甘藍(lán)型油菜耐鹽基因克隆及表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、利用基因工程技術(shù)培育作物新品種(抗逆和抗病等)是當(dāng)前生物學(xué)研究的熱點(diǎn)之一.擬南芥的Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白被證實(shí)具有將Na<'+>從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到液泡中儲(chǔ)藏的能力,可用于基因工程育種以培育耐鹽作物.為了探索不同植物Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的耐鹽性,我們選擇十字花科植物中耐鹽性較高的甘藍(lán)型油菜滬油15(Brassica napus L.)為材料,利用RACE-PCR克隆技術(shù),成功克隆了甘藍(lán)型油菜的Na<'+>/H

2、<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因BnNHX1(GenBank Acc.No.AY189676).通過相關(guān)的生物信息學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)該基因的核苷酸序列及其推導(dǎo)出的氨基酸序列與十字花科擬南芥及其它植物的Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因有一定的相似性,BnNHX1蛋白與擬南芥的AtNHX1相似性可達(dá)87﹪,與Oryza sativa的Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相似性可達(dá)71﹪;而與Homo sapiens NHE相似性只有29﹪.用TM

3、pred軟件分析BnNHX1蛋白為一跨膜蛋白,有12個(gè)穿膜區(qū)域,跨膜區(qū)保守,屬于Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族.Na<'+>/H<'+>逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因是屬于植物耐鹽SOS基因家族中的SOS1基因,在植物耐鹽的SOS途徑中還有SOS2、SOS3基因,為了進(jìn)一步闡明植物SOS途徑的耐鹽機(jī)理,我們以十字花科植物甘藍(lán)型油菜滬油15(Brassica napus)為材料,利用RACE-PCR克隆技術(shù),克隆了SOS<,2>基因(Bnso

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