雪蓮果葉中酚酸的分離鑒定及其生物活性研究.pdf

1、本文以云南豐富的雪蓮果葉為材料，對(duì)雪蓮果葉的化學(xué)成分，雪蓮果葉中酚酸的提取進(jìn)行了研究，采用大孔樹(shù)脂柱層析法對(duì)雪蓮果葉粗提物進(jìn)行了分離純化，確定了雪蓮果葉中酚酸的最佳提取和分離純化的條件，對(duì)雪蓮果葉酚酸中綠原酸進(jìn)行了分離鑒定，研究了雪蓮果葉酚酸抗氧化活性和抑菌能力，主要研究結(jié)果如下：
　　 1.雪蓮果葉的化學(xué)成分及礦物元素組成研究
　　 雪蓮果葉中含24.89％的總糖，18.75％的粗纖維，16.35％的蛋白質(zhì)，11.37

2、％的水分，5.10％的脂肪和9.14％的灰分，此外還含有P、Ca、Mn、Mg、Fe等多種礦物質(zhì)元素。
　　 2.雪蓮果葉中酚酸的提取工藝研究
　　 采用乙醇回流法研究了雪蓮果葉中酚酸的提取工藝，通過(guò)溶劑對(duì)比實(shí)驗(yàn)和單因素實(shí)驗(yàn)確定了從雪蓮果葉中提取酚酸的最佳提取溶劑及影響提取率的主要因素，并通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了提取條件，得到了從雪蓮果葉中提取酚酸的最佳工藝條件：用乙醇30％提取，料液比為1：40，在95℃預(yù)處理15 min，提

3、取溫度為70℃，浸提1 h，提取2次，在此條件下酚酸提取量為32.92 mg/g。
　　 3.雪蓮果葉中酚酸的分離純化研究
　　 篩選出X-5型大孔吸附樹(shù)脂用于分離純化雪蓮果葉酚酸，最佳分離條件為：進(jìn)樣液酚酸含量低于1.384 mg/mL，pH為3，流速為1.0 mL/min下進(jìn)行吸附，用50％乙醇以1.0 mL/min的流速進(jìn)行洗脫，得到純度為46.8％的雪蓮果葉酚酸，用乙酸乙酯進(jìn)一步純化可提高純度至82.53％。

4、r>　　 4.雪蓮果葉中酚酸中綠原酸的鑒定研究
　　 利用薄層色譜（TLC）和高效液相色譜（HPLC）技術(shù)分離出雪蓮果葉中含有綠原酸。TLC以硅膠G為固定相，以乙酸乙酯-水-甲酸-甲苯（85：10：10：4，V：V：V）為流動(dòng)相，綠原酸為對(duì)照品，用2％FeCl3-1％K3Fe（CN）6為顯色劑，分離鑒定出雪蓮果葉中酚酸含有綠原酸成分。利用HPLC對(duì)雪蓮果葉酚酸進(jìn)行了分析，建立了HPLC測(cè)定雪蓮果葉中綠原酸的方法。色譜條件為：色

5、譜柱為Hypersil ODS2 C18柱（4.6 mmx300mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.5％磷酸水溶液（8：92,V：V），檢測(cè)波長(zhǎng)為325 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為25℃。雪蓮果葉中的綠原酸含量為0.494 mg/g。
　　 5.雪蓮果葉酚酸的生物活性探討
　　 雪蓮果葉酚酸提取物對(duì)·OH、O2-·和DPPH自由基有一定的清除作用，清除自由基的效果與樣品濃度存在一定的量效關(guān)系。雪蓮果葉酚酸對(duì)革