雜色鮑微衛(wèi)星標(biāo)記的開發(fā)及其遺傳模式分析.pdf

1、雜色鮑(Haliotis diversicolor)是我國(guó)東南沿海普遍養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)鮑類，由于長(zhǎng)期采用人工近交繁殖，造成了其種質(zhì)優(yōu)良性狀退化、抗逆性差，及時(shí)的對(duì)其開展遺傳育種改良工作顯得十分必要。本實(shí)驗(yàn)所用雜色鮑均為養(yǎng)殖群體，野生群體由于捕撈過度等原因已經(jīng)很難采樣，從分子水平對(duì)雜色鮑養(yǎng)殖群體進(jìn)行遺傳多樣性研究是種質(zhì)改良的基礎(chǔ)，也是雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的需要，而我國(guó)在南方養(yǎng)殖鮑的分子遺傳研究方面進(jìn)展較慢，至今未見國(guó)內(nèi)出現(xiàn)有關(guān)微衛(wèi)星研究雜色

2、鮑遺傳多樣性的報(bào)道。
　　 本研究通過對(duì)本實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一批雜色鮑微衛(wèi)星引物進(jìn)行篩選，并在雜色鮑養(yǎng)殖群體中進(jìn)行遺傳結(jié)構(gòu)分析，在雜色鮑家系中進(jìn)行遺傳模式的評(píng)估，以期獲得一定數(shù)量的雜色鮑SSR引物及其最佳擴(kuò)增條件，為進(jìn)一步進(jìn)行雜色鮑分子遺傳育種研究提供可用的SSR標(biāo)記和參考數(shù)據(jù)：
　　 1.引物篩選：用雜色鮑混合DNA模板對(duì)83對(duì)雜色鮑SSR引物進(jìn)行篩選，并優(yōu)化反應(yīng)條件，由此獲得了80對(duì)可用SSR標(biāo)記；分別從三亞、北海、臨高3

3、地采集了3個(gè)雜色鮑養(yǎng)殖群體各30個(gè)個(gè)體，在80對(duì)SSR標(biāo)記的最佳反應(yīng)條件下進(jìn)行擴(kuò)增，最終篩選出66對(duì)擴(kuò)增良好的微衛(wèi)星位點(diǎn)。
　　 2.群體遺傳結(jié)構(gòu)分析：3個(gè)不同地點(diǎn)的雜色鮑養(yǎng)殖種群間平均FST值為0.1076，遺傳分化程度中等；三亞、北海、臨高種群的等位基因數(shù)依次為3.6、3.7、3.6，期望雜合度(HE)依次為0.45614、0.48423、0.49343，觀測(cè)雜合度(HO)依次為0.39647、0.40000、0.40404

4、；上述結(jié)果為養(yǎng)殖雜色鮑的遺傳多樣性監(jiān)測(cè)提供了依據(jù)，顯示出3個(gè)雜色鮑養(yǎng)殖種群目前狀態(tài)良好，并通過對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)了適用于遺傳多樣性研究的微衛(wèi)星位點(diǎn)。
　　 3.家系遺傳模式分析：選用同一養(yǎng)殖場(chǎng)不同年份的2個(gè)家系，用家系親本對(duì)可用的80個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行篩選，得到16個(gè)擴(kuò)增良好且有分離的位點(diǎn)，用其對(duì)2個(gè)家系進(jìn)行遺傳模式分析，發(fā)現(xiàn)3個(gè)位點(diǎn)(HUHD19、HUHD34、HUHD35)在家系N中、2個(gè)位點(diǎn)(HUHD40、HUHD57)在家系Z中

5、為父母本呈多態(tài)且子代遵循孟德爾共顯性遺傳，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)部分不適用于家系分析的微衛(wèi)星位點(diǎn)；通過2個(gè)家系多態(tài)位點(diǎn)的比較發(fā)現(xiàn)該養(yǎng)殖廠的雜色鮑家系由于累代近交已經(jīng)出現(xiàn)雜合度減少的趨勢(shì)。
　　 4.用66個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)3地雜色鮑養(yǎng)殖群體進(jìn)行遺傳結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，有15.15％的位點(diǎn)在3個(gè)種群中均偏離哈代-溫伯格平衡(HWE)；用16個(gè)SSR位點(diǎn)分析2個(gè)雜色鮑家系的遺傳模式時(shí)同樣發(fā)現(xiàn)，有62.5％的基因型比例不符合孟德爾遺傳分離；這種情況主要是由