南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)星標(biāo)記驗(yàn)證.pdf

1、南方小花蝽(Orius similis Zheng)是我國的特有物種，它廣泛分布于我國南方農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中的一種重要的捕食性天敵。國內(nèi)已有大量的關(guān)于南方小花蝽分類學(xué)、生物學(xué)、及生態(tài)學(xué)方面的研究報(bào)道，但在對(duì)于南方小花蝽是否存在孤雌生殖這一生殖方式方面還有爭(zhēng)議。為明確南方小花蝽的生殖方式，揭示其孤雌生殖的可能性，本文從室內(nèi)脅迫環(huán)境條件下和分子生物學(xué)水平上兩個(gè)方面系統(tǒng)的研究了南方小花蝽的生殖方式，其主要結(jié)果如下：
　　 一、脅迫環(huán)境下南

2、方小花蝽孤雌生殖的發(fā)生
　　 南方小花蝽在室內(nèi)飼養(yǎng)時(shí)，其繁殖和發(fā)育主要受溫度、光照、濕度、食物種類和食物豐歉5個(gè)因素的影響。本文在室內(nèi)環(huán)境下，將這5個(gè)不同因素分別設(shè)置5個(gè)不同水平，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，研究南方小花蝽在室內(nèi)脅迫環(huán)境下的孤雌生殖現(xiàn)象，試驗(yàn)未觀察到南方小花蝽處女雌成蟲的產(chǎn)卵現(xiàn)象；但是在溫度28℃、濕度70%、光照L14：D10，以花粉+棉蚜/薊馬飼養(yǎng)并給以充足的食物來源，將20頭南方小花蝽處女雌成蟲放在一起飼養(yǎng)時(shí)會(huì)有產(chǎn)無效卵

3、的現(xiàn)象。
　　 二、南方小花蝽自然種群孤雌生殖的分子驗(yàn)證
　　 根據(jù)微衛(wèi)星位點(diǎn)的側(cè)翼序列高度保守，其部分引物在起源相近的物種中可以通用的特點(diǎn)，本文利用從NCBI上搜索到的與Orius similis Zheng同屬小花蝽科的0.strigicollis和0.sauteri共19個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)南方小花蝽自然種群的個(gè)體基因組分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增的結(jié)果進(jìn)行6%的變性聚丙烯酰胺膠電泳分析，最終篩選出6個(gè)最合理的位點(diǎn)并對(duì)其P

4、CR體系的配制和PCR擴(kuò)增程序進(jìn)行了優(yōu)化。
　　 進(jìn)入孤雌生殖的卵的有三種不同的發(fā)育途徑：(1)由卵直接發(fā)育成為新個(gè)體，其基因型為單倍體；(2)卵以自合的方式恢復(fù)二倍體后發(fā)育成新的個(gè)體，這種方式產(chǎn)生的孤雌生殖后代均為二倍體且其基因型只有兩種：純合子或者與母體基因型完全一樣；(3)卵核不經(jīng)過減數(shù)分裂直接發(fā)育成新個(gè)體，其基因型與母體完全一樣。
　　 利用上述篩選到的6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)對(duì)南方小花蝽自然種群的個(gè)體進(jìn)行分子水平的研究