水稻多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因(Ospgip1)克隆與表達(dá).pdf

1、植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一種能夠特異性識別和結(jié)合真菌內(nèi)切多聚半乳糖醛酸酶(PG)并抑制其活性的蛋白，其富含亮氨酸重復(fù)(LRR)，在植物抗真菌過程中發(fā)揮重要作用。
　　 本研究以水稻品種Lemont、Jasmine85和YSBR1為材料，克隆水稻PGIP基因(Ospgip1)，并進(jìn)行原核表達(dá)，同時明確OsPGIP1對水稻紋枯病菌PG的抑制活性。另外，通過熒光定量PCR，分析Ospgip1在水稻不同抗、感紋枯病品種

2、中的時空表達(dá)，以及黃化處理和病菌侵染對Ospgip1的誘導(dǎo)表達(dá)，從而探明PGIP表達(dá)量與品種抗病性的關(guān)系。具體結(jié)果如下：
　　 1、通過PCR技術(shù)，克隆獲得Ospgip1基因。該基因全長為1184 bp，具有930 bp的完整開放閱讀框(ORF)，終止密碼子為TAA，無內(nèi)含子。生物信息學(xué)分析表明，OsPGIP1由309個氨基酸組成，含9個LRR重復(fù)，1個疏水性N端信號肽；二級結(jié)構(gòu)LRR區(qū)含有α-螺旋和β-折疊各9個，分別位于LR

3、R首尾，此外，不規(guī)則盤繞(卷曲)占有較高比例(53％)；三級結(jié)構(gòu)傾向于產(chǎn)生纖維狀構(gòu)象。
　　 2、RT-PCR研究表明，Ospgip1在水稻抗、感紋枯病品種中均能表達(dá)，但在不同生育期、不同部位是否表達(dá)則有差異。根據(jù)Real Time PCR測定，水稻抗病品種YSBR1和Jasmine85中Ospgip1的表達(dá)量要明顯高于感病品種Lemont，表明Ospgip1表達(dá)與品種抗病性有一定關(guān)系。
　　 3、Real Time P