黃顙魚leptin基因克隆、組織表達及其與脂類代謝關系的研究.pdf

1、瘦素(leptin，LEP)，是一種主要由脂肪細胞分泌的激素類細胞因子，具有廣泛的生物學功能，其主要功能是脂類代謝的重要調(diào)控激素。本實驗克隆和分析了黃顙魚leptin及其相關基因的結(jié)構(gòu)和表達，并初步闡明在黃顙魚卵巢發(fā)育過程中l(wèi)eptin對其脂肪動員及卵巢發(fā)育的相關作用。
　　 1.黃顙魚leptin，leptin receptor(LEPR)及l(fā)eptin receptor overlapping transcript(LEPR

2、OT)基因cDNA全長序列分別為1191 bp，4195 bp和827 bp，分別編碼172，1086和130個氨基酸(amino acid, aa)。同時，構(gòu)建leptin及其相關基因的進化樹，并分析其蛋白結(jié)構(gòu)。
　　 通過熒光實時定量PCR，以β-肌動蛋白為內(nèi)參照研究黃顙魚不同組織LEP，LEPR及LEPROT基因的表達水平。結(jié)果表明，黃顙魚leptin及其相關基因在所有被檢測組織中均有表達，LEP在肝臟組織中表達量最高;

3、LEPR及LEPROT基因在體內(nèi)組織分布類似，最高表達量組織是腦垂體。
　　 2.黃顙魚卵巢發(fā)育過程中相關指標（包括形態(tài)學參數(shù)，粗脂肪含量，脂類代謝關鍵酶活性、mRNA豐度及l(fā)eptin與其受體基因的表達水平）的變化規(guī)律及相關關系的結(jié)果分析表明，黃顙魚卵巢發(fā)育過程中脂類代謝的途徑包括兩個時期:第一個時期是在各個脂肪存儲組織中通過肝臟脂肪的轉(zhuǎn)移、食物獲取或者脂肪生成進行脂肪的累積，第二個時期是這些存儲組織中脂肪的消耗，通過抑制攝食

4、、脂肪分解和脂肪向卵巢的轉(zhuǎn)移進而減少脂肪存儲組織的脂肪量。
　　 肝臟、腦和卵巢組織中l(wèi)eptin基因的mRNA水平在第Ⅲ期達到峰值，與此同時，黃顙魚體內(nèi)脂類代謝活躍，說明leptin作為機體脂肪儲存信號傳達到腦組織，從而調(diào)控脂肪累積，保證卵巢發(fā)育過程中的能量需求。Leptin及其受體在各組織不同期的差異性，說明其對卵巢的發(fā)育及脂肪動員有重要影響作用，而腦組織中l(wèi)eptin及其受體基因的表達量在第Ⅴ期時呈現(xiàn)下降趨勢，表明此時le