準強毒R85952株人工感染3日齡雛鴨，通過臨床觀察發(fā)病情況、血液常規(guī)和血清生化指標測定、動態(tài)病理學觀察及DHV分布的測定，旨在揭示鴨肝炎病毒的致病機理。為進一步防治DVH提供理論依據(jù)。試驗將300只3日齡雛鴨隨機分成2組：對照組60只，試驗組240只，分別隔離飼養(yǎng)。試驗組每只皮下注射病毒液0.2ml，觀察和記錄攻毒后臨床表現(xiàn)和死亡情況。攻毒后6h、12h、16h、20h、24h、28h、32h和36h分別取18只

2、試驗鴨和6只對照鴨，采集試驗組和對照組鴨的血液做血常規(guī)測定并通過離心分離血清進行血清生化指標測定。同時取其肝、脾、腦、心、肺、腎、胰和小腸，置10％中性福爾馬林中固定，按常規(guī)石蠟包埋、切片。一部分切片經(jīng)H.E染色觀察其病理變化，另一部分用免疫酶組化法測定DHV的分布。留取部分肝組織切成1mm3的小塊，經(jīng)4℃3％戊二醛磷酸緩沖液固定，按常規(guī)脫水、包埋、超薄切片、染色、置JEM-100SX型透射電鏡觀察。 人工感染后其臨床癥狀為：試

3、驗組攻毒后12h鴨群的采食、飲水及精神狀況與對照組無明顯差異，18h試驗組有2只死亡，死前表現(xiàn)出倒地、頭后仰、兩腿后蹬，即典型的角弓反張癥狀，約有20％的雛鴨表現(xiàn)精神不振。至24h已有12只雛鴨死亡，120只雛鴨精神不振，24～36h試驗組鴨發(fā)病率100％，死亡率達80％，36h后死亡逐漸減少，5天后試驗組鴨存活17只，并耐過康復。而對照組雛鴨飲食、精神狀況均正常，除撲殺外無異常死亡。 血常規(guī)測定結(jié)果顯示：感染DHV的試驗組鴨的

4、紅細胞數(shù)量較對照組極顯著減少(P＜0.01)；試驗組鴨在感染DHV24h內(nèi)白細胞數(shù)量與對照組相比無明顯差異或略有下降，但24h后試驗組鴨白細胞數(shù)量較對照組顯著減少(P＜0.05)；試驗組鴨的血紅蛋白含量極顯著低于對照組(P＜0.01)；試驗組鴨的血液沉降速度極顯著高于對照組(P＜0.01)。 血清生化指標測定結(jié)果表明：血清Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、P5+等無機鹽離子濃度和尿素氮(BUN)含量變化不明顯，而且血漿滲

5、透壓(OSM)的變化也不明顯；谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(GGT)均較對照組有極顯著升高(P＜0.01)；血糖(GLU)濃度在攻毒后24～36h極顯著下降(P＜0.01)，甘油三脂(TG)、膽固醇(CHOL)和極低密度脂蛋白(VLDL)呈極顯著升高(P＜0.01)變化，表明血糖下降和血脂升高；總膽紅素(TBIL)和直接膽紅素(DBIL)分別從攻毒后20h和12h開始較對照組有顯著的升高(P＜0.05)。上

6、述的試驗結(jié)果提示：雛鴨感染鴨肝炎病毒后肝臟受損最明顯，呈現(xiàn)急性、壞死性肝炎的病理過程。 病理組織學變化：主要表現(xiàn)為肝、脾、腎、胰、腦和小腸各組織器官細胞的變性和壞死，心肌細胞和肺臟病變以水腫、炎性細胞浸潤和出血為主。肝組織主要超微結(jié)構(gòu)變化為肝細胞線粒體腫脹、崩解，肝糖原減少，細胞核變形或核膜破裂。 應(yīng)用免疫酶組化法對人工感染Ⅰ型DHV標準強毒R85952株的雛鴨不同時間的肝、脾、腦、心、肺、腎、胰和小腸各組織石蠟切片的病