對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析

1、第八章　對氨基苯甲酸酯類和酰苯胺類局麻藥物的分析,1,第一節(jié) 對氨基苯甲酸酯類和酰苯胺類藥物的結構與性質,2,,對氨基苯甲酸酯類藥物基本結構與典型藥物特點：,代表藥物有：,3,,,,鹽酸普魯卡因,苯佐卡因,鹽酸丁卡因,結構特點：,4,,苯胺?；苌铮０坊徫换驅ξ挥腥〈?。,,二、酰苯胺類藥物基本結構與典型藥物,,代表藥物有：,5,,,鹽酸利多卡因,鹽酸布比卡因,三、主要理化性質：,6,1.  芳伯氨基特性：具有芳伯氨基

2、，可發(fā)生重氮化—偶合反應；可與芳醛發(fā)生縮合反應，易氧化變色。,2.  酯鍵水解特性：具有酯鍵，易發(fā)生水解。水解的快慢受光線、溫度或堿性條件影響。,3. 弱堿性：脂烴胺側鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性；可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應；可在非水溶劑中被滴定4. 與重金屬離子反應：酰胺氮原子與銅離子、鈷離子配位形成有色沉淀。5. 吸收光譜特性：紫外吸收、紅外吸收,第二節(jié)、鑒別試驗一、重氮化-偶合反應 具有芳伯氨基藥物，如鹽

3、酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應，再與堿性?-萘酚偶合產(chǎn)生紅色偶氮化合物。,7,8,橙紅色沉淀,鹽酸丁卡因（芳香第二胺結構）與NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀，可與芳伯胺基的同類藥物區(qū)別。,9,10,,,與銅離子的反應,與鈷鹽反應,二、與金屬離子的反應 具有烴胺側鏈，與生物堿沉淀劑反應，根據(jù)沉淀顏色或測定沉淀熔點進行鑒別。,11,鹽酸普魯卡因胺的鑒別反應-羥肟酸鐵的反應,12,,具有芳酰胺結構，被H

4、2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。如鹽酸普魯卡因胺。,具有酰胺結構的藥物,羥肟酸,羥肟酸鐵,13,三、水解產(chǎn)物反應,鹽酸普魯卡因的鑒別,14,,苯佐卡因的水解反應,15,,,四、制備衍生物測熔點,三硝基苯酚衍生物,16,鹽酸利多卡因 ChP（2010）[鑒別] 取本品0.2g，加水20ml溶解。取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌后，干

5、燥，依法測定，熔點為228～232℃，熔融時同時分解。,17,,利多卡因和布比卡因,硫氰酸鹽衍生物,鹽酸丁卡因 ChP（2010） [鑒別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結晶；濾過，結晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測定（附錄ⅥC），熔點約為131℃。,18,,五、吸收光譜特性,1.紫外吸收光譜鹽酸布比卡因 [鑒別]（2）取本品，精密稱定，按干燥品計算，加

6、0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在263nm與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.53－0.58與0.43－0.48。,19,2.紅外吸收光譜法,20,利用化合物結構中特殊基團的振動和轉動等紅外活性振動產(chǎn)生的紅外吸收峰對藥物進行鑒別的方法。,基本原理：在流動相總加入與呈解離狀態(tài)的待測組分離子電荷相反的離子對試劑，兩者形成中性離子對化合物，增加了被測樣品組分在固定相中

7、的溶解度，使被測組分的分配系數(shù)增大，達到樣品組分分離測定的目的。 反相離子對色譜：分析酸類或帶負電荷的藥物時，常用季胺鹽如四丁基銨作離子對試劑，分析堿類或帶正電荷的藥物時，常用磺酸鹽類如庚烷磺酸鹽和烷基硫酸鹽類如十二烷基硫酸鹽等。,反相離子對高效液相色譜法,第三節(jié)、特殊雜質與檢查一、鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查：離子對HPLC法,離子對的濃度：是控制反相離子對色譜溶質保留值的主要因素，通常對離子的濃度為3?20mmol/L。

8、 流動相pH的選擇：調解流動相的pH值可在較大范圍內，改變弱酸或弱堿樣品的保留值和分離選擇性。通常測定酸性物質時調至pH7?7.5；測定堿性藥物時調至pH3?3.5。,影響離子對形成的因素：反離子種類、濃度、流動相的組成、pH及離子強度,二、鹽酸普魯卡因注射液中有關物質和光解產(chǎn)物的檢查：LC-MS法三、鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其它雜質的檢查：HPLC法四、鹽酸羅哌卡因的光學純度檢查：HPCE,23,第四節(jié)、含量測定

9、一、亞硝酸鈉滴定法1.  原理 具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進行測定。,24,25,,,,處理后亞硝酸鈉滴定測定含量一般較少采用,2.  操作中的主要條件滴定反應特點：重氮化反應屬于分子反應滴定液NaNO2及反應生成的重氮鹽都不穩(wěn)定反應速度受多種因素影響：溫度、速度等,

10、26,,第一步反應速度比較慢，而后兩步反應速度則比較快。,27,,（1）加入溴化鉀加快反應速度,重氮化反應機制：,加入KBr（催化劑），HBr與HNO2反應，可生成大量NOBr，加快反應速度。,28,,,,K1比K2大300倍,（2）加過量鹽酸加速反應 理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶1mol 實際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5?6mol,29,原因： 強酸性可加速反應 重氮鹽在酸性下穩(wěn)定 酸性下避免副反應發(fā)生。,如鹽酸

11、濃度太大，會使游離芳伯氨的量減?。ǔ甥}），而影響重氮化反應速度，使反應速度減慢。,30,如酸度不足則沒反應的芳胺與生成的重氮鹽產(chǎn)生偶氮氨基化合物，而影響測定結果。,（3）反應溫度 一般，溫度升高反應速度加快。但重氮化反應所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結果。所以，重氮化反應應在低溫條件下進行。,31,（4）滴定速度 重氮化反應屬分子反應，反應速度比

12、較慢，滴定速度不能過快。 尤其是近終點時，更要慢慢地滴定。近終點時，游離芳伯胺濃度非常低，反應速度更慢。所以，每加一滴滴定液，要攪拌1?5分鐘后再判斷終點。,32,中國藥典規(guī)定：在30?C以下，把滴定管尖端插入液面下2/3處進行滴定。在滴定時一邊攪拌一邊加入大部分標準溶液。,33,到近終點時把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點。,標準溶液在液面下加入，可避免HNO2揮發(fā)。,3.  指示終點的方法 重氮化滴

13、定法指示終點的方法有: 永停法 電位法 外指示劑法 內指示劑法,34,,我國藥典主要采用永停滴定法指示終點,35,(1) 永停滴定法 溶液 檢流計 終點前： 無過量 無電流 HNO2 終點時：有過量 有電流（使指針偏離零

14、 HNO2 永停在某一位置） (2) 外指示劑法 用KI-淀粉指示劑 指示終點的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O,,,,,,,,,二、非水溶液滴定法 脂烴胺側鏈

15、，具弱堿性,可非水滴定測定含量,三、紫外分光光度法 對乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。,36,四、HPLC法 對乙酰氨基酚泡騰片、注射劑 可同時測定藥物及其降解產(chǎn)物；外標法定量,第五節(jié) 體內藥物分析 高效毛細管電泳法測定血漿中普魯卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因。,37,38,,高效毛細管電泳測定幾種局麻藥,電泳分析條件：