天然抗真菌肽APS的分離純化、理化特性及其生物活性研究.pdf_第1頁
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1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文天然抗真菌肽APS的分離純化、理化特性及其生物活性研究姓名:陳剛申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:程驚秋20030505四川大學(xué)碩士學(xué)位論文種蛋白內(nèi)切酶處理極不敏感。N - 末端測序法不能分析A P S l 和A P S 5 氨基酸序列,估計其N 一末端封閉。電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜序列分析結(jié)果顯示,五個活性成分具有較高的同源性,其中A P S 4 與A P S 5 的氨基酸序列完全~致。按照A P S l 和A P

2、 S 4 的測序結(jié)果,人工合成線性多肽,但沒有檢測到活性。采用二倍稀釋法測定A P S 體外對啤酒酵母( S a c c h a r o m y c e sc e r e v i s i a e ) 、白色念珠菌( C a n d i d a a l b i c a n s ) 、白色念珠菌C M C C ( F ) 9 8 0 0 1( C a n d i d a a l b i c a n s ) 、新型隱球菌( C r y p t

3、 o c o c c u s n e o f o r m a n s ) 、紅色隱球菌( C r y p t o c o c c u s n e o f o r m a n s ( S a n f .) V u i U .) 、疣狀毛霉( T r i c h o p h 3 ,t o nv e r r u c o s u m ) 等七種常見真菌的抑制作用,發(fā)現(xiàn)A P S 對受試真菌有較小的最低抑菌濃度( M I C ) ,作用優(yōu)于氟康唑

4、。A P S 對大腸桿菌T G l 、金黃色葡萄球菌A T C C 2 5 9 2 3 的生長沒有影響。機理研究表明未經(jīng)純化的A P S作用于脂質(zhì)平面膜,可以形成跨膜電流,提示活性成分可能通過改變脂質(zhì)雙層膜通透性抗菌。A P S 的純化方法已經(jīng)建立。性質(zhì)分析表明,A P S 屬于一類穩(wěn)定的環(huán)肽分子,可能的抗真菌機制是破壞膜的完整性,最終導(dǎo)致真菌死亡。A P S對受試真菌中多種常見病原真菌的強烈抑制作用,已初步證明了其醫(yī)藥應(yīng)用前景,它具有

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