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文檔簡介
1、<p> HPLC法測定紅景天苷的方法研究</p><p> 摘要:利用高效液相色譜法(HPLC)檢測紅景天中紅景天苷的含量。 </p><p> 關鍵詞:高效液相色譜法 紅景天 紅景天苷。 </p><p><b> 紅景天苷結構式 </b></p><p> 英文名稱:Salidroside &l
2、t;/p><p> 分子式:C14H20O7 </p><p> CAS:10338-51-9 分子量 300.30 </p><p><b> 1、材料與方法 </b></p><p> 1.1 主要材料與試劑 </p><p> 紅景天苷標準品【GBW(E)100018.1.00mg/m
3、l】.國家標準物質研究中心; </p><p> 甲醇(色譜純),水(超純水),氨水(分析純), </p><p> 1.2 主要儀器與設備 </p><p> Agilent1100高效液相色譜系統(tǒng):配有紫外檢測器,美國安捷倫公司。 </p><p><b> 1.3 實驗條件 </b></p>
4、<p> 色譜柱:ZORBAX SB-C18( 4.6×150mm,5μm);流動相:甲醇:水=15:85;流速1.0ml/min;柱溫25℃;進樣量10μl;檢測器:275nm。 </p><p> 1.4 測定項目:紅景天中紅景天苷的測定 </p><p> 1.4.1標準曲線 </p><p> 分別配置濃度為10mg/mL,20m
5、g/mL,40mg/mL,60mg/mL,80mg/mL的紅景天苷標準工作液,經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾,供高效液相色譜測定,并繪制標準曲線,用以定量。 </p><p><b> 1.4.2檢出限 </b></p><p> 用紅景天苷標準品直接進樣,分別按三倍噪音值計算檢測器的檢出限為:VWD檢測器的檢出限為0.04μg/kg。 </p><
6、;p> 1.4.3樣品處理 </p><p> 稱取5-10克樣品以甲醇超生溶解并定容至50ml容量瓶中經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾,供高效液相色譜測定。 </p><p><b> 2、結果與分析 </b></p><p> 2.1依據(jù)保留時間一致性進行定性識別的方法,根據(jù)紅景天苷標準樣品的保留時間,確定樣品中是否含有紅景天苷。(
7、圖3.圖4) </p><p> 2.2以紅景天苷標準品稀釋濃度為橫坐標,以峰面積為縱坐標,繪制標準工作曲線,用標準曲線對試樣進行定量,標準工作溶液和試樣溶液中紅景天苷的相應值均應在儀器檢測線性范圍內。在上述色譜條件下,紅景天苷標準樣品色譜圖參見(圖1。圖2)。 </p><p><b> 3、空白實驗 </b></p><p> 除不加
8、紅景天苷標注物質外,空白實驗應與加標樣品測定平行進行,并且用相同的分析步驟,取相同的所有試劑。 </p><p> 圖1(VWD檢測器矯正曲線) </p><p> 圖2(VWD檢測器紅景天苷標樣譜圖) </p><p> 圖3(VWD檢測器紅景天苷樣品譜圖) </p><p> 圖3(空白樣品VWD譜圖) </p>&
9、lt;p><b> 4、回收率 </b></p><p> 取空白樣品,分別加入5份不同量的紅景天苷標準溶液,按1.5.1的樣品前處理方法進行處理后進樣,計算回收率。 </p><p><b> 4.1回收率計算 </b></p><p> 將5份不同濃度的標準品分別加入到空白樣品中,計算回收率,見表1和表2
10、. </p><p> 表1VWD檢測器回收率實驗 </p><p> 名稱 理論加入量(μg) 實際測的量(μg) 回收率 平均回收率 </p><p> 紅景天苷 1.00 0.9995 99.50 </p><p><b> 99.47 </b></p><p> 紅景天苷 0.8
11、0 0.7998 99.97 </p><p> 紅景天苷 0.60 0.6009 100.15 </p><p> 紅景天苷 0.40 0.3989 99.73 </p><p> 紅景天苷 0.20 0.1960 98.00 </p><p> 可見,平均回收率很好。 </p><p><b>
12、 5、結論 </b></p><p> 采用紫外檢測器檢測紅景天中紅景天苷含量的方法是可行的,。 </p><p> 此方法也適用于飲料中紅景天苷的檢測。 </p><p><b> 參考文獻: </b></p><p> [1]云自厚 歐陽津 張曉丹 液相色譜檢測方法 第二版 化學工業(yè)出版社2005
13、 </p><p> [2]王正范 色譜定性與定量 第二版 化學工業(yè)出版社2007 </p><p> [3]張祥民 現(xiàn)代色譜分析 復旦大學出版社 2004-12-01 </p><p> [4]郝素娥 等 食品添加劑制備與應用技術 化學工業(yè)出版社 2003 </p><p> [5]張彥明 無公害動物源性食品檢驗技術 中國農業(yè)出版社
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