乳酸芽孢桿菌益生素的制備及對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能和血清學(xué)指標(biāo)的影響.pdf

1、本文對(duì)3株乳酸芽孢桿菌的產(chǎn)酶性能和芽孢形成率、3株菌共生發(fā)酵的液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基的成分、3株菌共生發(fā)酵液的抑菌活性及胞外代謝產(chǎn)物的成分進(jìn)行了試驗(yàn)研究,用斷奶仔豬對(duì)乳酸芽孢桿菌益生素作了應(yīng)用試驗(yàn),為乳酸芽孢桿菌益生素的開發(fā)與應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　 用不同的產(chǎn)酶發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)乳酸芽孢桿菌SC、SL1和NT株,通過測(cè)定待測(cè)粗酶液的酶活性表明:3株菌均產(chǎn)生蛋白酶和纖維素酶,不產(chǎn)淀粉酶、脂肪酶和β-甘露聚糖酶；在發(fā)酵72 h后乳酸芽

2、孢桿菌SC、SL1和NT株的蛋白酶活力分別為1426.292、1449.29、1439.326 U/mL,纖維素酶活力分別為76.2、66.4、45.2 U/mL。通過測(cè)定發(fā)酵液pH值,確定3株菌在發(fā)酵12h后產(chǎn)酸量達(dá)到平衡狀態(tài),并維持36h。通過測(cè)定芽孢形成率,確定3株菌隨著發(fā)酵時(shí)間的延長,芽孢形成率逐漸提高。
　　 用牛津杯雙層平板定量擴(kuò)散法檢測(cè)3株菌代謝產(chǎn)物的抑菌活性,結(jié)果表明:代謝產(chǎn)物有抑菌活性,對(duì)金黃色葡萄球菌有極強(qiáng)的

3、抑制作用,對(duì)大腸埃希菌抑制作用較弱。通過GC/MS分析,表明3株菌胞外代謝產(chǎn)物中含有抑菌物質(zhì)和芳香類物質(zhì),初步確定抑菌物質(zhì)為:烯丙基苯酚、沙丁胺醇、2-異丁基-4-甲基噻唑；芳香類物質(zhì)為:1-[4-(1,1-二甲基乙基)-2,6-二甲基-3,5-二硝基苯基]乙酮和開米司酮。
　　 用豆粕、豆汁、玉米粉、麩皮、白糖、K2HPO4、MgSO4、Mn8O4、NaCl等成分配制不同的液體發(fā)酵培養(yǎng)基,通過測(cè)定3株菌共生發(fā)酵液中的蛋白酶、纖

4、維素酶、pH值和芽孢形成率篩選出適宜的液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:10％豆汁100 mL/L,白糖60g/L,K2HPO41.5 g/L,MgSO40.6g/L,MnSO40.1g/L,NaCl5g/L,pH值自然。
　　 用不同添加量的豆粕、麩皮、魚粉、白糖和水分配制半固體發(fā)酵培養(yǎng)基,通過測(cè)定3株菌共生發(fā)酵物中的蛋白酶、纖維素酶、pH值和細(xì)菌總數(shù)篩選出適宜的半固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:按豆粕600 g/kg、麩皮200 g/kg、魚粉1

5、00 g/kg、白糖100 g/kg配制成固形物,按固形物與水的比例為1:1.2(g/mL)添加自來水,pH值自然。在3株乳酸芽孢桿菌共生發(fā)酵后的半固體發(fā)酵培養(yǎng)基中添加300 g/kg麩皮,攪拌均勻,45℃烘干,粉碎,測(cè)定其中的芽孢數(shù),即為乳酸芽孢桿菌益生素。
　　 選用45頭28±2日齡杜長大三元雜交斷奶仔豬,分為5組,每組設(shè)3個(gè)重復(fù),每重復(fù)3頭仔豬；對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧；抗生素組在基礎(chǔ)日糧中添加2 g/kg阿莫西林；3個(gè)試驗(yàn)組

6、在基礎(chǔ)日糧中添加乳酸芽孢桿菌益生素,添加量分別為5、10、20 g/kg；試驗(yàn)期為28 d。試驗(yàn)結(jié)果表明:10 g/kg益生素添加量的仔豬日增質(zhì)量提高最多,比對(duì)照組增加11.54％(P<0.05)；20 g/kg益生素添加量的料質(zhì)量比降低最多,比對(duì)照組減少3.95％(P<0.01)；乳酸芽孢桿菌益生素可使斷奶仔豬血清葡萄糖和總膽固醇含量升高或降低,血清白蛋白和總蛋白含量在56日齡時(shí)極顯著升高,血清IgG含量降低,血清IgA含量基本不變,