貝克曼庫(kù)爾特血細(xì)胞分析vcs技術(shù)

1、白細(xì)胞五分類VCS技術(shù),從三分類到五分類,三分類：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞 中性粒細(xì)胞 嗜酸細(xì)胞 嗜堿細(xì)胞,五分類：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞,,,,,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,粒細(xì)胞,,,,,,淋巴,嗜堿,單核,嗜酸,中性粒細(xì)胞,五分類VCS技術(shù),運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點(diǎn),對(duì)通過(guò)的單列白細(xì)胞，進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測(cè)，以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。V-低

2、頻波，分析細(xì)胞體積；C-高頻波，分析細(xì)胞核型；S-激光，分析細(xì)胞的顆粒特性。,接近原態(tài)的WBC分析,Scatter Pak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細(xì)胞: 紅細(xì)胞溶解劑通過(guò)滲透壓差溶解紅細(xì)胞保持白細(xì)胞原態(tài): 溶解終止液令白細(xì)胞恢復(fù)到“接近原態(tài)”大小,接近原態(tài)的WBC分析,接近原態(tài)的白細(xì)胞,,,進(jìn)入流式通道,混合池和流式通道,接近原態(tài)的WBC分析：前處理裝置,流體動(dòng)力聚焦,流體動(dòng)力聚焦的流式通道單細(xì)胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過(guò)流式

3、通道將重疊限制到最低限度,正常壓力差：標(biāo)本壓力小于鞘流壓力,,異常壓力差：標(biāo)本與鞘流壓力差過(guò)小,VCS檢測(cè),八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地在流式通道內(nèi)接受VCS三重檢測(cè)，得到各自的三維座標(biāo)值,VCS,,,,增強(qiáng)型流式通道,VCS增強(qiáng)型流式通道運(yùn)用三種獨(dú)立的能量探針來(lái)分析細(xì)胞,是目前最全面先進(jìn)的分析工具,更好的體積測(cè)量方法,V 是以庫(kù)爾特原理檢測(cè)細(xì)胞的體積獲得的是完全的細(xì)胞體積,VCS - DC,更好的細(xì)胞內(nèi)部結(jié)

4、構(gòu)測(cè)量方法,C 運(yùn)用高頻探針檢測(cè)細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)獲得細(xì)胞核復(fù)雜程度的信息區(qū)分分葉核和非分葉核細(xì)胞,VCS - RF,VCS - Laser,S 是運(yùn)用一個(gè)寬角度的散射范圍（10? -70?）來(lái)測(cè)量細(xì)胞的顆粒特性更好地根據(jù)顆粒特性區(qū)分淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞,更好的細(xì)胞顆粒特性測(cè)量方法,逐個(gè)、同時(shí)、直接的三維檢測(cè),NEDC Mean,細(xì)胞的三維定位,NEOP Mean,NE RLS Mean,三維分析技術(shù),將檢測(cè)過(guò)的8,192個(gè)

5、細(xì)胞分布到一個(gè)以V、C、S為三維坐標(biāo)的空間內(nèi)，顯示出細(xì)胞群特征。高智能的計(jì)算機(jī)軟件分析分析細(xì)胞群的位置、相對(duì)密度、輪廓、和大小。三維坐標(biāo)的數(shù)據(jù)分析位點(diǎn)多過(guò) 16 × 106個(gè)。,三維細(xì)胞定位,三維空間的多側(cè)面表示-DF1 -體積(V),激光散射(S),,,,,,嗜酸細(xì)胞,中性粒細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,DF2 -體積(V),傳導(dǎo)性(C),,,,,單核細(xì)胞

6、,淋巴細(xì)胞,中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞,十余種異常細(xì)胞的報(bào)警提示,VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn),接近原態(tài)的白細(xì)胞分析一個(gè)分類試劑包增強(qiáng)型流式通道，VCS直接、同時(shí)、三重檢測(cè)分析細(xì)胞的視角與手工相似真正的三維檢測(cè)VCS，匯集最全面的物理檢測(cè)工具三維分析的高分辨率 (256 ? 256 ? 256)白細(xì)胞五項(xiàng)分類10多種異常細(xì)胞的檢測(cè),,VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn),流體動(dòng)力聚焦 統(tǒng)計(jì)8000多個(gè)白細(xì)胞分類結(jié)果與手工的相

7、關(guān)性好流式通道還可檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞被世界上最多實(shí)驗(yàn)室采用的五分類原理,,,,,,,,,IntelliKineticsTM（智能調(diào)控) & AccuGateTM（精確定位）,兩種新技術(shù)令報(bào)警的假陽(yáng)性和假陰性減少到前所未有的水平,VCS三維技術(shù)的優(yōu)化,,,,,專利的IntelliKinetics? 技術(shù),對(duì)標(biāo)本在測(cè)量前的預(yù)處理作最適化控制根據(jù)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度，控制儀器內(nèi)細(xì)胞與試劑的反應(yīng)溫度試劑加入量試劑與細(xì)胞的反應(yīng)時(shí)

8、間從流式通道獲取數(shù)據(jù)的時(shí)間,先進(jìn)的標(biāo)本預(yù)處理技術(shù),,,,,專利的 AccuGate? 定位技術(shù),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,AccuGate? 定位技術(shù),真正的三維分析全周邊限定細(xì)胞亞群對(duì)細(xì)胞特征進(jìn)行實(shí)時(shí)刻劃每個(gè)細(xì)胞亞群都獨(dú)立定義清晰的細(xì)胞亞群分界超凡的懷疑性報(bào)警靈敏度和特異性標(biāo)本具48小時(shí)的分類穩(wěn)定性。,,,,,,以嶄新方式展示白細(xì)胞分類數(shù)據(jù),從一個(gè)分類點(diǎn)圖上了解更多信息,轉(zhuǎn)動(dòng) – 從任意角度觀察,根據(jù)需要隱藏

9、/顯示細(xì)胞亞群,,,,,AccuGate? 定位技術(shù),增加新的懷疑性報(bào)警提示懷疑有中性、淋巴、或單核系原母細(xì)胞分辨不同細(xì)胞系的原母細(xì)胞 衰老標(biāo)本低細(xì)胞數(shù)量標(biāo)本(絕對(duì)值),,,,報(bào)警語(yǔ)更為準(zhǔn)確和精確,經(jīng)典的庫(kù)爾特專利技術(shù) 。---蠕動(dòng)搖床 .,全自動(dòng)90度搖勻吸樣前自動(dòng)設(shè)置初始化編號(hào)唯一具備樣本識(shí)別無(wú)錯(cuò)管理,256 X 256 X 256,,,,,,,,,淋巴,單核,嗜酸,中性,充滿信心的最低人工復(fù)檢率,獨(dú)有的非線性分類方

10、式柔變輪廓細(xì)胞亞群多維參數(shù)的精確演算原始細(xì)胞的特征描述精確的報(bào)警,Coulter® HmXTM非線性柔變輪廓分類(AccuGate) .,對(duì)異常標(biāo)本最精確的檢測(cè)及結(jié)果報(bào)告對(duì)重疊及被掩蓋的群落進(jìn)行精確分類激發(fā)軟件對(duì)分類結(jié)果異常的樣本進(jìn)行進(jìn)一步分析超凡的懷疑性報(bào)警靈敏度和特異性標(biāo)本具有更好的分類穩(wěn)定性增加新的懷疑性報(bào)警提示大大降低假陽(yáng)性率和假陰性率,Coulter® HmXTM非線性柔變輪廓分類(

11、AccuGate) .,Coulter® HmXTM智能動(dòng)力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,,在任何一種血細(xì)胞分析儀的分析過(guò)程中， 細(xì)胞與試劑之間的反應(yīng)過(guò)程都對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確度起到至關(guān)重要的作用。細(xì)胞和溶血?jiǎng)┑姆磻?yīng)（物理法）細(xì)胞和染色劑的反應(yīng)（化學(xué)法）,?根據(jù)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件，調(diào)整： ?加入試劑的溫度 ?加入試劑的量 ?試劑與細(xì)胞的反應(yīng)時(shí)間（從流式通道獲取數(shù)據(jù)的時(shí)間）?屏蔽分析環(huán)

12、境的內(nèi)、外源噪音,Coulter® LH 755TM智能動(dòng)力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,消除實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)結(jié)果的影響保證在不破壞白細(xì)胞的前提下,完全溶解紅細(xì)胞保證白細(xì)胞恢復(fù)原態(tài)更精確的結(jié)果，降低復(fù)檢率整體提高實(shí)驗(yàn)室工作效率,Coulter® LH 755TM智能動(dòng)力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,1. 試劑溫度,2. 試劑量,3. 反應(yīng)時(shí)間,,,優(yōu)秀，經(jīng)濟(jì)的幼稚細(xì)胞檢

13、測(cè),Coulter® HmXTM卓越的幼稚細(xì)胞報(bào)警功能,基于VCS技術(shù)，結(jié)合庫(kù)爾特非線性柔變輪廓分類技術(shù)，COULTER® HmX的研究隊(duì)伍根據(jù)國(guó)際行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在結(jié)果報(bào)告單中提供無(wú)與倫比的包括十余種幼稚細(xì)胞的準(zhǔn)確報(bào)警，與同類儀器相比， COULTER® HmX的幼稚細(xì)胞功能獨(dú)有如下優(yōu)點(diǎn)：基于多維參數(shù)基礎(chǔ)上，結(jié)合多種創(chuàng)新科技的準(zhǔn)確的、分系的幼稚細(xì)胞報(bào)警無(wú)需額外的試劑，降低實(shí)驗(yàn)室成本根據(jù)國(guó)際行業(yè)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，

14、只提供準(zhǔn)確的報(bào)警以供人工復(fù)檢參考,,,,,NE BlastsImm NE 2Imm NE 1,LY BlastsVariant LY,MO Blasts,NRBCs,,,,,,,,,Coulter® HmXTM卓越的幼稚細(xì)胞報(bào)警功能,有核紅細(xì)胞 單核系原始細(xì)胞淋巴系原始細(xì)胞粒系原始細(xì)胞不成熟粒細(xì)胞中性桿狀核細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞過(guò)度溶解的淋巴細(xì)胞血小板凝集團(tuán)和巨大血小板細(xì)胞寄生蟲(瘧原蟲等),Coul

15、ter® HmXTM卓越的幼稚細(xì)胞報(bào)警功能,有核紅細(xì)胞在HmX上的體現(xiàn).,VCS技術(shù)為基礎(chǔ)在散點(diǎn)圖上有單獨(dú)的群落報(bào)告方式符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)WBC分類不受影響，結(jié)果準(zhǔn)確最準(zhǔn)確的分類結(jié)果，最低的假陽(yáng)性率，假陰性率最低的成本無(wú)限擴(kuò)展性,有核紅細(xì)胞,,精敏調(diào)節(jié)系統(tǒng)AccuFlexTM,專利的AccuFlex®軟件技術(shù)可以讓您選擇每一項(xiàng)報(bào)警的靈敏度水平，由此來(lái)建立相應(yīng)的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)您的實(shí)驗(yàn)室而言，庫(kù)爾特VCS®

16、;技術(shù)平臺(tái)與AccuFlex®, AccuGate®, and Intellikenetics® 等技術(shù)的組合意味著將復(fù)檢率降低到前所未有的水平，同時(shí)也意味著以更高的效率完成更大的工作,網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是用作紅細(xì)胞產(chǎn)生或紅細(xì)胞生成的指標(biāo)，是診斷或監(jiān)測(cè)貧血治療最常用的臨床指標(biāo) 傳統(tǒng)的手工計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞的方法因其固有的不精確性，當(dāng)用做監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)時(shí)有一定的局限性，尤其是用在計(jì)數(shù)范圍的低限或高限時(shí)。涂片厚薄，染色深

17、淺，有限的細(xì)胞計(jì)數(shù)以及技師間的差異均會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的變異系數(shù)為25%到50%。 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量網(wǎng)織紅細(xì)胞不但大大提高了網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和精確性，還能提供一些反映網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度和大小的非傳統(tǒng)參數(shù)。臨床研究已經(jīng)開(kāi)始將這些非傳統(tǒng)參數(shù)應(yīng)用于許多貧血性疾病的診斷和治療,自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作更簡(jiǎn)便,試劑非熒光染料---新亞甲藍(lán)來(lái)沉淀網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的RNA。網(wǎng)織紅細(xì)胞染色是為了把網(wǎng)織紅細(xì)胞與

18、成熟紅細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。脫蛋白溶液(酸性、低滲)--- 在血液與新亞甲藍(lán)混勻孵育一段時(shí)間后加入將網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白除去，而保留著色的RNA。紅細(xì)胞腫脹成球形但不脹破,自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作更簡(jiǎn)便,方法：漂清本底后，以VCS技術(shù)在增強(qiáng)型流式通道內(nèi)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分析，即同時(shí)采用體積、傳導(dǎo)性和光散射三維分析來(lái)確定細(xì)胞并將其分類。V:直流電測(cè)量的體積確定細(xì)胞的大小。網(wǎng)織紅細(xì)胞的分析高度依

19、賴細(xì)胞的大小信息，根據(jù)定義，未成熟的紅細(xì)胞大于成熟的紅細(xì)胞。數(shù)據(jù)圖的y軸為體積C:傳導(dǎo)性或射頻測(cè)量提供細(xì)胞的內(nèi)部特性信息。數(shù)據(jù)圖的z軸為傳導(dǎo)性，它只能在旋轉(zhuǎn)的三維圖中才可看到S:細(xì)胞通過(guò)氦-氖激光束測(cè)得的光散射提供細(xì)胞表面特性和細(xì)胞顆粒特性的信息。網(wǎng)織紅細(xì)胞分析高度依賴光散射信息因?yàn)楹袣堄郣NA的紅細(xì)胞的光散射強(qiáng)于成熟紅細(xì)胞的光散射。數(shù)據(jù)圖的x軸為光散射,自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作

20、更簡(jiǎn)便,網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測(cè),網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟紅細(xì)胞,通常較成熟紅細(xì)胞稍大,其胞質(zhì)中尚殘存部分嗜堿性物質(zhì)(RNA,核糖體),經(jīng)堿性染料染色后可見(jiàn)深染的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),故名。右圖中標(biāo)記A、B、C的細(xì)胞分別代表不同成熟度的網(wǎng)織紅細(xì)胞的。,新亞甲藍(lán)-VCS檢測(cè)法,以經(jīng)典的超活染料新亞甲藍(lán)（NMB）著色網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)殘存的RNA。漂去除紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白(酸性試劑)在流式通道，運(yùn)用VCS三維技術(shù)，將網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)

21、胞、白細(xì)胞、血小板、和有核紅細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。,網(wǎng)織紅細(xì)胞的VCS三維分析,運(yùn)用VCS三維技術(shù)分析染色后的紅細(xì)胞。低頻波檢測(cè)細(xì)胞體積高頻波(阻光性)檢測(cè)細(xì)胞的內(nèi)部成分，可剔除非紅細(xì)胞顆粒激光散射將網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)(網(wǎng)織紅細(xì)胞胞漿含較 RNA 物質(zhì)，散射較多的激光，在散點(diǎn)圖上分布于紅細(xì)胞的右側(cè))。網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度越差,在散點(diǎn)圖上分布越靠右檢測(cè)與白細(xì)胞分類共享一個(gè)流式通道。,網(wǎng)織紅細(xì)胞VCS三維散點(diǎn)圖分析,,,網(wǎng)織紅細(xì)

22、胞,,,,,網(wǎng)織紅細(xì)胞亞群分辨,網(wǎng)織紅細(xì)胞高成熟度網(wǎng)織紅,成熟紅細(xì)胞,白細(xì)胞,,,,,,非紅細(xì)胞干擾,,低成熟度網(wǎng)織紅,網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)意義,參數(shù) 英文 正常參考網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比 RET% 0.5% - 2%

23、 2% - 6%網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值 RET# (25 – 75) ×109/L網(wǎng)織紅成熟度 IRF 0.2-0.4平均網(wǎng)織紅體積 MRV

24、100-125fl平均球形紅細(xì)胞體積 MSCV 84-100fl高散射網(wǎng)織紅百分比 HLR% 0.07%-0.7%高散射網(wǎng)織紅絕對(duì)值 HLR# (3 – 50) ×106/L,,,網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的臨床意義,IRF的臨床應(yīng)用未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞，也稱移動(dòng)或張力

25、細(xì)胞，正常情況下不足網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)的5%。未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞在大量的促紅細(xì)胞生成的刺激下會(huì)釋放到外周血中，如出血，某些貧血或?qū)Υ碳す撬柙煅委煹姆从?。IRF類似于中性粒細(xì)胞的核左移，能夠提供額外的紅細(xì)胞信息，這些信息可以縮短疾病從診斷到治療或單純的治療時(shí)間。IRF在其他方面的臨床應(yīng)用包括：監(jiān)測(cè)骨髓移植后干細(xì)胞再生情況監(jiān)測(cè)強(qiáng)度化療后骨髓再生情況監(jiān)測(cè)鐵、維生素B12和葉酸治療監(jiān)測(cè)毒性藥物對(duì)骨髓的影響通過(guò)促紅細(xì)胞生成監(jiān)測(cè)腎臟移植對(duì)

26、貧血進(jìn)行分類和評(píng)價(jià)監(jiān)測(cè)新生兒輸血檢測(cè)再障危象提高貧血的分類、診斷和治療,不同臨床疾病中IRF與網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的相互關(guān)系,IRF—網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù),IRF在骨髓移植病人中的作用，IRF通常先于中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)骨髓活性情況出現(xiàn)反應(yīng)。IRF的優(yōu)點(diǎn)在于它不象中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)那樣受臨床或亞臨床感染影響。骨髓移植后IRF升高到20%以上時(shí)表示紅系移植成功 IRF是骨髓移植成功最敏感的指標(biāo)，因?yàn)镮RF升高是當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室方法可測(cè)得的最早的

27、反應(yīng)指標(biāo)。腎移植后IRF是一個(gè)比網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)更敏感的早期指標(biāo),MSCV—平均球形細(xì)胞體積,網(wǎng)織紅細(xì)胞MSCV與CBC-MCV的關(guān)系是遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥的一個(gè)高度有效的指標(biāo)。Chiron等人評(píng)價(jià)了286份標(biāo)本CBC中的平均紅細(xì)胞體積（MCV）和MSCV的相關(guān)性。由于紅細(xì)胞的雙凹圓餅結(jié)構(gòu)，總的相關(guān)性顯示出一個(gè)MSCV的正向偏差。然而48例MSCV小于MCV的標(biāo)本有一群不明的細(xì)胞亞群。這一亞群包括來(lái)自遺傳性球形紅細(xì)胞增多（H