2015最新腸桿菌肽在母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

1、歡迎各位嘉賓蒞臨指導(dǎo)！,4,腸桿菌肽在母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用,中農(nóng)穎泰集團技術(shù)部 張江 博士,目 錄,我國母豬生產(chǎn)現(xiàn)狀抗菌肽概念及研究進展腸桿菌肽簡介腸桿菌肽在母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用,目 錄,我國母豬生產(chǎn)現(xiàn)狀抗菌肽概念及研究進展腸桿菌肽簡介腸桿菌肽在母豬生長中的案例,,,一、存欄數(shù)高二、生產(chǎn)性能低下產(chǎn)活仔數(shù)低；年產(chǎn)窩數(shù)低 ；仔豬成活率低,我國母豬現(xiàn)狀,,,三、藥物用量大四、疾病多,免疫抑制，亞健康,,控制或

2、減少病原菌,,,,,環(huán)境控制、消毒、管理,增強群體免疫力，提高機體對疾病的抗病能力,,,哺乳仔豬問題的根源是母豬問題 ！,1. 母豬帶毒（病毒、細(xì)菌）2. 母豬泌乳不足3. 母豬化藥保健導(dǎo)致保健失效1.減少母豬身體病原菌2. 提高泌乳量3.減少抗生素的大量使用——新型保健方案,,莆田嘉興北京對照,莆田嘉興北京莆田嘉興北京對照,糞便 糞便肥料 土壤,

3、,,,抗藥性基因種類,氨基糖苷類內(nèi)酰胺類喹諾酮-氨基糖苷類-氯霉素-內(nèi)酰胺類多重抗藥性大環(huán)內(nèi)酯類-鏈霉素類-內(nèi)酰胺類等多重耐藥四環(huán)素類萬古霉素其他,數(shù)據(jù)來源：《美國科學(xué)院院報》, 2012 , 110(9): 3435–3440,,母豬減少帶毒（細(xì)菌） ——新型抗菌肽-腸桿菌肽妊娠料哺乳料保健方案有效減少由于大腸桿菌、沙門氏菌造成的仔豬產(chǎn)房腹瀉,目

4、 錄,我國母豬生產(chǎn)現(xiàn)狀抗菌肽概念及研究進展腸桿菌肽簡介腸桿菌肽在母豬生長中的案例,抗菌肽的概念,抗菌肽又名宿主防御肽，是生物體內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽。,抗菌肽,,抗菌肽,食品防腐保鮮---乳鏈菌肽（nisin）醫(yī)藥---消炎、抗感染、抗真菌保健品---國內(nèi)已有抗菌肽概念的“食字號”保健品上市，其中大部分為技術(shù)含量較低的昆蟲蛋白日化---日用化工產(chǎn)品主要集中在化妝品上，以創(chuàng)傷疤痕修復(fù)為主，兼具溫和殺菌、抗

5、感染和消除紅腫等功效,目 錄,我國母豬生產(chǎn)現(xiàn)狀抗菌肽概念及研究進展腸桿菌肽簡介腸桿菌肽在母豬生長中的案例,腸桿菌肽簡介,穎泰二號TM主要成分是植物乳桿菌及其代謝產(chǎn)物。其核心代謝產(chǎn)物腸桿菌肽是利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)在植物乳桿菌中高效生產(chǎn)的一種抗菌肽，對大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌等革蘭氏陰性菌具有強力殺滅作用。,腸桿菌肽,腸桿菌肽是由21個氨基酸組成的索套肽，分子量為2.1kDa，其中N端的8個氨基酸形成一個圓形的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，9-21氨

6、基酸形成β發(fā)夾結(jié)構(gòu)，貫穿圓環(huán)，故其性質(zhì)非常穩(wěn)定，對高溫、酸、堿、胃蛋白酶、胰蛋白酶有良好抵抗力。,圖1 腸桿菌肽空間結(jié)構(gòu),1、破壞病原菌細(xì)胞膜的完整性。,腸桿菌肽的作用機理,圖2 膜穿孔示意圖,2 、與病原細(xì)菌的RNA聚合酶集合后，抑制病原菌RNA聚合酶的活性。,腸桿菌肽的作用機理,,數(shù)據(jù)來源： 美國《分子細(xì)胞》，2004年14卷6期,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,（一）針對性強 可殺滅大部分致病性大腸桿菌和沙門氏菌等革蘭氏陰性病原菌。,

7、各索套肽對致瀉型大腸桿菌菌株的抑制作用,結(jié)論：腸桿菌肽能抑制大部分所評價的DEC菌株，而且其抑制效果優(yōu)于多種細(xì)菌素 數(shù)據(jù)來源：美國《應(yīng)用環(huán)境微生物》，2000年66卷10期（IF=3.8）,（二）抗菌能力強,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,圖3 對各大腸桿菌抑菌作用,圖4 對各沙門氏菌抑菌作用,,腸桿菌肽對大腸桿菌的抑制作用,數(shù)據(jù)來源：國家飼料工程技術(shù)研究中心,2024/1/19,a:純化后的抑菌活性（在20ul的滅菌鹽水中稀釋）用

8、抑菌圈的平均寬度來表達，以毫米計 b:沒有抑菌圈 數(shù)據(jù)來源：美國《應(yīng)用環(huán)境微生物》，2000年66卷10期（IF=3.8）,純化后的腸桿菌肽對致瀉型大腸桿菌菌株的抑制作用,腸桿菌肽與硫酸黏桿菌素對大腸桿菌MIC（最低抑菌濃度）的比較,數(shù)據(jù)來源：國家飼料工程技術(shù)研究中心,,腸桿菌肽對沙門氏菌的抑制作用,數(shù)據(jù)來源：國家飼料工程技術(shù)研究中心,腸桿菌肽與硫酸黏桿菌素對沙門氏菌MIC（最低抑菌濃度）的比較,數(shù)據(jù)來源：中農(nóng)穎泰集團

9、技術(shù)研發(fā)部,圖2. 腸桿菌肽在不同培養(yǎng)基中抗菌活性將106CFU的新港沙門氏菌接種到LB,全血 (WB), 血漿 (P) 和滅活血漿(IS) 中。血漿中接種量為108。通過在時間點為0時定量培養(yǎng)驗證接種物（黑色柱）。菌株在沒有腸桿菌肽（對照組），兩種不同劑量的腸桿菌肽，以及氨芐青霉素存在的條件下孵育2h。結(jié)論：腸桿菌肽可能比傳統(tǒng)抗生素的殺菌活力高出許多。,數(shù)據(jù)來源：英國《抗菌藥物治療雜志》2007年，59卷，4期 （IF=5.31

10、）,（三）結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐酸、耐熱、耐胃蛋白酶、耐胰蛋酶 腸桿菌肽用胰蛋白酶、胃蛋白酶處理5.5小時后，活性不降。,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,A,B,圖6 胃蛋白酶和胰蛋白酶處理結(jié)果，A圖為處理30分鐘，B圖為處理5.5小時結(jié)果,,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,（三）結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐酸、耐熱、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶模擬胃酸環(huán)境下腸桿菌肽對大腸桿菌25922菌株的抑菌效果,PH為2的胃酸，以不同時間處理腸桿菌肽，其對大腸桿菌25922菌株

11、的生物活性沒有影響,,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,（三）結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐酸、耐熱、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶0.3%膽鹽處理腸桿菌肽對大腸桿菌25922菌株的抑菌效果,0.3%膽鹽以不同時間處理腸桿菌肽，其對大腸桿菌25922菌株的生物活性沒有影響。,,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,（三）結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐酸、耐熱、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶不同溫度處理腸桿菌肽對大腸桿菌25922菌株的抑菌效果,以不同溫度處理腸桿菌肽，其對大腸桿菌25922菌株的生物活性沒有影響

12、。,34,（三）結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐酸、耐熱、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶 腸桿菌肽在121℃，0.1MPa處理1.5小時，仍有活性。,34,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,A,B,圖7 高熱高壓處理結(jié)果（1、1’、1”為三批產(chǎn)品稀釋液 2、2’、2”為只加氨芐青霉素的培養(yǎng)基 3. 為產(chǎn)品稀釋液調(diào)pH為中性），其中，A圖為100℃處理30分鐘抑菌活性，B為121℃，0.1MPa處理90分鐘抑菌活性。,圖1. 腸桿菌肽在LB和不同生物

13、培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性腸桿菌肽(1 mg/mL)在37℃時在LB培養(yǎng)基（1）、血漿（2）、全血(3)、滅活血清(4)和血清(5)中孵育24h，通過spot-on-lawn法測定腸桿菌肽生物活性。作為對比，圖中為稀釋了1024倍的培養(yǎng)液在孵育時間點為0和孵育24h后產(chǎn)生的抑菌圈。結(jié)論：腸桿菌肽的活性不受血液中任何成分的影響。此外，腸桿菌肽對人體紅細(xì)胞不存在溶血性。,數(shù)據(jù)來源：英國《抗菌藥物治療雜志》2007年，59卷，4期 （IF=5.31

14、）,穎泰二號四大獨特優(yōu)勢,（四）膜穿孔作用，不易產(chǎn)生耐藥性,目 錄,我國母豬生產(chǎn)現(xiàn)狀抗菌肽概念及研究進展腸桿菌肽簡介腸桿菌肽在母豬生產(chǎn)中的案例,日糧中添加腸桿菌肽對母豬繁殖性能的影響,,選取40頭配種時間接近、 胎次大致相同、 體重大致接近、 健康狀況良好的長白×大約克經(jīng)產(chǎn)母豬隨機分為兩個處理， 每個處理4個重復(fù)，每個重復(fù)5頭。試驗分為2個處理組， 處理1組為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；處理2組為試驗組，飼喂基礎(chǔ)日糧+腸桿菌

15、肽300mg/kg?；A(chǔ)日糧采用該豬場原有日糧。試驗開始前將母豬趕進定位欄飼養(yǎng)，預(yù)飼期7d，試驗從母豬妊娠90d至仔豬斷奶結(jié)束。,試驗設(shè)計,,,試驗結(jié)果,腸桿菌肽對母豬生產(chǎn)性能的影響,注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)字母不同表示差異顯著（P＜0.05）；相同表示差異不顯著（P＞0.05）。,,試驗結(jié)果,腸桿菌肽對仔豬腹瀉頻率的影響,注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)字母不同表示差異顯著（P＜0.05）；相同表示差異不顯著（P＞0.05）。,腸桿菌肽對母豬的繁殖性能和仔

16、豬的生長性能等指標(biāo)的影響，試驗結(jié)果表明，母豬添加300 mg/kg腸桿菌肽能夠提高仔豬斷奶重和成活率，同時顯著改善仔豬的腹瀉問題，對母豬、仔豬疾病起到一定的預(yù)防作用，減少應(yīng)激對機體的損傷。,試驗結(jié)論,,腸桿菌肽對哺乳仔豬腹瀉的治療效果,吉林某規(guī)?；i場。此場飼養(yǎng)管理屬于中等水平，經(jīng)常出現(xiàn)產(chǎn)房腹瀉的問題。,試用案例一,選用的為5日齡仔豬，該窩仔豬共計11頭，拉稀6頭，3頭使用穎泰二號，3頭使用諾氟沙星。10月13日下午用藥，10月14日用

17、藥2次，10月15日早康復(fù)！ 說明穎泰二號具有明顯的治療仔豬拉稀作用，且作用和諾氟沙星一樣，可作為諾氟沙星替代品用以治療仔豬拉稀。,10月13日用藥前的試用組小豬,10月13日用藥前的對照組小豬,選用的為7日齡仔豬，該窩仔豬共計10頭，拉稀8頭，4頭使用穎泰二號，4頭使用諾氟沙星。 諾氟沙星組組10月13日下午用藥，10月14日仍拉稀繼續(xù)用藥，至10月15日2頭仔豬好轉(zhuǎn)，10月16日糞便成型，10月17日康復(fù)，不再灌藥

18、，其中死亡1頭。 穎泰二號組10月13日下午用藥，10月14拉稀，10月15日2頭糞便成型，10月16用藥一天康復(fù)。 以上結(jié)果可以看出穎泰二號對仔豬痢疾有顯著的治療作用，效果同諾氟沙星相似，且效果較諾氟沙星更顯著。,試用案例二,試用組康復(fù)過程中的仔豬,對照組康復(fù)過程中的仔豬,試用組康復(fù)后仔豬,對照組康復(fù)后仔豬,試用案例三,選用的為8日齡仔豬，該窩仔豬共計11頭，拉稀8頭，4頭使用穎泰二號，4頭使用諾氟沙星。3天后使用腸