革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌2015

1、江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,《獸醫(yī)微生物學》講議十一,鄔向東預(yù)防獸醫(yī)學教研組二O一五年三月一日,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,第十章 革蘭氏陰性兼性厭氧桿菌,包括腸桿菌科、弧菌科、巴氏桿菌科的細菌，是與獸醫(yī)相關(guān)重要的病原菌，其中弧菌以水產(chǎn)動物為主，這里主要介紹家畜家禽相關(guān)病原菌。第一節(jié) 腸桿菌科第二節(jié) 巴氏桿菌科二 曼氏桿菌屬三 里氏桿菌

2、屬四 放線桿菌屬五 嗜血桿菌屬,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,第一節(jié) 腸桿菌科,據(jù)生化反應(yīng)、血清學試驗、DNA同源性等，可將本科分為28個屬，至少110個菌種。對屬內(nèi)各菌種或菌型的鑒定，除按生化特性區(qū)別外，有時可根據(jù)致病性、抗原結(jié)構(gòu)、對某些噬菌體的敏感性等項來決定。對埃希氏菌、沙門氏菌屬等各菌株的鑒定，常用血清凝集反應(yīng)來分型，不一定用菌種名，而稱血清型。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院

3、鄔向東 17707093313,腸桿菌科細菌共同特征,（一）形態(tài)和培養(yǎng)G－桿菌，菌體兩端鈍圓，中等大小，約0.5×3.0?m，無芽胞，有周身鞭毛，能運動，部分菌有莢膜，多數(shù)有菌毛。需氧或兼性厭氧。普通培養(yǎng)基上生長良好，形成中等大小光滑型菌落。液體培養(yǎng)呈均勻混濁。 （二）生化反應(yīng)生化反應(yīng)活潑，不同菌種分解糖、蛋白的能力不同，形成產(chǎn)物不同，以此可作菌種鑒定。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 1770709331

4、3,腸桿菌科細菌共同特征,（三）抵抗力對熱抵抗力不強，濕熱60?C、30min可殺滅；對低溫有耐受；對一般消毒劑、抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥株；有些菌耐膽鹽和抵抗染料的抑菌作用。 （四）抗原構(gòu)造腸道桿菌抗原構(gòu)造較為復(fù)雜，主要有O抗原、H抗原、莢膜或K抗原及菌毛抗原等，均可用血清學反應(yīng)檢出。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,腸桿菌科細菌共同特征,（五）致病因子主要有菌毛或菌毛樣結(jié)構(gòu)、莢膜或微莢膜、外

5、膜、內(nèi)毒素、外毒素及載鐵體（siderophore）等。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,第一節(jié) 腸桿菌科,目錄一、埃希氏菌屬二、沙門氏菌屬三、變形桿菌屬四、腸桿菌屬,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,一、埃希氏菌屬,埃希菌屬（Escherichia）包括5個種，血清型眾多，多不致病，臨床以大腸埃希氏菌最為常見。大腸埃希菌（E. coli）俗稱大腸桿菌，大腸

6、桿菌的多少是衛(wèi)生檢驗指標之一。部分菌為致病菌，可引起多種幼畜感染。也是最常用分子生物學的實驗材料。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）形態(tài)染色,G－短桿菌，有鞭毛，能運動，具有周身鞭毛，無莢膜。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）形態(tài)染色,右圖：光學顯微鏡下大腸桿菌形態(tài)。,右圖：電子顯微鏡下大腸桿菌形態(tài)（偽著色）。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東

7、17707093313,（二）培養(yǎng)及生化反應(yīng),普通培養(yǎng)基上形成中等大小光滑型菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上形成紅色菌落；在SS培養(yǎng)基上形成孤立紅色菌落；,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,在EMB上形成黑色帶金屬光澤閃光的菌落,大腸桿菌在伊紅美蘭培養(yǎng)基上,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,在血平板上有?-溶血,大腸桿菌在血液培養(yǎng)基上（有溶血環(huán)）,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學

8、技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,生化反應(yīng)活潑,對葡萄糖、乳糖、麥芽糖等產(chǎn)酸產(chǎn)氣靛基質(zhì)（吲哚）試驗陽性、甲基紅（M-R）試驗陽性、V-P試驗陰性、檸檬酸鹽利用試驗陰性，不產(chǎn)生H2S，尿素酶試驗陰性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（三）抵抗力,在土、水中可生存數(shù)月；在含余氯的水中不能生存；膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有明顯的抑菌作用；氯霉素、慶大霉素對其敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。

9、 （四）抗原構(gòu)造主要有O、H、K及菌毛抗原：O抗原有173種；K抗原有105種；H抗原有56種。例如：O157:K15:H16 。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（五）致病性,不同血清型的大腸桿菌常使不同各類動物發(fā)病，也有好幾種血清型能對多種動物致病。引起人、畜腸道感染的大腸桿菌可分成：腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）腸致病性大腸桿菌（EPEC）腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）

10、腸出血性大腸桿菌（EHEC）腸粘附性大腸桿菌（EAEC）。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,1、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(Enterotoxigenic E.coli，ETEC),(1) 產(chǎn)生外毒素——腸毒素。包括不耐熱腸毒素(LT)和耐熱腸毒素(ST)。(2) 粘著素抗原：主要有F4(K88)、F5(K99)、F6(987P)、F41等四種粘著素抗原，可增強細菌的致病。如仔豬黃痢。(3) 外毒素：神經(jīng)

11、毒素(neurotoxin)：可致腸毒血癥，引起水腫與神經(jīng)癥狀。如仔豬水腫病。ETEC型菌株均可能對仔豬、犢、駒和羔羊致病。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,大腸桿菌患病情況,,仔豬黃白痢,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,大腸桿菌患病情況,仔豬黃白痢,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,大腸桿菌病畜情況,仔豬水腫病,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技

12、術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（五）致病性,2、腸致病性大腸桿菌（enteropathogenic E. coli. ，EPEC）：為發(fā)展中國家嬰兒腹瀉的重要病原。3、腸侵襲性大腸桿菌（enteroinvasive E. coli. , EIEC）：粘膜和潰瘍。亦可引起豚鼠角膜結(jié)膜炎(Sereny test )。4、腸出血性大腸桿菌（enterohemorrhagic E. coli. ， EHEC）：出血性結(jié)腸炎。

13、5、腸凝聚性大腸桿菌（enteroaggregative E. coli. , EAggEC）：兒童持續(xù)性腹瀉的病因之一。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,畜禽致病大腸桿菌的分離與鑒定程序,（六）微生物學檢查法,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（七）免疫,1、自家菌苗免疫；（仔豬E.coli.苗可用在母豬產(chǎn)仔前1月、半月分別免疫兩次，據(jù)說免疫效果較好。）2、ST、L

14、T及F4（K88）、F5(K99)、F6(987P)、F41共同制備菌苗免疫；3、基因工種菌免疫。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,二、沙門氏菌屬,Salmonella的細菌種類繁多，迄今為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了2500個以上的血清型。它們主要寄生于人類及各種溫血動物腸道，可引起各種性質(zhì)的疾病。這些由沙門菌引起的疾病統(tǒng)稱為沙門菌病(salmonellosis)。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東

15、17707093313,二、沙門氏菌屬,（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng)染色：G－桿菌，除雞傷寒與雞白痢沙門氏菌外，其余都有周鞭毛和菌毛。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,沙門氏菌的革蘭色染色鞭毛染色,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,沙門氏菌在不同培養(yǎng)基上生長性狀,沙門氏菌在麥康凱培養(yǎng)基上生長性狀。沙門氏菌在HEK培養(yǎng)基上形成黑色菌落,江西農(nóng)業(yè)大學動物

16、科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng),培養(yǎng)：營養(yǎng)要求不高，（有雞白痢沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌、豬傷寒沙門氏菌、羊流產(chǎn)和甲型副傷寒沙門氏菌等菌型在普通培養(yǎng)基上生長貧瘠，形成細小的菌落）在普通培養(yǎng)基上形成中等大小、半透明菌落，不分解乳糖，在腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基上形成不著色菌落。沙門氏菌屬各菌的生化反應(yīng)較有規(guī)律性，對細菌有重要價值。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,

17、（一）形態(tài)染色、培養(yǎng)和生化反應(yīng),大腸桿菌與沙門氏菌的生化反應(yīng)對照,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）抗原構(gòu)造及分類,分類比較復(fù)雜，有O、H、Vi及菌毛等重要抗原。O、H是用于分型的基本抗原。1、O抗原：為細菌菌體抗原，即脂多糖；O抗原有許多組成成分，分別以1、2、3、4……等數(shù)字表示。每種細菌常帶有數(shù)種O抗原；不同種的細菌可有共同的O抗原。將具有共同抗原的沙門氏菌歸為一組，用A、B、C、D…

18、…表示，繼Z之后，則用阿拉伯數(shù)字O51-O67表示。對溫血動物致病的血清型大多數(shù)都在A-E組。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）抗原構(gòu)造及分類,2、H抗原為鞭毛蛋白，性質(zhì)不穩(wěn)定，濕熱60?C、15min酒精處理即被破壞。沙門氏菌H抗原有兩種，稱第一相和第二相。前者為特異相，用a、b、c……z以后用z1、z2、z3……表示；后者為非特異相，用1、2、3、……表示。具有兩種相抗原的細菌叫雙相菌

19、、僅有某一相者稱為單相菌。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）抗原構(gòu)造及分類,3、Vi抗原成分為不耐熱的聚－N-乙酰D－半乳糖胺醛酸。有抗吞噬作用，并保護菌體不受抗體和補體作用。初次分離的傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌有Vi抗原。具有Vi抗原的細菌可用Vi噬菌體分型。目前傷寒沙門氏菌的Vi噬菌體型已超過100個。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（三）抵

20、抗力,在水中能存活2-3周，糞便中可活1-2個月，在冰凍土壤中可過冬。對熱耐力差，濕熱65?C經(jīng)15-20min即被殺死。5％石炭酸或1:500升汞中5分鐘殺死。膽鹽、煌綠及其它染料對沙門氏菌的抑制作用較其它腸道菌小，故可用此染料制選擇培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（四）變異,1、H－O變異；2、S－R變異；3、V－W變異；（帶有ViAg為V菌株；丟失ViAg的為W菌株。）

21、4、位相變異。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（五）致病性,本屬桿菌均有致病性，它們通常侵害幼年動物，發(fā)生急性敗血癥、胃腸炎以及其它局部炎癥。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,雛雞白痢,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（五）致病性,據(jù)其對寄主的嗜好不同，可分兩種不同類型：1、對寄主有專嗜性――它們只對某一種類的寄主產(chǎn)生一定的疾病。（

22、很少）2、具有廣泛寄主范圍的――能在類以及多種畜禽中致病。（占大多數(shù)）,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（六）微生物學診斷,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,三、變形桿菌屬(Proteus),其代表菌種為普通變形桿菌（P. vulgaris）奇異變形桿菌（P. mirabills）。為廣泛分布于自然界的腐生菌，偶爾可致病。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 1

23、7707093313,（一）生物學性狀,G－桿菌，呈卵圓形或長絲狀等多形性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）生物學性狀,不形成莢膜、有鞭毛，運動活潑，有菌毛。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）生物學性狀,在濕潤的固體培養(yǎng)基上呈擴散生長，于瓊脂表面形成一層波紋狀薄膜，稱遷徙生長現(xiàn)象(Swarming growth)。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東

24、 17707093313,（一）生物學性狀,本菌常為污染菌，以3％-4％瓊脂培養(yǎng)可獲得孤立菌落。本菌能分解葡萄糖，不發(fā)酵乳糖。能迅速分解尿素在鑒別是有參考價值。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）致病性,偶爾致牛、綿羊、山羊、犬等的幼畜腹瀉，間或致成年家畜腹瀉或犬的外耳炎，偶爾致人的下痢或食物中毒，在人的泌尿系統(tǒng)或傷口中可成為繼發(fā)感染菌。在自然界中，對有機物分解有重要作用，在實驗室常以污染菌出

25、現(xiàn)。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,四、腸桿菌屬（Enterobacter）,腸桿菌即產(chǎn)氣桿菌。多分布于土壤和污水中。本屬有兩個主要種：陰溝腸桿菌(Ent. cloaca)和產(chǎn)氣腸桿菌(Ent. aerogenes)，兩者均不致病，偶爾出現(xiàn)于膿液或病灶組織中。本屬菌為G－桿菌，可利用檸檬酸鹽為唯一碳源，37?C可分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，44.5?C分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不利用衛(wèi)矛醇，V－P試驗陽性

26、、M-R試驗陰性，可緩慢液化明膠，不產(chǎn)生H2S、無鞭毛，無運動性。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,第二節(jié) 巴氏桿菌科,Pasteurella是以法國微生物學家巴斯德的姓所命名的一類桿菌，它是引起多種動物和人類疾病的病原菌。本屬菌在分類學上屬巴氏桿菌科，巴氏桿菌屬與嗜血桿菌屬、放線菌屬一起作為巴氏桿菌科的成員，現(xiàn)新建立了曼氏桿菌屬、里氏桿菌屬等等。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 177

27、07093313,一、巴氏桿菌屬（Pasteurella）,菌屬的共同特征：卵圓形或短桿狀的G－菌；病料中呈兩極染色；不運動，不產(chǎn)生芽胞；需氧或兼性厭氧；分解糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不凝固牛乳；不液化明膠；氧化酶陽性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,多殺性巴氏桿菌（P. multocida ),本屬細菌已有20多種，其中以多殺性巴氏桿菌最為重要，是多種畜禽的致病菌。多殺性巴氏桿菌是引起多種畜禽巴氏桿菌病的病原

28、。1994年第九版《伯吉氏細菌鑒定手冊》列有3個亞種，即多殺亞種（P. multocida subspl. multicida）、敗血亞種（P. multocida subspl. septica）及殺禽亞種（P. multocida subspl. gallicida）。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,多殺性巴氏桿菌（P. multocida ),本菌為主要可致動物的出血性敗血癥和傳染性肺炎。是牛

29、、羊、馬、兔的出敗，豬肺疫、禽霍亂等疾病的病原。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）形態(tài)染色,球桿狀或短桿狀，小桿菌。單在或雙排列。病料涂片呈兩極著色。新分離的強毒株有莢膜。G－。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）培養(yǎng)及生化,需氧或兼性厭氧。營養(yǎng)要求嚴格。在血液培養(yǎng)瓊脂上形成無溶血環(huán)，濕潤、水滴樣小菌落。血清肉湯：呈輕度渾濁，培養(yǎng)延長到4－6天，

30、則變清，沉淀物粘稠沉于底部，表面有菌環(huán)。在血清平板上培養(yǎng)24小時，形成淡灰白、邊緣整齊、表面光滑、閃光的露珠狀菌落。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）培養(yǎng)及生化,生化反應(yīng)：可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露醇、單奶糖等；一般不利用乳糖、鼠李糖、楊苷、山梨醇、肌醇、菊糖、側(cè)金盞花醇等；Fo型分解伯膠糖不分解木膠糖；Fg型分解木膠糖而不分解伯膠糖。吲哚試驗陽性，過氧化氫酶陽性，M-R試驗陰性，V-

31、P試驗陰性、不產(chǎn)生H2S，不利用明膠。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（三）血清型,Carter根據(jù)K抗原將其分為A、B、D、E 6群；波岡、村田則根據(jù)O抗原將其分為16個型。將K、O二種抗原相結(jié)合，共組成22種血清型。我國分離的禽多殺性巴氏桿菌以5：A為多，其次為8：A；豬的以5：A和6：B為主，8：A和2：D其次；羊的以6：B為多；家兔以7：A為主，其次是5：A。C型為犬、貓的正常棲居

32、菌，F(xiàn)型主要發(fā)現(xiàn)于火雞，致病作用不明。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（四）抵抗力,抵抗力不強：干燥空氣中，2-3天死亡；60?C 20min，75?C 5-10min可被殺死。在血液內(nèi)保持毒力6－10天；冷水中能保持活力達2周，廄肥中可生存一個月。本菌易自溶：在無菌蒸餾水中或生理鹽水中迅速死亡。對消毒劑敏感：3％石炭酸，千倍升汞1min可殺滅，2％來蘇兒、福爾馬林等幾分鐘就可殺滅。,江西

33、農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（五）致病性,雞、鴨、鵝――禽霍亂；豬――豬肺疫；牛、兔、羊、馬等――出敗。實驗動物中，以鴿對禽源巴氏桿菌最易感染，小鼠、家兔也易感。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,禽霍亂,雞冠和肉髯變青紫色，有的病雞肉髯腫脹，有熱痛感。胃腸出血。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（六）微生物學診斷,1、鏡 檢

34、：采集標本（滲出液、心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等）涂片、染色（瑞氏染色或美蘭染色）、鏡檢 兩極著色小桿菌。2、分離培養(yǎng)：血平板接種、溶血情況、菌落形態(tài)、生化鑒定3、動物試驗：實驗動物（小鼠、鴿、兔等）接種，24－48小時后，死亡、剖檢、重新做鏡檢和細菌分離以鑒定細菌。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（七）免疫和治療,1、免疫：弱毒活菌苗、氫氧化鋁死菌苗、高免血清等。2、治療：抗生素。,,江

35、西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,二、曼氏桿菌屬（Mannheimia）,1999年Angen等根據(jù)DNA雜交及16S rRNA序列的實驗結(jié)果，建議建立這個新屬，至少有7個種，其中5種已經(jīng)定名，代表菌種為溶血性曼氏桿菌（M. haemolytica）。 溶血性曼氏桿菌(M. haemolytica)危害：牛羊肺炎，新生羔羊敗血癥。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 1770709331

36、3,溶血性曼氏桿菌(M. haemolytica),生物學特征：G－短桿菌，有呈多形性，無運動性，兩極著色，莢膜有時看不到。營養(yǎng)要求同多殺性巴氏桿菌。固體培養(yǎng)上，呈圓形、光滑、濕潤、帶熒光。血平板上溶血明顯，多次傳代后溶血性可消失。在羔羊血瓊脂上可生成雙溶血環(huán)（內(nèi)?、外?），在麥康凱平板上，生長緩慢，長成紅色菌落。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,溶血性曼氏桿菌(M. haemolytica),本

37、菌可分解葡萄糖、麥芽糖、肌醇、棉子糖、淀粉和乳糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不分解側(cè)金盞花醇、赤蘚醇和菊糖；對衛(wèi)矛醇、甘油、鼠李糖發(fā)酵不定。本菌吲哚試驗、尿素利用試驗、明膠試驗均為陰性；紫乳變酸且凝固。本菌按其生化反應(yīng)和致病性可分為A和T兩個生物型（Biotypes），又按其莢膜抗原用間接血凝反應(yīng)可區(qū)分為12個血清型(serotypes)。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,三、里氏桿菌屬（Riemerella）,

38、鴨疫里氏桿菌是本屬的代表種，原名鴨疫巴氏桿菌。1991年Rossau等和Segers等先后證實，該菌與巴氏桿菌的rRNA不同源，建議并得到認可，建立了里氏桿菌新屬，具體歸屬哪科還未定。鴨疫里氏桿菌（R. anatipestifer）鴨疫里氏桿菌是雛鴨傳染性漿膜炎的病原，可引起1~8周齡、尤其是2~3周齡雛鴨大批發(fā)病死亡，生長發(fā)育受阻等。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,1、形態(tài)及染色,菌體呈桿狀或橢

39、圓形，大小0.3~0.5um×0.7~6.5 um，偶見長絲狀，長11~24um。多為單個，少數(shù)成雙或短鏈狀排列?？尚纬汕v膜，無芽胞，無鞭毛。瑞氏染色可見兩極著色。革蘭氏染色陰性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,2、培養(yǎng)及生化特性-培養(yǎng),本菌營養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長。初次分離培養(yǎng)需要5%~10%的CO2。在巧克力或胰蛋白胨大豆蛋胨瓊脂（TSA）平板上，CO2培

40、養(yǎng)箱或蠟燭缸中，37℃培養(yǎng)24~48h，生長的菌落無色素，呈圓形、微突起、表面光滑、奶油樣，直徑1~2mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉湯中，37℃48h培養(yǎng)，呈上下一致輕微渾濁，管底有少量沉淀。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,2、培養(yǎng)及生化特性-生化特征,本菌不發(fā)酵葡萄糖、蔗糖，可與多殺性巴氏桿菌區(qū)別。也不發(fā)酵半乳糖、乳糖、果糖、木糖、蕈糖、甘露醇、山梨醇、甘露糖和棉實糖。極少數(shù)菌株發(fā)酵麥牙糖或肌

41、醇。靛基質(zhì)、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用、V-P試驗、M-R試驗、硫化氫產(chǎn)生、尿素分解等均為陰性。氧化酶、觸酶試驗為陽性。多不溶血，多液化明膠，G+C多為35mol%。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,3、血清型,目前比較復(fù)雜，1991年Sandhu等其統(tǒng)一并為19個型，以阿拉伯數(shù)字定名，1995年泰國發(fā)現(xiàn)20、21型。我國以1型為主。 4、抵抗力本菌抵抗力不

42、強。鮮血培養(yǎng)基上置4℃冰箱保存容易死亡，通常4~5d要傳代一次。對多種抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,5、致病性與免疫性,本菌可引起鴨傳染性漿膜炎，雞、鵝、火雞及野生水禽也可發(fā)生。兔和小鼠不易感。本菌具有較好的免疫原性，可制備滅活菌苗免疫，效果尚可。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,6、微生物學診斷,取發(fā)病初期病鴨腦及心血，用巧克力培養(yǎng)基

43、容易分離到本菌。肝、脾分離率低。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,四、放線桿菌屬(Actinobacillus),對家畜有致病性的有：豬胸膜肺炎放線桿菌（A. pleuropneumoniae, APP）。林氏放線桿菌（A. ligniersii）；駒放線桿菌(A. equuli)；,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌（APP）,本菌

44、原為豬胸膜肺炎嗜血桿菌(Haemophilus pleuropneumoniae)或副溶血嗜血桿菌(H. Parahaemolyticus)，但經(jīng)DNA雜交試驗表明，本菌與林氏放線菌有很高的同源性，因此在1983年起改為現(xiàn)名。本菌可引起豬傳染性胸膜肺炎，是集約豬場常見的傳染病之一。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,1、形態(tài)染色小球桿菌，具多形態(tài)，新鮮病料呈兩極染色，有

45、莢膜和鞭毛，具運動性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,2、培養(yǎng)兼性厭氧，置10%CO2中可長出黏液型菌落。生長溫度：37℃。普通培養(yǎng)基上不長，需添加V因子，常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)。在綿羊血平板上，可產(chǎn)生穩(wěn)定的溶血，金黃色葡萄球菌可增強其溶血圈（CAMP試驗+）,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,3、抗

46、原性根據(jù)其莢膜多糖及LPS的抗原性差異，將本菌分為15個血清型，其中1型和5型又分1a、1b及5a、5b兩亞型。根據(jù)對NAD I的依賴性，又可分為：生物I型：依賴NDA I，包括1~12、15血清型；生物II型：不依賴NDA II，包括13、14血清型。毒力：1、5、9、11型最強，3、6型毒力較低。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,4、致病性與免疫性豬是本菌

47、高度專一的宿主，寄生在豬肺壞死灶內(nèi)或扁桃體，較少在鼻腔。慢性感染豬或康復(fù)豬為帶菌者。小于6月齡仔豬最易感。毒素是本菌最重要的毒力因子，不同血清型的菌株可產(chǎn)生細胞毒素：Apx，是一種穿孔素，有Apx I、ApxII、Apx III和Apx IV四種。Apx IV存在于所有血清型中。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,人工感染APP在19h死亡口中流出血樣滲出物。,江西農(nóng)業(yè)

48、大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,肺充血水腫，有纖維素性滲出物,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,整個肺表面纖維素性滲出物與胸膜中隔膜發(fā)生粘連,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,5、微生物學診斷取病死豬肺壞死組織、胸水、鼻及氣管滲出物做涂片，顯微鏡檢查兩

49、極著色球桿菌。確診：取上述病料接種巧克力培養(yǎng)基或綿羊血瓊脂，置5%CO2 37℃培養(yǎng)過夜。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（一）豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌,如有可疑菌落，進一步做CAMP試驗，檢查其脲酶活性及甘露醇發(fā)醇能力。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）林氏放線桿菌（A. ligniersii）,為牛木舌病的病原體，此菌還可侵害豬、羊，引起頭頸部軟組織膿瘍。

50、1、形態(tài)與染色桿菌，G－，多形性：在血清、血瓊脂上呈球桿狀，大小為1.5×0.4um；在含葡萄糖、麥芽糖瓊脂上呈長桿菌；在肉湯中呈鏈狀、菌絲狀。無運動性，無芽胞，無莢膜。石炭酸復(fù)紅染色最好，有兩極著染傾向。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）林氏放線桿菌,2、培養(yǎng)及生化特性需氧或兼性厭氧；在病料中，呈硫磺樣小顆粒狀。將含小顆粒膿液研碎，接種于血清瓊脂，24小時培養(yǎng)后可見細小、

51、圓形、藍灰色、半透明、粘稠、直徑約1.5mm的菌落。延長培養(yǎng)時間，直徑可擴大到4mm。多次傳代后，粘稠性可消失。在肉湯中呈均勻渾濁生長。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）林氏放線桿菌,生化反應(yīng)：分解麥芽糖、甘露醇、甘露糖、糊精產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；多數(shù)對乳糖于3－7天發(fā)酵；多數(shù)能利用伯膠糖，甘油，不利用楊苷、鼠李糖、蕈糖。少數(shù)可發(fā)酵棉實糖。過氧化氫酶、氧化酶不定，美蘭還原試驗弱陽性。,江西農(nóng)業(yè)大學

52、動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（二）林氏放線桿菌,3、微生物學診斷① 臨床癥狀加鏡檢：從膿汁中找出灰白色小顆粒，進行壓片，鏡檢，呈放射狀。② 細菌分離：血清平板――典型菌落，延長培養(yǎng)時間，直徑可達4mm；麥康凱培養(yǎng)基上生長緩慢，呈無色小菌落；三糖鐵上生長底部發(fā)黃。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,（三）駒放線桿菌（A. equuli）,對幼駒及全身抵抗力衰弱的馬致病，主要

53、為繼發(fā)傳染，引起關(guān)節(jié)化膿癥、腎炎、敗血病、有的可引起流產(chǎn)。本菌在普通瓊脂上生長不良，肉湯中生長良好，菌落非常粘稠，鉤菌時會拉成長絲。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,五、嗜血桿菌屬（Haemophilus）,嗜血桿菌是一群酶系統(tǒng)不完善的G-桿菌，生長需要血液中的生長因子，尤其是X因子和V因子。常見的嗜血桿菌有：貓嗜血桿菌、血紅蛋白嗜血桿菌、副兔嗜血桿菌、副禽嗜血桿菌、副豬嗜血桿菌。,江西

54、農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,1、形態(tài)染色,多為短桿菌，也有球狀、桿狀和長絲狀等多形性；多單個散在，也有短鏈排列。無鞭毛、無芽胞，新分離的致病菌株有莢膜。美藍染色兩極著染，革蘭氏染色陰性。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,2、培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧，最適生長溫度37℃，最適pH為7.6-7.8。初步分離培養(yǎng)時，供給5%-10%CO2可促進生長。本屬菌生長需要X

55、因子和V因子。本屬細菌在巧克力培養(yǎng)上，經(jīng)1-2天培養(yǎng)，可形成光滑型中等大小半透明、灰白色菌落。本屬菌對糖類發(fā)酵多不穩(wěn)定。,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,3、抗原及分型,有莢膜多糖抗原和菌體結(jié)構(gòu)抗原。莢膜抗原具有型的特異性、菌體結(jié)構(gòu)抗原包括LPS和OMP。OMP可用于本屬細菌亞型區(qū)分及進行流行病學調(diào)查。4、致病性及免疫本屬菌可致人和動物多種疾病，毒力因子包括莢膜、菌毛和內(nèi)毒素等。,江西農(nóng)業(yè)

56、大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,5、微生物學診斷,分離培養(yǎng)：腦脊液、血液、分泌液等病料，涂片鏡檢；上述病料接種巧克力和鮮血平板，置含5%-10%CO2培養(yǎng)箱或燭缸中，37℃培養(yǎng)1-2天。在血平板上生長不良在巧克力培養(yǎng)基上生長良好可懷疑嗜血桿菌。V因子需要試驗：“衛(wèi)星現(xiàn)象”。血清學試驗：凝集試驗、瓊擴、HI試驗等。,,江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院 鄔向東 17707093313,本章節(jié)結(jié)束,草綠色鏈球菌