斑馬魚(Danio rerio)胚胎模型評價內(nèi)分泌干擾物的類雌激素效應(yīng).pdf

1、內(nèi)分泌干擾物(Endocrine Disrupting Chemicals，EDCs)對人類和野生動物的有害效應(yīng)己引起人們的廣泛關(guān)注。我們通過研究天然雌激素17β-雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、人工合成激素己烯雌酚(DES)、4-辛基苯酚(OP)、雙酚A(BPA)、他莫昔芬(TMX)和三-(2，3-二溴丙基)異氰脲酸酯(TBC)等幾種典型的內(nèi)分泌干擾物對斑馬魚胚胎中VTG基因表達(dá)的影響，探討斑馬魚胚胎能否用于分析及評估化合物的內(nèi)分泌干

2、擾效應(yīng)。
　　 結(jié)果顯示對照組相比，E2能顯著誘導(dǎo)斑馬魚胚胎中VTG基因的表達(dá)，并具有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。比較不同發(fā)育時間段的E2暴露實(shí)驗結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)0.5μM E2在斑馬魚胚胎發(fā)育早期并不能誘導(dǎo)VTG的生成，斑馬魚胚胎發(fā)育144小時(6dpf)后，斑馬魚胚胎中可檢測到VTG基因的極顯著表達(dá)。原位雜交實(shí)驗結(jié)果表明對照組中未觀察到VTG基因的表達(dá)；但0.5μM E2暴露斑馬魚胚胎4～7d后在樣本的肝臟和心臟處可見VTG基因的表

3、達(dá)，且各組樣本中VTG陽性表達(dá)率分別為12.50%、39.13%、89.36%和100%。
　　 為了進(jìn)一步評估斑馬魚胚胎VTG基因的表達(dá)情況作為環(huán)境風(fēng)險評價的有效生物學(xué)標(biāo)記的可行性，選用不同濃度的E2、E3、DES、OP、BPA、TMX和TBC等幾種典型的內(nèi)分泌干擾物開展暴露實(shí)驗。結(jié)果顯示，E2、E3、DES和OP能對斑馬魚胚胎VTG產(chǎn)生誘導(dǎo)作用，并具有劑量-效應(yīng)關(guān)系，表現(xiàn)出不同程度的類雌激素效應(yīng)。E2、E3、DES和OP誘導(dǎo)

4、斑馬魚胚胎VTG表達(dá)的LOEC分別為：1.25×10-2、1.46、1.65＋104和1.35。BPA對斑馬魚胚胎VTG表達(dá)無影響。復(fù)合暴露實(shí)驗結(jié)果顯示，TMX和TBC單一暴露對斑馬魚胚胎VTG基因的表達(dá)無顯著影響；與E2的復(fù)合暴露實(shí)驗結(jié)果顯示，TMX和TBC均能明顯抑制由0.5μM E2引起的斑馬魚胚胎VTG基因表達(dá)量的上升。TBC復(fù)合暴露的原位雜交實(shí)驗結(jié)果與熒光定量PCR結(jié)果相一致，即僅在0.5μM E2暴露組的胚胎的心臟和肝臟處出