芯片雜交用于對(duì)苦馬豆幼根耐鹽差異表達(dá)基因注釋及克隆.pdf

1、苦馬豆是重要的耐鹽抗旱豆科植物。本試驗(yàn)通過不同濃度的NaCl溶液處理苦馬豆種子，研究了高鹽濃度下種子發(fā)芽、幼苗生長及生理效應(yīng)。通過染色體壓片技術(shù)確定了供試材料為二倍體，采用Affymetrix截型苜?；蚪M芯片(61，278個(gè)探針)，對(duì)苦馬豆幼苗根部在180mmol/LNaCl溶液中處理0h和24h的基因表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，利用GO功能注釋對(duì)所獲得的差異表達(dá)基因從分子功能、細(xì)胞組件、生物學(xué)過程三個(gè)水平進(jìn)行功能分類分析，采用同源序列法設(shè)計(jì)引

2、物，利用PCR技術(shù)克隆耐鹽相關(guān)基因。研究結(jié)果如下： (1)400mmol/LNaCl時(shí)，苦馬豆種子發(fā)芽率最低；300mmol幾NaCl抑制苦馬豆幼苗的生長。 (2)鹽脅迫對(duì)細(xì)胞膜修復(fù)的抑制是造成苦馬豆種子萌發(fā)推遲和發(fā)芽勢(shì)下降的主要原因，脯氨酸含量和苦馬豆耐鹽相關(guān)性明顯。 (3)4，057個(gè)基因在不同處理?xiàng)l件下存在表達(dá)差異，其中155個(gè)上調(diào)基因和105下調(diào)基因。 (4)搜索NCBI數(shù)據(jù)庫，表明差異表達(dá)的基因