艾滋病檢測技術(shù)新進(jìn)展

1、艾滋病檢測技術(shù)新進(jìn)展及其應(yīng)用,郭志宏浙江省疾病預(yù)防控制中心,,內(nèi)容提要,1.HIV急性期感染或窗口期感染檢測（Ab/Ag聯(lián)合檢測和集合PCR）2.嬰幼兒早期診斷 （nest RT-PCR）3.快速檢測策略及質(zhì)控,1、HIV-1持續(xù)流行： 全球HIV流行和AIDS仍繼續(xù)增加，尤其是MSM同性戀人群，多達(dá)50% HIV 傳播發(fā)生在疾病急性和早期，（流行病學(xué)意義）2、高病毒RNA水平： 性傳播感染仍具首位，生殖道 HI

2、V RNA 水平相當(dāng)于血液中HIV RNA水平。高病毒載量、獨(dú)特的病毒特性以及缺乏中和抗體，急性期感染者感染性極高。VL>10 M copies/mm33、極易垂直傳播： 懷孕婦女感染HIV非常常見，增加HIV垂直傳播的危險(xiǎn)。2011年4月全國報(bào)告的HIV感染者（5560例）中，母嬰傳播占1.3%；AIDS病人（2806例）中，母嬰傳播占1.0%。,公共衛(wèi)生意義：HIV-1 流行形勢嚴(yán)峻,為什么HIV急性感染（AHI）越來

3、越受到重視？,4、應(yīng)盡早盡快進(jìn)行診斷： HIV感染急性期，感染者無癥狀和流感樣癥狀而經(jīng)常漏檢而誤診，感染者本人不知自己感染狀態(tài)，極易在高危人群中傳播5、應(yīng)盡早進(jìn)行人群干預(yù)： 實(shí)時(shí)對(duì)感染者及其配偶、孕婦感染者及其嬰兒進(jìn)行干預(yù)，知曉感染狀態(tài)，減少危險(xiǎn)性行為；了解和干預(yù)復(fù)雜的性傳播網(wǎng)6、應(yīng)盡早進(jìn)行病毒干預(yù)： 在AHI時(shí)期進(jìn)行可能的干預(yù)以限制HIV復(fù)制和整合入病毒潛伏池、（整合后不可治愈），早期抗病毒治療的必要

4、性(轉(zhuǎn)變觀念)7、指導(dǎo)疫苗研究： 基于急性期感染時(shí)期的傳播性/奠基者病毒的特性8、建立人類自然模型： 研究AHI個(gè)體，為詳細(xì)了解人類HIV傳播事件提供最好的機(jī)會(huì),公共衛(wèi)生意義：早診斷、早干預(yù)、早治療、降兩率、指導(dǎo)疫苗研究,為什么HIV急性感染（AHI）越來越受到重視？,方法：前瞻性隨訪高危人群隊(duì)列發(fā)現(xiàn)陽轉(zhuǎn)感染者（MSM,IDU, SW,單陽伴侶） 限制：1）前瞻性隨訪HIV陰性人群的巨額花費(fèi)；

5、 2）在陽轉(zhuǎn)時(shí)刻或接近陽轉(zhuǎn)時(shí)難以找到研究對(duì)象，難以采集到急性期血 清陰性病毒血癥期峰值的樣本；（美國國防部聯(lián)手NIH 已經(jīng)啟動(dòng)疫苗免疫性隊(duì)列研究 RV217， 每周二次檢測HIV RNA，試圖發(fā)現(xiàn)AHI；我國十一五重大專項(xiàng)也啟動(dòng)了急性期感染的研究）,前瞻性隊(duì)列研究：高危人群,橫斷面研究：普通人群,血液中心通常使用集合（6-96份血漿）NAT篩查，陽性集合拆分并檢測出個(gè)體感染者，使用病毒特異性

6、“區(qū)別”NAT檢測確認(rèn)，陽性者納入轉(zhuǎn)診和報(bào)告系統(tǒng) 美國北卡衛(wèi)生部門制定和實(shí)施了全州所有公共HIV檢測點(diǎn)篩查AHI規(guī)劃，對(duì)所有抗體陰性樣本進(jìn)行集合NAT RNA檢測。及時(shí)轉(zhuǎn)診、咨詢、治療和前瞻性研究,如何發(fā)現(xiàn) HIV急性感染AHI？,,,,,,,,RNA+ Ab-,P24+ Ab -,血清陽轉(zhuǎn)后的方法,RNA,p24,Ab,血清陽轉(zhuǎn),,,,,,,抗體檢測臨界值 特異性抗體比例,,時(shí)間,反應(yīng)指標(biāo),,感染,,血清陽轉(zhuǎn)前的方法,怎樣檢測H

7、IV-1早期感染?,從感染HIV到抗體呈陽性反應(yīng)這段時(shí)間血漿中含有高濃度HIV RNA有很高的傳染性現(xiàn)在普遍認(rèn)為2周～3個(gè)月,個(gè)別案例達(dá)6個(gè)月。,HIV血清陽轉(zhuǎn)窗口期,HIV感染各種檢測方法的窗口期,HIVAb檢測（第三代試劑）：窗口期約28天HIVAb/Ag聯(lián)合檢測（第四代試劑）：窗口期約15天核酸檢測： 窗口期約10天,,,病毒載量值范圍為3.84~6.84Log10Copies/mL；28例窗口期病例，病毒載量百

8、萬級(jí)有10份（35.71%）；十萬級(jí)9份（32.14%）；萬級(jí)的樣品7份（25%）；萬級(jí)以下的樣品2份，占總樣品數(shù)的7.14%。,窗口期感染者的病毒學(xué)特征,40份WB不確定樣品WB條帶,HIV急性期感染或窗口期感染檢測方法,1.Ab/Ag聯(lián)合檢測: ELISA2.HIV RNA檢測: 集合PCR,HIV Ab/Ag聯(lián)合檢測,檢測早期HIV感染的效果與單獨(dú)HIV-1抗原的試劑相當(dāng)與RT-PCR方法相比，平均滯后時(shí)間是大約3.23天與

9、第三代抗體試劑相比，窗口期縮短了1.56 到 5.32天檢測獻(xiàn)血員的特異性是99.80%第四代試劑的敏感性和特異性均有所提高,HIV Ab/Ag聯(lián)合檢測試劑的原理,HIV Ab/Ag特點(diǎn),HIV-Ab與HIV-Ag雙檢測系統(tǒng) —HIV-Ag和HIV P24抗體共同包被 —HRP標(biāo)記HIV-Ag和HRP標(biāo)記親和素共同組成酶標(biāo)試劑雙抗原夾心法測HIV-Ab ——包被抗原+HRP標(biāo)記抗原雙抗體夾心LA

10、B法測HIV-Ag ——包被抗體＋生物素標(biāo)記抗體＋HRP標(biāo)記親和素生物素-親和素反應(yīng)系統(tǒng)應(yīng)用,HIV-Ag/Ab試劑對(duì)BBI panel檢測結(jié)果,,24種國外抗體試劑窗口期與萬泰試劑一致，均27天。 ABBOTT（2種）、萬泰和伯樂抗原試劑窗口期均為7天，靈敏度一致。,集合HIV RNA RT-PCR樣本的路線,集合的拆分檢測路線,,,Low：低于檢測限,HIV窗口期感染樣品各級(jí)POOL檢測結(jié)果,50份標(biāo)本混

11、合?陽性 每10份標(biāo)本再檢測 ?陽性每一份標(biāo)本再檢測,集合HIV核酸檢測用于血液篩查,集合 HIV RNA 檢測方法用于在HIV抗體陰性的血清（血漿）樣本中篩查處于急性感染期HIV RNA陽性的樣本。,,,注* RT1和RT2檢測均為陰性的樣品為按陰性咨詢同時(shí)，為進(jìn)一步排除假陰性的樣品將保留血漿，集中進(jìn)行ELISA復(fù)檢，ELISA復(fù)檢為陽性的樣品進(jìn)一步做WB確認(rèn)，同時(shí)進(jìn)行隨訪。,,窗口期檢測程序,,,,,,,

12、應(yīng)用集合PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)窗口期感染者,MSM VCTIDU ? 篩查-? 篩查+ 集合PCR WB ?+結(jié)合流行病史，判斷窗口期感染,MSM人群早期感染建議檢測流程,2024/2/2,男男性行為人群HIV-1早期感染檢測策略及新發(fā)感染率研究,,嬰幼兒HIV感染的診斷,HIV感染產(chǎn)婦生嬰幼兒在出生后18個(gè)月內(nèi)可應(yīng)用HIV核酸檢測進(jìn)行早期HIV感染診斷。逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）方

13、法，一般需擴(kuò)增HIV gag 和pol 和env 基因片段。如果兒童第一次采血時(shí)已滿12個(gè)月，則應(yīng)首先進(jìn)行HIV抗體檢測。對(duì)于抗體陽性者進(jìn)行HIV核酸檢測。如果已滿18個(gè)月，不做核酸檢測。,,感染嬰兒平均S/CO值隨月齡變化曲線（24個(gè)感染嬰兒(3個(gè)死亡)，82個(gè)樣本）n: 樣本數(shù),,嬰幼兒感染診斷：12月內(nèi)核酸檢測，13-17月先抗體，陽性者檢測核酸，18個(gè)月以上抗體檢測,,核酸檢測流程,,,快速檢測，是艾滋病實(shí)驗(yàn)室多了一種檢測方

14、法。快速檢測，是為了更多、更快的的發(fā)現(xiàn)感染者?？焖贆z測，不是為了取代實(shí)驗(yàn)室，但不能因?yàn)橛辛藢?shí)驗(yàn)室而放棄使用快速檢測。,快速檢測,“五擴(kuò)大七加強(qiáng)”,擴(kuò)大宣傳教育覆蓋面擴(kuò)大監(jiān)測檢測覆蓋面擴(kuò)大預(yù)防母嬰傳播覆蓋面擴(kuò)大綜合干預(yù)覆蓋面擴(kuò)大抗病毒治療覆蓋面加強(qiáng)血液管理加強(qiáng)醫(yī)療保障加強(qiáng)關(guān)懷救助加強(qiáng)權(quán)益保護(hù)加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)加強(qiáng)防治隊(duì)伍建設(shè)加強(qiáng)國際合作,,,國務(wù)院 國發(fā)【2010】48號(hào)：,擴(kuò)大監(jiān)測檢測覆蓋面,要進(jìn)一步加強(qiáng)監(jiān)測檢測網(wǎng)絡(luò)

15、建設(shè)，依托現(xiàn)有醫(yī)療衛(wèi)生資源，配備必要的設(shè)備和人員，擴(kuò)大檢測服務(wù)范圍，推廣使用快速簡便的檢測方法，提高檢測可及性。組織各級(jí)各類醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)主動(dòng)開展艾滋病病毒檢測咨詢。,建立快速檢測點(diǎn)，擴(kuò)大檢測覆蓋率,我國地域遼闊，在一些有檢測需求但尚不具備條件建立實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)療機(jī)構(gòu)、農(nóng)村鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）衛(wèi)生院、社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心和艾滋病自愿咨詢檢測點(diǎn)（VCT）需要建立快速檢測點(diǎn)，以擴(kuò)大檢測覆蓋面、發(fā)現(xiàn)更多的艾滋病病毒感染者。,,疫情的新特征（病人發(fā)現(xiàn)晚）要求開展快檢

16、以盡早盡快發(fā)現(xiàn),增加檢測可及性是中國控制艾滋病的關(guān)鍵,1.知曉 HIV感染狀況能夠得到有效的陽性的干預(yù)。2.通過行為改變可以減少2/3的HIV經(jīng)性傳播。3.及時(shí)的抗病毒治療可以減少病毒載量從而減少二代傳播 – “治療作為預(yù)防”—90%以上的效能。4.如果有>60%的HIV+知曉自己的感染狀態(tài)并獲得相應(yīng)服務(wù)——HIV疫情達(dá)到控制。5.為什么目前HIV+發(fā)現(xiàn)率不高<25%？主動(dòng)檢測的渠道有限（主要通過CDC系統(tǒng)，醫(yī)院初檢

17、陽性的丟失率高），檢測過程繁瑣（出結(jié)果時(shí)間太長，二次隨訪失訪）。,中國HIV感染知曉率（2010年）,28 % 知道自己感染,在中國增加檢測可及性的關(guān)鍵,HIV Testing Sites – Increase 1.增加HIV檢測點(diǎn)HIV Testing procedures – Simplify (User Friendly) 2.簡化HIV檢測流程——越快越好，同一場所兩次檢測將會(huì)促進(jìn)可及性，大大減少結(jié)果告知以及隨

18、訪過程中的丟失，簡化檢測，比如使用快檢會(huì)使更多更低級(jí)別的場所能夠提供HIV檢測——增加可及性。,2024年2月2日星期五,© 2010 Bill & Melinda Gates Foundation |,35,快速檢測是區(qū)別于常規(guī)ELISA的一種初篩方法，只是艾滋病實(shí)驗(yàn)室多了一種檢測方法?？焖贆z測是在不具備篩查實(shí)驗(yàn)室條件的地點(diǎn)開展目標(biāo)人群的檢測，是為了更多、更快的發(fā)現(xiàn)感染者。開展快速檢測仍然需要經(jīng)過專業(yè)

19、培訓(xùn)，接受上級(jí)有關(guān)部門監(jiān)督和管理，檢測點(diǎn)不是為了取代實(shí)驗(yàn)室，只是篩查實(shí)驗(yàn)室的補(bǔ)充。,快速檢測的定義,國家參比實(shí)驗(yàn)室：RT1+RT2組合結(jié)果,云南：快速試劑檢測陽性結(jié)果與WB結(jié)果的符合性,1檢測樣本：1435份，同時(shí)用SD與雅培試劑進(jìn)行檢測，一種或兩種方法陽性（共398份）用WB進(jìn)行確證。2雅培陽性SD陰性10份，WB8份陰性，1份陽性，1份不確定SD陽性雅培陰性9份，WB7份陰性，2份不確定,云南：快速試劑檢測陽性結(jié)果與WB結(jié)果討論

20、,快速試劑應(yīng)用可縮短服務(wù)對(duì)象檢測結(jié)果等待時(shí)間，提高初篩陽性結(jié)果告知率、CD4細(xì)胞檢測率、隨訪率兩種快速檢測結(jié)果陽性比一種快速檢測陽性與確證結(jié)果的符合率高。兩種快速試劑檢測陽性與確證結(jié)果一致率低于替代策略II（兩種ELISA檢測陽性，S/CO>6+快速檢測陽性，一致性100%，中國艾滋病性病，2008年第3期）該比較的局限性：兩種快速試劑均為進(jìn)口試劑，沒有對(duì)陰性樣本進(jìn)行對(duì)比。部分國產(chǎn)快速檢測試劑質(zhì)量需進(jìn)一步提高,,,貴州：

21、快速檢測試劑與ELISA WB符合性,貴州：母嬰阻斷示范區(qū)項(xiàng)目快檢結(jié)果分析,艾滋病病毒抗體快速檢測技術(shù)手冊(cè)(2011年版）,1、人員要求2、檢測點(diǎn)的設(shè)置3、要求與管理3、試劑選擇4、樣本采集及注意事項(xiàng)5、檢測策略及流程6、實(shí)驗(yàn)記錄7、結(jié)果報(bào)告與告知8、檢測質(zhì)量控制9、生物安全及個(gè)人防護(hù)。,人員要求,從事HIV快速檢測的人員需有相關(guān)的檢驗(yàn)或醫(yī)學(xué)知識(shí)，經(jīng)過縣級(jí)以上相關(guān)專業(yè)技術(shù)部門培訓(xùn)，取得合格證書。 未經(jīng)正規(guī)培訓(xùn)或培訓(xùn)后

22、考核未合格的人員,不得進(jìn)行快速檢測工作。對(duì)從事快速檢測的人員,應(yīng)根據(jù)需要進(jìn)行再培訓(xùn)。,檢測點(diǎn)的設(shè)置,各省可根據(jù)艾滋病流行情況和防治工作整體需求，統(tǒng)籌考慮檢測點(diǎn)設(shè)置，有效開展快速檢測。根據(jù)當(dāng)?shù)匕滩×餍星闆r和實(shí)際需求，可在有檢測需求、但不具備建立實(shí)驗(yàn)室條件的地方設(shè)置檢測點(diǎn)。檢測點(diǎn)可由當(dāng)?shù)匕滩〈_證實(shí)驗(yàn)室或篩查實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)培訓(xùn)、驗(yàn)收，衛(wèi)生行政部門負(fù)責(zé)審批，在當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門與省艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室備案。,檢測點(diǎn)的要求,快速檢測所在房間溫

23、度可控，保證室內(nèi)達(dá)到試劑要求的溫度，有檢測臺(tái)面，光線充足，可以消毒。需配備快速檢測所需物品，至少包括：普通冰箱、消毒與污物處理設(shè)備、一次性消耗品、安全防護(hù)用品和資料柜。嚴(yán)格按照快速試劑說明書要求檢測，保存原始記錄及必須參加省（地市級(jí)）組織的快速檢測能力驗(yàn)證。,檢測點(diǎn)的管理,省艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)本省HIV快速檢測的實(shí)施及其質(zhì)量保證。統(tǒng)籌考慮檢測點(diǎn)的發(fā)展與規(guī)劃，組織本省快速檢測能力驗(yàn)證活動(dòng)。各市級(jí)艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室指導(dǎo)本地檢測點(diǎn)

24、的建立與管理，進(jìn)行人員培訓(xùn)、現(xiàn)場督導(dǎo)和質(zhì)量管理。,快速檢測試劑（RT）,是在ELISA基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種檢測技術(shù)，它用膠體金或硒標(biāo)記抗原、抗體后以層析方法進(jìn)行檢測。突出優(yōu)點(diǎn)為快速、試劑便于保存、檢測不需要特殊設(shè)備并可以單份檢測 ，比較適用于基層醫(yī)療單位和標(biāo)本初篩。挑戰(zhàn)：進(jìn)一步提高檢測靈敏度和特異性，實(shí)現(xiàn)檢測多元化，進(jìn)行定量和半定量檢測膠體金紙條將會(huì)更加廣泛地應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域。,,艾滋病快速檢測試驗(yàn)（RT）,快速HIV試劑的原理*顆

25、粒凝集 （Particle Agglutination, PA)免疫滲漏 （Immunoconcentration, Flow through, FT)免疫層析 （Immunochromatograpy, lateral flow, IF),快速檢測：膠體金（或膠體硒）原理和方法,原理包括HIV-和HIV-2抗原直接包被于硝酸纖維素膜上的檢測線，將HIV抗體包被于質(zhì)控線，通過利用膠體金(或膠體硒）標(biāo)記HIV-1 和HIV-2抗原,

26、采用免疫層吸雙抗原夾心法原理來檢測待測樣品中可能存在的HIV抗體。操作方法操作簡單，只需在加樣處加上樣品。,艾滋病快速檢測試劑構(gòu)造,艾滋病快速檢測：膠體金（或膠體硒）結(jié)果判讀,結(jié)果判讀反應(yīng)區(qū)和質(zhì)控區(qū)均出現(xiàn)紅色條帶為陽性。質(zhì)控區(qū)有條帶，反應(yīng)區(qū)無條帶為陰性。反應(yīng)區(qū)和質(zhì)控區(qū)均無條帶則實(shí)驗(yàn)無效。,艾滋病快速檢測的優(yōu)點(diǎn),1.操作更快2.不需要成批實(shí)驗(yàn)3.不需要使用特殊儀器4.檢測的當(dāng)時(shí)就給出結(jié)果 5.只能采用經(jīng)過SFDA

27、批準(zhǔn)的快速HIV抗體檢測，以確保質(zhì)量,快速檢測試劑使用要求,必須使用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)的快速試劑。 試劑必須在有效期內(nèi)使用。 根據(jù)檢測目的選擇試劑。初篩選擇敏感性高的試劑，復(fù)檢選擇特異性高的試劑。 推薦使用臨床評(píng)估質(zhì)量好并且近幾年連續(xù)考評(píng)結(jié)果穩(wěn)定的試劑,快速檢測試劑主要使用以下人群,MSM 現(xiàn)場干預(yù)VCT（自愿咨詢檢測）PMTCT（母嬰阻斷）和婚前檢查擴(kuò)大檢測(鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院、社區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生服務(wù)站）PITC（醫(yī)療機(jī)

28、構(gòu)主動(dòng)提供檢測咨詢）,快速檢測策略和流程,當(dāng)檢測點(diǎn)上有兩種快速檢測試劑時(shí)：常規(guī)檢測當(dāng)檢測點(diǎn)上有兩種快速檢測試劑時(shí)：應(yīng)急檢測當(dāng)檢測點(diǎn)上只有一種快速檢測試劑時(shí),末梢血樣本采集方法和注意事項(xiàng),靜脈血樣本采集和注意事項(xiàng),1、常規(guī)檢測,,,,樣品,,,初篩試驗(yàn),,,快檢試劑1,,,陽性反應(yīng),,,陰性反應(yīng),,,,,,,復(fù)檢試驗(yàn),,,,快檢試劑1+快檢試劑2,,,均陽性反應(yīng),,,一陰一陽,,,均陰性反應(yīng),,,,,,,,送確證試驗(yàn)室,,,報(bào)告陰性,

29、,,,,,,,HIV抗體快速檢測流程圖,,,,兩種快檢試劑同時(shí)檢測樣品,,,,均陽性反應(yīng),,,一陰一陽,,,均陰性反應(yīng),,,,,,,,,送確證試驗(yàn)室,,,報(bào)告陰性,,,,,,,HIV抗體快速檢測流程圖,按疑似陽性咨詢告知,按陰性咨詢并告知,2、應(yīng)急檢測,,,樣品,,,初篩試驗(yàn),,,,,快檢試劑,,,陽性反應(yīng),,,陰性反應(yīng),,,,,,,復(fù)檢試驗(yàn),,,,,將樣本轉(zhuǎn)送篩查實(shí)驗(yàn)室,,,均陽性反應(yīng),,,一陰一陽,,,均陰性反應(yīng),,,,,,,,,

30、送確證實(shí)驗(yàn)室,,,報(bào)告陰性,,,,,,,,,HIV抗體快速檢測流程圖,3、只有一種快速試劑時(shí),實(shí)驗(yàn)記錄,可有數(shù)碼影像資料或文字記錄文字記錄：檢測序列號(hào)，人群來源，受檢者姓名，年齡，性別，檢測日期，檢測試劑盒的名稱，批號(hào)，有效期及檢測日期，檢測結(jié)果與檢測人等。對(duì)快速檢測呈陽性反應(yīng)的就診者，要收集個(gè)人的真實(shí)信息，登記身份證號(hào)碼和聯(lián)系方式（包括移動(dòng)電話）。填寫《快速檢測陽性反應(yīng)樣品送檢單》,快檢質(zhì)控,1. 樣品要求唯一編號(hào)，實(shí)驗(yàn)前仔細(xì)核對(duì)

31、，檢查。2. 檢測人員每日檢查室內(nèi)的溫濕度，實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫濕度應(yīng)在試劑盒操作說明書要求的范圍內(nèi)，試劑和樣品應(yīng)按要求存放，并做好記錄。3. 檢查是否有足夠的試劑庫存,明確試劑在有效期內(nèi)，禁止使用過期試劑。4. 每批實(shí)驗(yàn)如果應(yīng)用不同批號(hào)的試劑，應(yīng)做好記錄。,檢測過程質(zhì)控,1. 記錄樣品編碼、姓名、試劑名稱及批號(hào)、操作者姓名等。2. 核對(duì)樣品標(biāo)號(hào)，標(biāo)記，防止錯(cuò)號(hào)。3. 收集并集中擺放全部待檢樣品，包括外部質(zhì)控品。4.需要在冰箱保存的試

32、劑，從冷藏環(huán)境中取出后放置室溫，平衡后再使用。剩余的試劑條應(yīng)立即放入自封袋中密封，按照試劑廠家提供的說明書開始操作。5. 建議每一次最多做10個(gè)樣品，確保試紙條的編號(hào)與標(biāo)本編號(hào)的準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)，防止錯(cuò)號(hào)和交叉污染。6. 結(jié)果判定時(shí)，質(zhì)控帶必須出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)才能成立。如未呈現(xiàn)質(zhì)控條帶，本次試驗(yàn)結(jié)果無效，樣品須重檢。7. 每個(gè)檢測日做一次外部質(zhì)控品，更換檢測人員時(shí);更換不同試劑批號(hào)時(shí)，更換不同的試劑包裝時(shí);更換不同的試劑廠家時(shí)均應(yīng)一次外部質(zhì)控品。

33、,檢測后質(zhì)控,1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判讀時(shí)，應(yīng)保證判讀地點(diǎn)光線充足。對(duì)于難以判讀的條帶，最好有2人判讀。2.復(fù)核樣品編號(hào)并填寫試驗(yàn)結(jié)果。3.清潔并處理實(shí)驗(yàn)廢棄物。4.向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告檢測結(jié)果。5.檢查試劑庫存量，根據(jù)實(shí)際需要，提前向上級(jí)實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)補(bǔ)充。6.收到試劑時(shí)，試劑的外包裝盒或內(nèi)容物已損傷；標(biāo)簽出現(xiàn)錯(cuò)誤、缺失或字跡模糊 (特別是產(chǎn)品廠家名稱，批號(hào)和貨號(hào)，失效期或/和生產(chǎn)日期)；缺失目錄或操作說明書；試劑盒內(nèi)容物出現(xiàn)滲漏等。提

34、示存在質(zhì)量隱患，應(yīng)詳細(xì)記錄。,部分快速檢測試劑檢測結(jié)果比較,,（相同的樣本，同一人員按說明書進(jìn)行檢測）,快速檢測試驗(yàn)評(píng)價(jià),試劑穩(wěn)定，可室溫長期保存。試驗(yàn)時(shí)不需任何設(shè)備，迅速、簡便、特異性較好，敏感性約相當(dāng)于中度敏感的ELISA，適用于應(yīng)急檢測、門診急診個(gè)體檢測。目前已有國內(nèi)產(chǎn)品。一般可在10?30min內(nèi)判讀結(jié)果。,,,,快速試劑使用中存在的問題,快速檢測只是初篩檢測，存在一定的假陽性率和假陰性率；技術(shù)上屬于主觀判讀，不具備標(biāo)準(zhǔn)化條件

35、；快速檢測的質(zhì)量控制問題目前沒有有效方法；存在較大的批間誤差，加上不屬于政策規(guī)定項(xiàng)目，風(fēng)險(xiǎn)較大，基層醫(yī)療衛(wèi)生單位不愿意承擔(dān)責(zé)任。擔(dān)心敏感性不夠高，不敢出陰性報(bào)告；,幾種快速檢測試劑質(zhì)量事故,試劑廠家1（2007年12月29日）事件：X確證實(shí)驗(yàn)室報(bào)告廠家1（膠體金法）批號(hào)為V200707033對(duì)12份HIV-1抗體陽性的病人樣品檢測有6份呈假陰性反應(yīng)。結(jié)果：通知轄區(qū)內(nèi)的網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室暫停使用該廠家的HIV快速試劑，封存現(xiàn)有試劑，退回

36、廠家 。,幾種快速檢測試劑質(zhì)量事故,試劑廠家2（2008年2月1日）事件：X人民醫(yī)院檢驗(yàn)科報(bào)告試劑廠家2（膠體金法）批號(hào)為2007071801對(duì)1份HIV-1抗體陽性的病人樣品檢測1份呈假陰性反應(yīng)。結(jié)果：將該樣品和試劑上送中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，結(jié)果為該樣品對(duì)該批號(hào)試劑以及另一批號(hào)試劑呈陽性反應(yīng)。原因：試劑檢測帶的顯色太淺造成漏判和誤判。,幾種快速檢測試劑質(zhì)量事故,試劑廠家3（ 2008年2月23日）事件：X市CDC報(bào)告試劑廠家3 （膠

37、體金法）批號(hào)為W0680401C對(duì)5份HIV抗體確證陽性的病人樣品檢測5份呈假陰性反應(yīng)。結(jié)果：將該批樣品和試劑上送中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，結(jié)果為該樣品對(duì)該批號(hào)試劑反應(yīng)呈陽性反應(yīng)。原因：試劑檢測帶的顯色太淺造成漏判和誤判。,幾種快速檢測試劑質(zhì)量事故,試劑廠家4 （ 2009年4月10日）事件：X確證實(shí)驗(yàn)室報(bào)告試劑廠家4（金標(biāo)法）批號(hào)為W0690305C對(duì)10份HIV抗體陰性的病人樣品檢測5份呈假陽性反應(yīng)。結(jié)果：退貨并更換新批號(hào)試劑。,快速

38、檢測注意事項(xiàng),不提倡個(gè)人在家中檢測。應(yīng)由經(jīng)培訓(xùn)的人員操作，注意生物安全操作，避免職業(yè)暴露發(fā)生。在質(zhì)控窗口內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)控帶，如實(shí)驗(yàn)完成后未呈現(xiàn)紅色質(zhì)控帶，說明試劑盒內(nèi)質(zhì)控?zé)o效，該試驗(yàn)結(jié)果無效，樣品須重檢。出現(xiàn)以下問題，提示存在質(zhì)量隱患，應(yīng)引起重視：運(yùn)輸包裝、內(nèi)盒或試劑盒的物理損傷；在單包裝內(nèi)存在混雜物質(zhì)；標(biāo)簽出現(xiàn)錯(cuò)誤、缺失或字跡模糊 （特別是產(chǎn)品名稱或出產(chǎn)廠家名稱，批號(hào)和貨號(hào)，失效期或/和生產(chǎn)日期）；缺失目錄；泄漏或污染；不適宜的存放條件

39、；保護(hù)包裝紙破損或污染；,HIV檢測后陰性結(jié)果咨詢的程序和內(nèi)容,1.核對(duì)求詢者的編號(hào)和結(jié)果，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.直接向求詢者告知檢測結(jié)果，解釋檢測陰性結(jié)果的意義。3.討論窗口期問題：核實(shí)本次檢測是否處于窗口期內(nèi)，4.幫助求詢者制定改變個(gè)人危險(xiǎn)行為的計(jì)劃,討論安全性行為措施，討論安全注射行為，避免共用注射器吸毒、清潔針具交換、針具消毒、美沙酮維持治療等。5.確定求詢者行為改變可以得到的支持：提供當(dāng)?shù)孛赓M(fèi)安全套發(fā)放點(diǎn)、清潔針具

40、交換點(diǎn)、美沙酮維持治療門診和同伴小組活動(dòng)的信息。6.鼓勵(lì)求詢者促使其性伴（同伴）接受HIV咨詢和檢測。7.提供必要轉(zhuǎn)介服務(wù)：婦女健康中心、規(guī)范化性病門診、美沙酮維持治療門診、針具交換點(diǎn)、心理咨詢門診等機(jī)構(gòu)。,HIV檢測后陽性結(jié)果咨詢的程序和內(nèi)容,1.核對(duì)求詢者的編號(hào)和結(jié)果，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.對(duì)快檢陽性者解釋初篩陽性結(jié)果的含義，解釋進(jìn)行HIV抗體檢測復(fù)查和確證試驗(yàn)的重要性，采集第二份血，并核實(shí)受檢者的基本信息和聯(lián)系方式。3

41、.對(duì)確證結(jié)果陽性者解釋確證結(jié)果陽性的含義，說明HIV感染者和艾滋病病人的區(qū)別。提供避免再次感染和傳播的信息和方法，包括安全套使用方法、美沙酮維持治療、清潔針具交換等，講解感染者依法享有的權(quán)利、義務(wù)及應(yīng)承擔(dān)的社會(huì)責(zé)任。提供情感支持。4.避免母嬰傳播：為感染育齡婦女及其家人提供預(yù)防母嬰傳播的信息、醫(yī)療保健及轉(zhuǎn)介服務(wù)。5.鼓勵(lì)求詢者進(jìn)行配偶/固定性伴告知和檢測6.提供治療和關(guān)懷轉(zhuǎn)介服務(wù)：介紹相關(guān)檢測、艾滋病抗病毒治療、機(jī)會(huì)性感染預(yù)防和治

42、療、結(jié)核病治療等服務(wù)信息，介紹感染者自助網(wǎng)絡(luò)、生活救助等機(jī)構(gòu)信息，提供必要的轉(zhuǎn)介服務(wù)。7.提供后續(xù)咨詢、支持及相關(guān)信息,生物安全與個(gè)人防護(hù),1.檢測人員上崗前接受相關(guān)的生物安全和防護(hù)培訓(xùn)。2.檢測點(diǎn)應(yīng)提供一次性乳膠手套、口罩、帽子。3.檢測人員工作前應(yīng)修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)點(diǎn)檢測樣本的同時(shí)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。4.有手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況，應(yīng)暫停工作。5.操作過程中，如發(fā)現(xiàn)工作服被污