隱孢子蟲檢測方法的比較及東北虎和觀賞鳥感染隱孢子蟲情況的調(diào)查.pdf

1、為找到一種快速準(zhǔn)確的隱孢子蟲檢測方法，本文針對常用的隱孢子蟲卵囊分離方法進(jìn)行了模擬實驗比較，結(jié)果表明Sheather's蔗糖漂浮法的濃集效果最好。而對隱孢子蟲卵囊的常用檢測方法進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，最行之有效的是巢式聚合酶鏈反應(yīng)（Nested Polymerase Chain Reaction，Nested—PCR），其具有敏感度高且實用性好的特點(diǎn)。 將篩選出的最佳方法應(yīng)用于東北虎等園養(yǎng)貓科動物和上海市花鳥市場內(nèi)觀賞鳥的隱孢子蟲感染情

2、況調(diào)查。采用Sheather's蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法鏡檢187份東北虎糞樣和29份其它貓科動物糞樣，結(jié)果隱孢子蟲的平均陽性率分別為1.07％（2/187）、4.81％（9/187）和3.4％（1/29）、6.9％（2/29），經(jīng)Nested—PCR擴(kuò)增并未見陽性目的條帶。用Sheather's蔗糖漂浮法結(jié)合改良抗酸染色法檢查211份觀賞鳥糞便樣品中有12份檢出隱孢子蟲，陽性率為5.43％，經(jīng)Nested—PCR擴(kuò)增出目的條帶后，測

3、序結(jié)果顯示該隱孢子蟲為貝氏隱孢子蟲（Crysporidium baileyi）。 本文對部分常用的隱孢子蟲檢測方法及其適用性進(jìn)行了試驗重塑和理論評述，為隱孢子蟲病的快速檢查提供了參考，同時提供了不同方法在實驗室室條件下的敏感性參照數(shù)據(jù)，此數(shù)據(jù)具有可重復(fù)性和實用指導(dǎo)意義。通過對園養(yǎng)東北虎等貓科動物和上海地區(qū)觀賞鳥類感染隱孢子蟲情況的流行病學(xué)和分子生物學(xué)調(diào)查，為進(jìn)一步掌握園養(yǎng)東北虎等貓科動物和上海地區(qū)觀賞鳥類隱孢子蟲病流行狀況及特點(diǎn)