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1、分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離欒旭東,張興敏,周雪霞,閆超,何溢濤(山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2005級(jí)生科基地班,濟(jì)南250100)摘要:纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),它能被土壤中某些微生物分解利用,是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。本實(shí)驗(yàn)通過從土壤中分離分解纖維素的微生物,初步鑒定了其形態(tài)特征和生理生化特性,為日后更進(jìn)一步的研究打下基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:纖維素土壤微生物純培養(yǎng)剛果紅染色法Abstract:celluloseis
2、themostabundantpolysacideontheearthwhichcanbedigestedbysomemicroganismsintheearthbecausetheyproducecellulase.Inourexperimentweisolatedthesemicroganismsfromtheearthcheckedupthecells’colonies’mphologythebieactionstheycanac
3、t.Keywds:cellulosemicroganismsintheearthpurecultureCongoredstaining資源和環(huán)境問題是人類在21世紀(jì)面臨最主要的挑戰(zhàn)。生物質(zhì)資源是可再生資源,地球上每年光合作用的產(chǎn)物高達(dá)1.51011—2.01011,是人類社會(huì)賴以生存的基本物質(zhì)資源,其中90%以上為木質(zhì)纖維素類物質(zhì)[1]。目前這部分資源尚未得到充分的開發(fā)利用。隨著世界人口迅速增長(zhǎng),礦產(chǎn)資源日漸枯竭,開發(fā)高效轉(zhuǎn)化木質(zhì)纖維素
4、類可再生資源的微生物技術(shù),利用工農(nóng)業(yè)廢棄物等發(fā)酵生產(chǎn)人類急需的燃料、飼料及化工產(chǎn)品,即化工原料的“綠色化”,具有極其重要的意義和光明的發(fā)展前景。地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸,其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。而要研究這些微生物,首先要將它們從土壤中種類乏多的微生物中分離出來。1.土壤中纖維素分解菌的分離土壤中纖維素分解菌的分離[2]土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱,同其他生物環(huán)境
5、相比,土壤中的微生物數(shù)量最大,種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.1土樣的采集土樣的采集土壤中的微生物,大約70%~90%是細(xì)菌。細(xì)菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長(zhǎng),絕大多數(shù)分布在距地表約3~8cm的土壤層。因此,土壤取樣時(shí),一般要鏟去表層土。另外,土樣的采集要選擇富含纖維素的環(huán)境,這是因?yàn)樵诶w維素含量豐富的環(huán)境,通常會(huì)聚集較多的分解纖維素的微生物。綜合各種因素,本小組從圖書館后院的落
6、葉堆積叢取土樣。鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基CMCNa510g酵母膏1gKH2PO40.25g瓊脂15g土豆汁100ml將上述物質(zhì)溶解后用蒸餾水定容到1000ml按以上比例配制200ml鑒別培養(yǎng)基和10mgml的剛果紅(CR)溶液,滅菌后,按照每200ml培養(yǎng)基加入1ml的比例往培養(yǎng)基中加入CR溶液,混勻后倒平板,凝固后待用。(2)涂布平板將上述已倒培養(yǎng)基的十個(gè)平板底面分別用記號(hào)筆寫上104105106三種稀釋度(每個(gè)稀釋度寫3個(gè))和一個(gè)空
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