南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)星標記驗證.pdf

1、南方小花蝽(Orius similis Zheng)是我國的特有物種，它廣泛分布于我國南方農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中的一種重要的捕食性天敵。國內(nèi)已有大量的關于南方小花蝽分類學、生物學、及生態(tài)學方面的研究報道，但在對于南方小花蝽是否存在孤雌生殖這一生殖方式方面還有爭議。為明確南方小花蝽的生殖方式，揭示其孤雌生殖的可能性，本文從室內(nèi)脅迫環(huán)境條件下和分子生物學水平上兩個方面系統(tǒng)的研究了南方小花蝽的生殖方式，其主要結果如下：
　　 一、脅迫環(huán)境下南

2、方小花蝽孤雌生殖的發(fā)生
　　 南方小花蝽在室內(nèi)飼養(yǎng)時，其繁殖和發(fā)育主要受溫度、光照、濕度、食物種類和食物豐歉5個因素的影響。本文在室內(nèi)環(huán)境下，將這5個不同因素分別設置5個不同水平，設計正交試驗，研究南方小花蝽在室內(nèi)脅迫環(huán)境下的孤雌生殖現(xiàn)象，試驗未觀察到南方小花蝽處女雌成蟲的產(chǎn)卵現(xiàn)象；但是在溫度28℃、濕度70%、光照L14：D10，以花粉+棉蚜/薊馬飼養(yǎng)并給以充足的食物來源，將20頭南方小花蝽處女雌成蟲放在一起飼養(yǎng)時會有產(chǎn)無效卵

3、的現(xiàn)象。
　　 二、南方小花蝽自然種群孤雌生殖的分子驗證
　　 根據(jù)微衛(wèi)星位點的側翼序列高度保守，其部分引物在起源相近的物種中可以通用的特點，本文利用從NCBI上搜索到的與Orius similis Zheng同屬小花蝽科的0.strigicollis和0.sauteri共19個微衛(wèi)星位點對南方小花蝽自然種群的個體基因組分別進行PCR擴增，將擴增的結果進行6%的變性聚丙烯酰胺膠電泳分析，最終篩選出6個最合理的位點并對其P

4、CR體系的配制和PCR擴增程序進行了優(yōu)化。
　　 進入孤雌生殖的卵的有三種不同的發(fā)育途徑：(1)由卵直接發(fā)育成為新個體，其基因型為單倍體；(2)卵以自合的方式恢復二倍體后發(fā)育成新的個體，這種方式產(chǎn)生的孤雌生殖后代均為二倍體且其基因型只有兩種：純合子或者與母體基因型完全一樣；(3)卵核不經(jīng)過減數(shù)分裂直接發(fā)育成新個體，其基因型與母體完全一樣。
　　 利用上述篩選到的6個微衛(wèi)星位點對對南方小花蝽自然種群的個體進行分子水平的研究