環(huán)境內(nèi)分泌干擾物三氯生、雙酚A對斑馬魚的毒性研究.pdf

1、環(huán)境內(nèi)分泌干擾物廣泛存在于環(huán)境中，能夠?qū)游镆约叭祟惖膬?nèi)分泌系統(tǒng)造成干擾，影響機(jī)體正常的生殖、免疫、神經(jīng)等功能，己成為全球重點關(guān)注的典型性污染物。典型內(nèi)分泌干擾物雙酚A（Bisphenol A，BPA）是生產(chǎn)環(huán)氧樹脂和增塑劑等物質(zhì)的前體物質(zhì)，廣泛應(yīng)用于嬰兒奶瓶、涂料、餐具、食品包裝和醫(yī)療器械。新型內(nèi)分泌干擾物質(zhì)三氯生（Triclosan，TCS）作為一種廣為人知的廣譜抗菌劑，廣泛應(yīng)用于各種個人護(hù)理和工業(yè)產(chǎn)品，包括洗手液、清潔劑、除臭劑、

2、牙膏和家居用品。雙酚A和三氯生作為兩種與人類生活密切相關(guān)的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，近年來已在水體及水生生物體，甚至于人體中被頻繁檢出，這將會對環(huán)境及人體健康產(chǎn)生不利影響。因此對于開展雙酚A和三氯生對水生動物的毒性研究具有非常重要的實際意義。研究工作如下：
　　1.以模式生物斑馬魚為研究對象，研究了不同濃度的三氯生（50、100、150μg/L）長期暴露（30d）對斑馬魚造成的氧化應(yīng)激反應(yīng)。結(jié)果表明，斑馬魚經(jīng)暴露后，肝臟或大腦中的脂質(zhì)過氧

3、化反應(yīng)水平和蛋白質(zhì)羰基水平增加，且高濃度暴露組（150μg/L）均顯著性增加，體現(xiàn)了生物體因活性氧的增加而受到了氧化損傷。暴露組斑馬魚大腦或肝臟內(nèi)還原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽和總谷胱甘肽，過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽還原酶和谷胱甘肽過氧化物酶等抗氧化參數(shù)含量均降低，顯示出斑馬魚大腦和肝臟內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)功能受到抑制。此外，斑馬魚大腦中乙酰膽堿酯酶活性經(jīng)TCS暴露后降低，表明斑馬魚頭部器官功能受到影響。根據(jù)此研究，可推測水生系統(tǒng)

4、中的TCS可能對魚類產(chǎn)生氧化應(yīng)激影響，造成生物體氧化防御系統(tǒng)損傷。
　　2.以模式生物斑馬魚為研究對象，采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，全面分析了低濃度BPA（10μg/L）長期暴露（45d）對成年雄性斑馬魚大腦的毒性影響。利用同位素相對標(biāo)記與絕對定量技術(shù)（iTRAQ）結(jié)合納升級高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（nano HPLC-MS/MS）對斑馬魚腦中蛋白質(zhì)進(jìn)行分析，共鑒定出2936種蛋白。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在雙酚A暴露下斑馬魚大腦中有46種蛋白質(zhì)的表達(dá)與

5、對照組相比有顯著性差異，其中44種蛋白表達(dá)上調(diào)，2種表達(dá)下降。通過對篩選出的46種蛋白進(jìn)行GO功能富集分析發(fā)現(xiàn)雙酚A能夠?qū)︳~大腦中ATP的生物合成代謝過程以及核苷酸、離子與蛋白質(zhì)間的跨膜轉(zhuǎn)運功能等產(chǎn)生影響，且所篩選差異蛋白主要存在于細(xì)胞質(zhì)與線粒體中。此外通過KEGG信號通路分析發(fā)現(xiàn)雙酚A長期暴露能夠干擾斑馬魚大腦中的能量代謝反應(yīng)、破壞細(xì)胞骨架、干擾離子通道，同時會對斑馬魚大腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生神經(jīng)毒性并引起相關(guān)功能障礙。因此，實驗可表明