血細(xì)胞分析項目質(zhì)量要求及性能驗證

1、血細(xì)胞分析項目質(zhì)量要求及性能驗證,,前言,本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：衛(wèi)生部臨床檢驗中心、四川大學(xué)華西醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：彭明婷、周文賓、谷小林、李臣賓、吳際、陸紅、江虹、李建英。,范圍,本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了臨床血液學(xué)檢驗常規(guī)項目（全血細(xì)胞計數(shù)和凝血血試驗）的分析質(zhì)量要求及驗證方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于使用血液分析儀和血凝儀的臨床實驗室、室間質(zhì)量評價

2、機構(gòu)或體外診斷企業(yè)的內(nèi)部質(zhì)量控制、外部質(zhì)量評價及檢測系統(tǒng)的性能驗證,引用文件,下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。WS/T 407  醫(yī)療機構(gòu)內(nèi)定量檢驗結(jié)果的可比性驗證指南WS/T 408  臨床化學(xué)設(shè)備線性評價指南,,CLSI EP9-A2  用患者樣本進行方法學(xué)比對及偏倚評估：批準(zhǔn)

3、指南～第二版（Method comparison and bias estimation using patient samples: Approved guideline-Second edition,下列術(shù)語和定義適用于本文件。,1、驗證 verification 提供客觀證據(jù)以認(rèn)定規(guī)定要求得到滿足。,,2、攜帶污染 carryover 由測量系統(tǒng)將一個檢測樣品反應(yīng)攜帶到另一個檢測樣品反應(yīng)的分析物不連續(xù)的量

4、，由此錯誤地影響了另一個檢測樣品的表現(xiàn)量。,,3、精密度 precision 在規(guī)定的條件下，獨立檢測結(jié)果間的一致程度，精密度的度量通常以不精密度表示。,,4、不精密度 imprecision 同一實驗室用同種方法在多次獨立檢測中分析同一樣品所得結(jié)果的離散程度。,,5、批內(nèi)精密度 within-run precision 在相同的檢測條件下，對同一被測物進行連 續(xù)測量所得結(jié)果間的一致程度。注

5、：批內(nèi)精密度又稱為重短性。,,6、日間精密度 inter-day precision 在不同天內(nèi)對同一被測物進行重復(fù)測量所得結(jié)果間的一致程度。,,7、線性 linearity 檢測樣本時，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的能力。,,8、正確度 trueness 一系列檢測結(jié)果的均值與靶值之間的一致程度，以偏倚表示。,,9、偏倚 bias 同一實驗室用同種方法在多次

6、獨立檢測中分析同一樣品所得結(jié)果的均值與靶值之間的差異。 注1：靶值可以是參考方法測定值、有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值或其他適當(dāng)定值，如室間質(zhì)量評價計劃的統(tǒng)計值。 注2：偏倚一般通過分析有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其他適當(dāng)參考物質(zhì)、與參考方法或已知正確度的其他方法（如公認(rèn)的指定比對方法）比對而獲得。 注3：偏倚可用絕對值或相對值表示。 注4：偏倚有方向性，即可能是正偏倚或負(fù)偏倚。,,10、準(zhǔn)確度 accuracy 單次檢測結(jié)果與參考值間的一致程度

7、，以 誤差表示。,,11、總誤差 total error 實驗室用某方法在多次獨立檢測中分析某 樣品所得各個結(jié)果值與靶值之差在一定置 信區(qū)間內(nèi)的最大允許范圍。,,12、可比性 comparability 使用不同的檢測程序測定某種分析物獲得的檢測結(jié)果間的一致性。結(jié)果間的差異不超過規(guī)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)時，可認(rèn)為結(jié)果具有可比性。,全血細(xì)胞計數(shù)的分析質(zhì)量要求及驗證方法,1 本底計數(shù)1.1 本底

8、計數(shù)檢測要求血液分析儀本底計數(shù)各參數(shù)的結(jié)果應(yīng)符合表1的要求。,,表1 血液分析儀本底計數(shù)的檢測要求,5.1.2 驗證方法用稀釋液作為樣本在分析儀上連續(xù)檢測3次，3次檢測結(jié)果的最大值應(yīng)在允許范圍內(nèi)。,,2 攜帶污染2.1 攜帶污染檢測要求血液分析儀的攜帶污染率應(yīng)符合表2的要求。,,表2 血液分析儀攜帶污染檢測要求,,2.2 驗證方法 分別針對不同檢測項目，取一份高濃度的臨床樣本（EDTA-K2或EDTA-K3抗凝靜脈血）

9、，混合均勻后連續(xù)測定3次，測定值分別為H1、H2、H3； 再取一份低濃度的臨床樣本，混合均勻后連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。按式（l）計算攜帶污染率。,,式中：CR -攜帶污染率；L1 -低濃度臨床樣本的第1次測定值； L3——低濃度臨麻樣本的第3次測定值； H3——高濃度臨床樣本的第3次測定值。,,2.3 臨床樣本濃度要求 不同檢測項目所選高、低濃度樣本的濃度水平應(yīng)符合表3的要求

10、。,,表3 攜帶污染率驗證樣本的濃度要求,,3 批內(nèi)精密度3.1 批內(nèi)精密度檢測要求 批內(nèi)精密度以連續(xù)檢測結(jié)果的變異系數(shù)為評價指標(biāo)，批內(nèi)精密度應(yīng)達到廠家說明書的要求，檢測正常濃度水平新鮮血的批內(nèi)精密度至少應(yīng)符合表4的要求。,,表4 批內(nèi)精密度檢測要求,,3.2 驗證方法 取一份濃度水平在上述檢測范圍內(nèi)的臨床樣本，按常規(guī)方法重復(fù)檢測11次，計算后10次檢測結(jié)果的算術(shù)平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，按照式（2）計算變異系數(shù)。,,式中：CV

11、-變異系數(shù)；s——標(biāo)準(zhǔn)差；,——算數(shù)平均值。,,4 日間精密度4.1 日間精密度檢測要求 日間精密度以室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的變異系數(shù)為評價指標(biāo)，日間精密度應(yīng)符合表5的要求。,,表5 日間精密度檢測要求,,4.2 驗證方法 至少使用兩個濃度水平（包含正常和異常水平）的質(zhì)控品，在檢測當(dāng)天至少進行一次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控數(shù)據(jù)（失控結(jié)果已得到糾正）后按批號或者月份計算在控數(shù)據(jù)的變異系數(shù)。,,5 線性

12、5.1 線性驗證檢測要求 線性回歸方程的斜率在1±0. 05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95。 WBC、RBC、Hb和Plt項目滿足要求的線性范圍在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。5.2 驗證方法 驗證方法參照《臨床化學(xué)設(shè)備線性評價指南》 （制定過程中）,,6 正確度6.1 偏倚 正確度驗證以偏倚為評價指標(biāo)，偏倚應(yīng)符合表6的要求。,,表6 正確度驗證

13、的允許偏倚,,6.2 驗證方法 至少使用10份檢測結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮血樣本，每份樣本檢測兩次，計算20次以上檢測結(jié)果的均值。 以校準(zhǔn)實驗室的定值或臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)（如使用配套試劑、用配套校準(zhǔn)物定期進行儀器校準(zhǔn)、儀器性能良好、規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制、參加室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良、檢測程序規(guī)范、人員經(jīng)過良好培訓(xùn)的檢測系統(tǒng)）的測定均值為標(biāo)準(zhǔn)，計算偏倚。,,7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性7.1 

14、適用條件使用不同吸樣模式檢測樣本并報告結(jié)果時。,,7.2 可比性要求 同一臺血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比性應(yīng)符合表7的要求。,,表7 血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比性要求,,7.3 驗證方法 每次校準(zhǔn)后，取5份臨床樣本分別使用不同模式進行檢測，每份樣本各檢測兩次，分別計算兩種模式下檢測結(jié)果均值間的相對差異，結(jié)果應(yīng)符合表7的要求。,,8 實驗室內(nèi)的結(jié)果可比性8.1 偏差 實驗室內(nèi)

15、的結(jié)果可比性以相對偏差為評價指標(biāo)，相對偏差應(yīng)符合表8的要求。,,表8 檢測項目濃度范圍樣本數(shù)量 所占比例相對偏差,續(xù)表8,續(xù)表8,,,8.2 驗證方法8.2.1 新儀器使用前，配套檢測系統(tǒng)至少使用20份臨床樣本（濃度要求見表8），每份樣本分別使用臨床實驗室內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)和被比對儀器進行檢測，以內(nèi)部規(guī)范操作檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符

16、合表8要求的比例應(yīng)≥80%。,,8.2.2 新儀器使用前，非配套檢測系統(tǒng)按CLSI頒布的EP9-A9文件與配套檢測系統(tǒng)進行比對，至少使用40份臨床樣本（濃度要求見表8），計算相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合表8要求的比例應(yīng)≥80%。然后再按5.8.2.1的方法進行驗證。,,8.2.3 常規(guī)檢測儀器使用過程中，至少使用20份臨床樣本（血細(xì)胞計數(shù)項目所選標(biāo)本的濃度水平應(yīng)符合表8的要求，其他檢測項目所選標(biāo)本應(yīng)含正常、異常濃度水平各占50%

17、;比對可分次進行）定期（至少半年）進行一次結(jié)果比對，每個檢測項目的相對偏差符合表8要求的比例應(yīng)≥80%。,,8.2.4 以下情況，可按WS/T 407的方法和要求進行比對：a） 室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢時；b） 室間質(zhì)評結(jié)果不合格，采取糾正措施后；c） 更換試劑批號（必要時）；d） 更換重要部件或重大維修后；e） 軟件程序變更后；f）  臨床醫(yī)生對結(jié)果的可比性有疑問時；g） 患者投訴對

18、結(jié)果可比性有疑問（需要確認(rèn)時）；h） 需要提高周期性比對頻率時（如每季度或每月一次）。,比對樣本,樣本類型 臨床標(biāo)本：首選比對物質(zhì) 其他物質(zhì)：室間質(zhì)評或其他參考物質(zhì)樣本濃度水平 需已知比對物質(zhì)不同濃度水平對應(yīng)的結(jié)果 不精密度 至少檢測兩個濃度水平（正常和異常水平）,比對結(jié)果不符合要求的處理措施,維持結(jié)果的可比性需要以檢測系統(tǒng)各質(zhì)量控制環(huán)節(jié)標(biāo)準(zhǔn)化操作為前提，必要時通過校準(zhǔn)

19、改善結(jié)果的可比性即不同檢測系統(tǒng)通過結(jié)果的數(shù)字轉(zhuǎn)換獲得結(jié)果的一致性。結(jié)果不可比且難以糾正時，應(yīng)與臨床進行溝通，用不同的參考區(qū)間和/或醫(yī)學(xué)決定水平并在檢驗報告單上明確標(biāo)識。,比對樣本的濃度范圍和檢測次數(shù),以質(zhì)控品總均值±20%作為比對樣本的濃度選擇范圍 依據(jù)合并CV值，查找附錄A的表A.1，確定比對樣本的重復(fù)檢測次數(shù),,9 準(zhǔn)確度9.1 總誤差 準(zhǔn)確度驗證以總誤差為評價指標(biāo)，用相對偏差表示，相對偏