黃顙魚胰島素樣生長(zhǎng)因子受體及結(jié)合蛋白基因的鑒定與表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、黃顙魚是一種重要的經(jīng)濟(jì)魚類,具有明顯的兩性生長(zhǎng)異型,即同齡雄魚個(gè)體大于雌魚。IGF系統(tǒng)基因與生長(zhǎng)發(fā)育緊密相關(guān),而且其表達(dá)在魚類中具有雌雄差異。本實(shí)驗(yàn)分析了IGF的效應(yīng)因子IGF受體及調(diào)控因子IGF結(jié)合蛋白的序列特征和這些基因在下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸組織的表達(dá)差異,并檢測(cè)性激素處理對(duì)部分IGF受體及IGF結(jié)合蛋白在性腺中表達(dá)的影響,為進(jìn)一步探討黃顙魚性腺發(fā)育和生長(zhǎng)發(fā)育提供了一些理論基礎(chǔ)。
  主要研究結(jié)果如下:
  1

2、.黃顙魚IGF受體及IGF結(jié)合蛋白的序列分析
  通過(guò)黃顙魚轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析得到IGF受體及IGF結(jié)合蛋白基因序列,并構(gòu)建了各基因在脊椎動(dòng)物中的進(jìn)化樹,分析其進(jìn)化關(guān)系,并鑒定所得到的黃顙魚 IGFBP1、IGFBP2和IGFBP5分別為IGFBP1a、IGFBP2b和IGFBP5b。我們對(duì)IGF結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)域進(jìn)行比較分析,發(fā)現(xiàn)了很多特定結(jié)構(gòu)單元。如鋅指結(jié)構(gòu)域 CX2CX7C,CWCV基序,RGD基序,肝素結(jié)合序列YKKKQCRP,

3、核定位序列KGFFKRKQCKPSRGRKR等。這些特殊結(jié)構(gòu)賦予了基因許多不同的功能。
  2.黃顙魚IGF受體及IGF結(jié)合蛋白的組織表達(dá)分析
  IGF1R、IGF2R在精巢和卵巢中有明顯的差異表達(dá)(P<0.05),IGFBP1、2、3、5、7在不同性腺中的表達(dá)略有差異,但不具有顯著性(P>0.05),說(shuō)明黃顙魚的IGF受體可能與其性腺發(fā)育相關(guān)。在非性腺組織中有些基因的雌雄表達(dá)也具顯著差異,如IGF1R在雌雄肝臟中表達(dá)有明

4、顯差異,IGF2R在雌雄下丘腦及肝臟中表達(dá)具明顯差異, IGFBP1、2、3、5在雌雄個(gè)體肝臟中表達(dá)有顯著差異。此外,一些基因在某個(gè)組織中表達(dá)量較高,這暗示該基因可能具有某種特定功能。IGF1R的表達(dá)在精巢組織中最高, IGF2R的表達(dá)在雌性肝臟組織中最高,IGFBP1、2的表達(dá)在雄性肝臟組織中最高, IGFBP3、7在雌性垂體表達(dá)量最高,IGFBP5在雄性垂體表達(dá)最高。這說(shuō)明IGFBP家族不同成員可能對(duì)IGF系統(tǒng)的調(diào)控作用不同,而且參

5、與魚類生長(zhǎng)與性腺發(fā)育。
  3.性激素處理對(duì)黃顙魚IGF1R及IGFBP3在性腺表達(dá)的影響
  經(jīng)雌激素EE2處理后,IGF1R在精巢0-72 h內(nèi)的表達(dá)整體是呈升高趨勢(shì)。IGFBP3在精巢0-72 h內(nèi)的表達(dá)短時(shí)間內(nèi)增加后迅速趨于下降。經(jīng)雄激素MT處理后IGF1R在卵巢0-72h內(nèi)先微弱上升而后顯著下降,最后又有所回升。而IGFBP3在卵巢0-72 h內(nèi)呈先降低而后逐漸升高,最后又恢復(fù)至處理前表達(dá)水平的結(jié)果。這說(shuō)明IGF信

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