新型飼料添加劑雪蓮果低聚果糖的制備及其生物活性評價.pdf

1、本文以雪蓮果(SmallanthusSonchifolius)為原料提取低聚果糖，對雪蓮果低聚果糖提取過程中脫色、脫蛋白工藝、納濾分離純化技術(shù)進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，并對提取所得到的雪蓮果低聚果糖進(jìn)行了純度鑒定和結(jié)構(gòu)分析，對其生物活性進(jìn)行了探討，具體如下： 1、研究了超聲波輔助法和熱水浸提法提取雪蓮果低聚果糖的提取工藝，對料液比、溫度、時間分別進(jìn)行了單因素試驗和Lg(34)正交試驗，運用方差分析、極差分析、回歸分析對提取方法以及提

2、取過程中影響提取率的因素進(jìn)行了統(tǒng)計分析，并對最優(yōu)化組合問題進(jìn)行了定量研究，建立了具有良好預(yù)測性能的雪蓮果低聚果糖提取條件的最優(yōu)回歸模型：y=0.099+0.0002x1-0.040x。結(jié)果表明：影響低聚果糖得率的主次因素依次為料液比、提取時間、提取溫度；最佳提取工藝為：采用熱水浸提法，料液比1:3、浸提時間60min、浸提溫度25℃，在此優(yōu)化條件下，低聚果糖平均得率為0.0987。 2、考察了D72、D315、S—8、X—5、D

3、101這5種大孔樹脂對雪蓮果低聚果糖提取液脫色、脫蛋白效果以及低聚果糖保留率的影響，選擇了D101樹脂作為工作樹脂。在靜態(tài)吸附實驗中，確定了樹脂的吸附飽和時間，根據(jù)數(shù)據(jù)擬合出色素、蛋白質(zhì)的Freundlich吸附等溫模型。在動態(tài)吸附實驗中，確定了料液的最佳pH=2～3，此pH條件下色素、蛋白質(zhì)吸附率均較大。洗脫流速為1.5BV/h，此條件下可處理6BV的料液并保持脫色率在90％以上。 3、經(jīng)納米膜純水系數(shù)測定，線性關(guān)系成立，可通

4、過與實測膜通量值相比較，來檢驗非平衡熱力學(xué)模型的實用性及準(zhǔn)確性。通過操作因素對膜分離性能的影響試驗發(fā)現(xiàn)，隨著NaCl溶液濃度的增大，膜截留率下降，鹽的透析增加；在進(jìn)行脫鹽脫糖實驗時，選擇在酸性條件下(pH=1～3)進(jìn)行可以有效降低單價鹽的截留率，提高分離效率，強化脫鹽脫糖效果。就脫鹽效果而言，應(yīng)在保證一定的滲透通量下采用較低的循環(huán)流量，在5-10HZ之間較為合理。從耗能角度考慮，選擇操作壓力1.5bar—2.0bar，采用一級納濾膜透析

5、4次，二級納濾膜恒容透析5次所得產(chǎn)品中還原糖含量為4.7％，低聚果糖含量為94.25％。 4、經(jīng)HPLC測定發(fā)現(xiàn)，雪蓮果低聚果糖樣品中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為20.6％、51.4％、23.1％，經(jīng)二次納濾純化的雪蓮果低聚果糖樣品中低聚果糖含量為95.1％。經(jīng)質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)，雪蓮果低聚果糖樣品中含有5種分子量不同的組分(其分子量分別為180、342、504、666、828)，這5種組分分別是單糖(葡萄糖和果糖)、

6、二糖(蔗糖)、三糖(蔗果三糖)、四糖(蔗果四糖)、五糖(蔗果五糖)。IR分析結(jié)果顯示，雪蓮果低聚果糖主要是由β—呋喃果糖組成。經(jīng)氫譜和碳譜核磁共振分析發(fā)現(xiàn)，雪蓮果低聚果糖平均包含4個果糖單元。 5、通過對雪蓮果低聚果糖體外清除超氧陰離子自由基、體外抗肝組織自發(fā)脂質(zhì)過氧化作用以及對H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血作用影響的研究發(fā)現(xiàn)，雪蓮果低聚果糖具有一定的抗氧化活性；通過體外增菌實驗，表明雪蓮果低聚果糖濃度達(dá)到或高于15g/L時，對雙