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文檔簡介
1、目的與意義:通過體外試驗測定板蘭根多糖、黃芪多糖與干擾素聯(lián)合應(yīng)用對豬偽狂犬效果研究,從而給偽狂犬病的預(yù)防及治療提供一種新的可行方法。
采用了常規(guī)的水煎醇沉法來提取多糖,然后使用蒽酮硫酸法來測定多糖的含量,從而得到板藍根多糖和黃芪多糖;體外構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-IFN-α,并將其轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21后,經(jīng)IPTG的誘導下,在大腸桿菌中表達出豬α干擾素融合蛋白。SDS-PAGE和Westernblotting分析,優(yōu)化IPTG的
2、濃度和誘導時間,提高表達水平。通過形態(tài)觀察法、MTT法判斷板藍根多糖、黃芪多糖、干擾素以及多糖與干擾素的聯(lián)合應(yīng)用對豬偽狂犬病病毒的抑制效果。板籃根多糖、黃芪多糖和干擾素半數(shù)抑制濃度分別為250μg/ml、500μg/ml和100.7U/ml。測定了藥物聯(lián)合應(yīng)用的合并指數(shù),結(jié)果表明板藍根多糖125μ g/ml、黃芪多糖250μg/ml、和重組豬α干擾素50U/mL三者聯(lián)合使用時,抑制病毒的效果最好,豬偽狂犬病病毒的抑制率達到70.26%。
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