BDE-99對(duì)斑馬魚的發(fā)育影響和內(nèi)分泌干擾作用研究.pdf

1、PBDEs作為一種溴代阻燃劑，已廣泛應(yīng)用于家具、紡織、建材和電子產(chǎn)品中，它屬于持久性有機(jī)污染物，對(duì)人類健康和環(huán)境具有嚴(yán)重危害。五溴聯(lián)苯醚(2，2'，4，4'，5-pentabromodiphenyl ether，BDE-99)是眾多PBDEs的一種，本文以斑馬魚為受試生物，研究了BDE-99對(duì)其生殖發(fā)育影響和內(nèi)分泌干擾效應(yīng)，以評(píng)價(jià)BDE-99的生態(tài)毒性。
　　本研究采用BDE-99經(jīng)水暴露方式對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚發(fā)育的影響進(jìn)行研究，

2、探討在斑馬魚早期生命階段，BDE-99對(duì)斑馬魚發(fā)育影響的劑量-效應(yīng)關(guān)系，結(jié)果表明，隨著暴露時(shí)間的增加，LC50值逐漸減小，96h后LC50不再變化，僅為707μg/L;從24h-48h，每個(gè)濃度組的孵化率都發(fā)生明顯增大，在96h胚胎已全部孵化成小魚，在暴露初期，以2μg/L濃度組的孵化率為最高;高濃度的BDE-99引起了斑馬魚胚胎發(fā)育延遲、發(fā)育異常，暴露實(shí)驗(yàn)后期引起了幼魚水腫、脊柱彎曲。
　　根據(jù)暴露實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，采取相同的暴露濃度

3、來(lái)研究BDE-99對(duì)斑馬魚內(nèi)分泌系統(tǒng)HPA、HPT軸的影響。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)對(duì)經(jīng)BDE-99暴露后的斑馬魚幼魚/胚胎這三大軸上相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控情況進(jìn)行研究，判斷BDE-99是否通過(guò)影響生物信號(hào)通路HPA、HPT軸，從而影響受試生物的正常生理功能。結(jié)果表明:斑馬魚內(nèi)分泌軸上的大部分相關(guān)基因均受到影響，在HPT軸上，TTR、TRH調(diào)控倍數(shù)與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異，在2μg/L的暴露濃度時(shí)，TSHb、TSHR、TG、TRb、NIS表達(dá)量

4、顯著性上調(diào)，核心基因TRb的表達(dá)量顯著性上調(diào)2.07倍;在HPA軸上，全部基因的調(diào)控倍數(shù)均是隨著暴露濃度的增大而變小，在2μ g/L的暴露濃度時(shí)，CRH的調(diào)控倍數(shù)大于2倍，其他基因的調(diào)控倍數(shù)均不超過(guò)2倍。所以，BDE-99對(duì)斑馬魚幼魚的內(nèi)分泌系統(tǒng)在一定程度上起到了干擾作用。
　　本研究還運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)測(cè)定了經(jīng)BDE-99暴露后的斑馬魚幼魚體內(nèi)多環(huán)芳烴受體（Aryl hydrocarbon receptor，AhR）、過(guò)氧化

5、物酶體增殖物活化受體(Peroxisome proliferator activated receptor，PPAR)、孕烷受體(Pregnane xreceptor，PxR)、雄激素受體(Androgen receptor，AR)、糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid receptor，GR)、鹽皮質(zhì)激素受體(Mineralocorticoid receptor，MR)、甲狀腺激素受體(Thyroid hormone rese

6、ptor，TR)和雌激素受體(Estrogenreceptors，ER)這八大受體以及與它們相關(guān)基因的表達(dá)情況。結(jié)果表明:BDE-99在高濃度(0.5μM)時(shí)對(duì)八大受體及其相關(guān)基因的調(diào)控作用與其它兩個(gè)暴露組相
　　比較為顯著，大部分核心基因受到了BDE-99的影響。隨著濃度的增加，無(wú)顯著影響的基因表達(dá)量所占比例較小，上下調(diào)倍數(shù)較大的基因數(shù)所占比例逐漸增大，這說(shuō)明隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，胚胎內(nèi)部蓄積的化合物BDE-99的量越多;BDE-