酶非水相催化理論及應(yīng)用特性

1、,第七章 酶非水相催化,1、酶非水相催化的幾種類型,2、有機(jī)介質(zhì)反應(yīng)體系,3、有機(jī)溶劑中酶催化作用的影響因素,6、有機(jī)介質(zhì)中酶催化的應(yīng)用,Go,Go,Go,Go,本章內(nèi)容：,√,4、酶在有機(jī)介質(zhì)中的催化特性,5、有機(jī)介質(zhì)中酶的應(yīng)用形式,Go,Go,√,√,水是酶促反應(yīng)最常用的反應(yīng)介質(zhì)。,但對(duì)于大多數(shù)有機(jī)化合物來說，水并不是一種適宜的溶劑。因?yàn)樵S多有機(jī)化合物(底物)在水介質(zhì)中難溶或不溶。,由于水的存在，往往有利于如水解、消旋化、聚合和分解

2、等副反應(yīng)的發(fā)生。,,是否存在非水介質(zhì)能保證酶催化？？,1984年，克利巴諾夫（Klibanov）等人在有機(jī)介質(zhì)中進(jìn)行了酶催化反應(yīng)的研究，他們成功地在利用酶有機(jī)介質(zhì)中的催化作用，獲得酯類、肽類、手性醇等多種有機(jī)化合物，明確指出酶可以在水與有機(jī)溶劑的互溶體系中進(jìn)行催化反應(yīng)。,長(zhǎng)期以來，人們一直認(rèn)為酶是水溶性生物大分子，只能在水溶液中發(fā)揮其催化功能，而有機(jī)介質(zhì)會(huì)使酶活性喪失。這種傳統(tǒng)思想極大地限制了酶學(xué)的發(fā)展。1984年Zaks A和 Kli

3、banov A.M 首次發(fā)表了關(guān)于非水相介質(zhì)中脂肪酶的催化行為及熱穩(wěn)定性的研究報(bào)道，引起了廣泛的關(guān)注。傳統(tǒng)的酶學(xué)領(lǐng)域迅速地產(chǎn)生了一個(gè)全新的分支——非水酶學(xué)(nonaqueous enzymology)。,早在20世紀(jì)初，Ｅ.Ｂourquelot等曾經(jīng)將乙醇、丙酮類的有機(jī)溶劑加到酶的水溶液中，進(jìn)行非水介質(zhì)中酶催化的嘗試。,1975～1983年間Ｂ.Ｃ.Ｂuckland和Ｋ.Ｍartinek等做了將微生物細(xì)胞、游離酶和固定化酶用于有機(jī)溶劑中

4、合成酯和類固醇及甾醇轉(zhuǎn)化的探索。,一、非水介質(zhì)酶催化發(fā)展情況,直到1984年，非水溶劑中酶催化的研究才取得了突破性的進(jìn)展。,此后十幾年來，酶在非水介質(zhì)中催化反應(yīng)的研究十分活躍。,二、酶非水相催化的幾種類型,1、有機(jī)介質(zhì)中的酶催化,2、氣相介質(zhì)中的酶催化,有機(jī)介質(zhì)中的酶催化是指酶在含有一定量水的有機(jī)溶劑中進(jìn)行的催化反應(yīng)。適用于底物、產(chǎn)物兩者或其中之一為疏水性物質(zhì)的酶催化作用。,適用于底物是氣體或者能夠轉(zhuǎn)化為氣體的物質(zhì)的酶催化反應(yīng)。,溫度及

5、壓力均處于臨界點(diǎn)以上的液體叫超臨界流體(supercritical fluid)。 超臨界流體的許多物理化學(xué)性質(zhì)介于氣體和液體之間，并具有兩者的優(yōu)點(diǎn)，如具有與液體相近的溶解能力和傳熱系數(shù)，具有與氣體相近的黏度系數(shù)和擴(kuò)散系數(shù)。同時(shí)它也具有區(qū)別于氣態(tài)和液態(tài)的明顯特點(diǎn)： （1）可以得到處于氣態(tài)和液態(tài)之間的任一密度； （2）在臨界點(diǎn)附近，壓力的微小變化可導(dǎo)致密度的巨大變化。,3、超臨界介質(zhì)中的酶催化,,離子液（ionic liquids

6、）是由有機(jī)陽離子與有機(jī)（無機(jī)）陰離子構(gòu)成的在室溫條件下呈液態(tài)的低熔點(diǎn)鹽類，揮發(fā)性低、穩(wěn)定性好。與傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑不同的是，離子液體沒有蒸汽壓，但是有很好的溶解性，熱穩(wěn)定范圍很寬，超過液態(tài)溫度范圍（≤300℃） 。,4、離子液介質(zhì)中的酶催化,氯化1-甲基-3-乙基咪唑鹽1-甲基-3-丁基咪唑六氟磷酸鹽,酶非水相催化的幾種類型,1、有機(jī)介質(zhì)中的酶催化,2、氣相介質(zhì)中的酶催化,3、超臨界介質(zhì)中的酶催化,4、離子液介質(zhì)中的酶催化,,√,有機(jī)溶

7、劑與水形成均勻的單相溶液體系酶、底物和產(chǎn)物都能溶解在這種體系中。,一、常見的有機(jī)介質(zhì)體系,用非極性有機(jī)溶劑取代所有的大量水，使固體酶懸浮在有機(jī)相中。酶的狀態(tài)可以是結(jié)晶態(tài)、凍干狀態(tài)、沉淀狀態(tài)，或者吸附在固體載體表面上。,2、水－與水互溶有機(jī)溶劑（均一體系）,1、微量水－非極性有機(jī)溶劑(微水介質(zhì)體系),“水包油”和“油包水”,由含有溶解酶的水相和一個(gè)非極性的有機(jī)溶劑(高脂溶性)相所組成的兩相體系。,3、水－非極性有機(jī)溶劑（兩相體系）,4

8、、膠束體系和反膠束體系,E,（正）膠束體系：表面活性劑的極性段朝外，非極性端朝內(nèi)，反應(yīng)時(shí)酶在膠束外面的水溶劑中，疏水性的底物或產(chǎn)物在膠束內(nèi)部。反應(yīng)在膠束的兩相界面進(jìn)行。反膠束體系：表面活性劑的極性端朝內(nèi)，非極性端朝外，水溶液包在膠束內(nèi)部。反應(yīng)時(shí)，酶分子在反膠束內(nèi)部的“小水池”中進(jìn)行催化。,.,.,.,.,.,.,.,.,有機(jī)相,S,膠束體系,反膠束體系,水相,,有機(jī)相,,表面活性劑：表面活性劑是由親水憎油的極性基團(tuán)和親油憎水的非極性基

9、團(tuán)兩部分組成的兩性分子。在有機(jī)相酶反應(yīng)中用得最多的是陰離子表面活性劑：AOT(AerosolOT)，其化學(xué)名為丁二酸-2-乙基酯磺酸鈉。,,不管采用何種有機(jī)介質(zhì)反應(yīng)體系，酶催化反應(yīng)的介質(zhì)中都含有機(jī)溶劑和一定量的水。它們都對(duì)催化反應(yīng)有顯著的影響。,1、微量水－非極性有機(jī)溶劑(微水介質(zhì)體系),2、水－與水互溶有機(jī)溶劑（均一體系）,3、水－非極性有機(jī)溶劑（兩相體系）,4、膠束體系和反膠束體系,√,二、有機(jī)相酶反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn),1、 有利于疏水性底

10、物的反應(yīng)，增強(qiáng)反應(yīng)物的溶解度；2、可提高酶的熱穩(wěn)定性；3、 能催化在水中不能進(jìn)行的反應(yīng)；4、 可改變反應(yīng)平衡移動(dòng)方向；5、 可控制底物專一性；6、 可防止由水引起的副反應(yīng)；７、 酶和產(chǎn)物易于回收；８、 可避免微生物污染。,三、 有機(jī)相酶反應(yīng)具備條件,1、 保證必需水含量。2、 選擇合適的酶及酶形式。3、 選擇合適的溶劑及反應(yīng)體系。4、 選擇最佳pH值。,,,第三節(jié) 有機(jī)溶劑中酶催化作用的影響因素,一、水對(duì)有機(jī)介質(zhì)中

11、酶催化反應(yīng)的影響,有機(jī)介質(zhì)中的水含量多少對(duì)酶的空間構(gòu)象、酶的催化活性、酶的穩(wěn)定性、酶的催化反應(yīng)速度等都有密切關(guān)系，水還與酶催化作用的底物和反應(yīng)產(chǎn)物的溶解度有關(guān)。,必需水：維持酶分子完整的空間構(gòu)象所必需的最低水量。,最適水含量：在催化反應(yīng)速度達(dá)到最大時(shí)的水含量稱為最適水含量。　　在實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際情況，通過實(shí)驗(yàn)確定最適合水含量。,,酶,二、有機(jī)溶劑對(duì)有機(jī)介質(zhì)中酶催化反應(yīng)的影響,水溶性有機(jī)溶劑：甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、丙酮、　　

12、　　　　　　乙晴等水不溶性的有：石油醚、己烷、庚烷、辛烷、苯、甲苯、　　　　　　　氯仿、乙醚、戊醚等,常用的有機(jī)溶劑：,2、有機(jī)溶劑對(duì)酶結(jié)構(gòu)的影響,1、有機(jī)溶劑對(duì)酶分子表面結(jié)合水的影響,有機(jī)溶劑的極性越強(qiáng)，越易于奪取酶分子表面的結(jié)合水，對(duì)酶活性的影響就越大。,（1）對(duì)酶分子表面結(jié)構(gòu)的影響；（2）對(duì)酶活性中心的影響。,枯草桿菌蛋白酶晶體在乙腈溶劑中，原有的119個(gè)與酶分子結(jié)合的水分子中有20個(gè)水分子被脫去，12個(gè)乙腈分子結(jié)合到了上去

13、，其中4個(gè)取代了原來水分子的位置。,例如，正己烷能奪取酶分子0.5%的結(jié)合水，甲醇則可以奪取酶分子60%的結(jié)合水。,辣根過氧化物酶在甲醇中的催化時(shí)，發(fā)現(xiàn)甲醇可以進(jìn)入到酶活性中心，與卟啉鐵配位 。4個(gè)已經(jīng)分子可以進(jìn)入到活性枯草桿菌蛋白酶活性中心，結(jié)合位點(diǎn)與抑制劑相似。,3、有機(jī)溶劑對(duì)酶作用底物和產(chǎn)物的影響,有機(jī)溶劑能改變酶分子必需水層中底物和產(chǎn)物的濃度。,一般選用2≤lgP≤5的有機(jī)溶劑。,4、選擇有機(jī)溶劑必須考慮的因素,（２） 有機(jī)溶

14、劑與反應(yīng)的匹配性（即相容性）例：對(duì)于酶促糖改性而言，使用疏水性的，與水不互溶的溶劑是不現(xiàn)實(shí)的，因?yàn)椴蝗苄缘孜锖筒蝗苄缘拿钢g無相互作用，必須用親水性的溶劑（如吡啶或二甲基甲酰胺）,（１）極性系數(shù)lgP：即一種溶劑在正辛烷/水兩相間分配系數(shù)的常用對(duì)數(shù)值，它能直接反映溶劑的疏水性。極性系數(shù)越大，表明其極性越弱，極性系數(shù)越小，則極性越強(qiáng)。,（4）溶劑的密度、黏度、表面張力、毒性、廢物處理和成本等（溶劑因底物而宜）。,（3）選擇的溶劑對(duì)主反應(yīng)

15、必須是惰性的，即不參與主反應(yīng)。 例如，醇與酯之間發(fā)生的酯基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成新醇和新酯，就不能用醇也不能用酯作為溶劑。,,第四節(jié) 酶在有機(jī)介質(zhì)中的催化特性,一、酶催化反應(yīng)的選擇性,1、底物專一性的變化,非水酶學(xué)的發(fā)展使人們認(rèn)識(shí)到可以通過改變反應(yīng)介質(zhì)來改變酶催化反應(yīng)的選擇性，從而達(dá)到人為地改變和控制酶的選擇性。,2、對(duì)映體選擇性的變化,在有機(jī)介質(zhì)中，某些蛋白酶可以用D-氨基酸為底物合成由D-氨基酸組成的多肽。這一點(diǎn)在手性藥物制造中，有

16、重要的應(yīng)用。,3、位置選擇性的變化,有機(jī)溶劑中，酶能夠選擇性地催化底物中某個(gè)區(qū)域的基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)。脂肪酶催化1，4-二丁酰基-2-辛基苯與丁醇之間的轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，在甲苯介質(zhì)中，優(yōu)先催化C-4位的?；谝译嬷?，優(yōu)先催化C-1位的酰基。,4、化學(xué)鍵選擇性的變化,在同一個(gè)底物分子中有2中以上的化學(xué)鍵都可以被酶催化時(shí)，酶對(duì)其中一種化學(xué)鍵優(yōu)先進(jìn)行反應(yīng)。不同來源的脂肪酶催化6-氨基-1-己醇的?；磻?yīng)時(shí)，對(duì)其中的氨基和羥基有選擇性，分別生成肽鍵和酯

17、鍵。,１、干酶粉和結(jié)晶酶　　目前最簡(jiǎn)單的也是被大多數(shù)研究者所采用的非水催化的體系是將固態(tài)酶粉直接懸浮在有機(jī)溶劑中。,２、固定化酶　　酶固定化后，增大了酶與底物接觸的表面，在一定程度上可以提高酶在有機(jī)溶劑中的擴(kuò)散效果和熱力學(xué)穩(wěn)定性，有利于酶的回收和連續(xù)化生產(chǎn)。,３、化學(xué)修飾酶　　雙親分子共價(jià)修飾或非共價(jià)修飾酶分子表面，可以增加酶表面的疏水性，使酶均一地溶于有機(jī)溶劑。,,第五節(jié) 酶的應(yīng)用形式,４、印跡酶　　將酶在含配體的水溶液中凍

18、干，再將配體徹底洗去，經(jīng)過這樣處理的酶叫印跡酶。,“pH記憶”（pH-imprinting）：在有機(jī)介質(zhì)反應(yīng)體系中，酶所處的pH環(huán)境與其在凍干或吸附到載體之前所用的緩沖液pH相同，這種現(xiàn)象稱為“pH記憶”。,利用酶的這種pH記憶特性，可以通過控制緩沖液中pH值的方法，來控制有機(jī)介質(zhì)中酶催化反應(yīng)的最適pH值。,５、反相膠束 反相膠束既是一種反應(yīng)體系，也是一種酶的使用形態(tài)。,“pH忘記”：用疏水性的酸或堿與他們相應(yīng)的鹽所組成

19、的混合物，作為有機(jī)相的緩沖液，他們控制著有機(jī)相中酶的解離狀態(tài)，使酶完全“忘記”干燥它所處的水溶液的pH。,酶在非水介質(zhì)中可以催化多種反應(yīng)?？梢陨梢恍┚哂刑厥庑再|(zhì)與功能的產(chǎn)物，在醫(yī)藥、食品、化工、功能材料、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值，顯示出廣闊的應(yīng)用前景。,一、手性藥物的拆分,手性化合物：是指化學(xué)組成相同，而其立體結(jié)構(gòu)互為對(duì)映體的兩種異構(gòu)體化合物一種有顯著療效，另一種有療效弱或無效一種有顯著療效，另一種有毒副作用兩種對(duì)映體的

20、藥效相反兩種對(duì)映體具有各自不同的藥效兩種消旋體的作用具有互補(bǔ)性,,第六節(jié) 有機(jī)介質(zhì)中酶催化的應(yīng)用,這些孩子出生時(shí)就四肢短小，像海豹。這是因?yàn)樗麄兊膵寢屧趹焉纤麄兊脑缙冢莿倓倯言械念^3個(gè)月，吃了一種人工合成的叫“反應(yīng)停”的藥，這是一種在50年代末60年代初全球46個(gè)國家(主要是西方國家、日本、一些南美和非洲國家)最為廣泛使用的抗妊娠反應(yīng)的藥物。中國因正被西方國家圍堵，幸免于難。全球共有大約1萬2千個(gè)這種四肢短小的孩子，現(xiàn)在他們

21、大都已人到老年。因?yàn)樗闹绦?，他們的生活很難自理。 不幸的是，這些海豹肢癥的患者結(jié)婚后生下的孩子也可能出現(xiàn)一模一樣的癥狀! 人類由于自身的原因造成的災(zāi)難有時(shí)竟要下一代來承擔(dān)!,1992年，美國FDA明確要求對(duì)于具有手性特性的化學(xué)藥物，都必需說明其兩個(gè)對(duì)映體在體內(nèi)的不同生理活性、藥理作用以及藥物代謝動(dòng)力學(xué)情況。許多國家和地區(qū)也都制定了有關(guān)手性藥物的政策和法規(guī)。這大大推動(dòng)了手性藥物拆分的研究和生產(chǎn)應(yīng)用。目前提出注冊(cè)申請(qǐng)和正在開發(fā)的手性藥物中

22、，單一對(duì)映體藥物占絕大多數(shù)。,環(huán)氧丙醇衍生物的拆分：　　可以用于合成β－阻斷劑、艾滋病毒蛋白酶抑制劑、抗病毒藥物等多種手性藥物?！　∑湎w可以在有機(jī)介質(zhì)體系中用酶法進(jìn)行拆分，獲得單一對(duì)映體。如用豬胰脂肪酶。,芳基丙酸衍生物的拆分：　　其單一對(duì)映體衍生物是多種治療關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕病的消炎鎮(zhèn)痛藥物的活性成分?！　∮弥久冈谟袡C(jī)介質(zhì)體系中進(jìn)行消旋體的拆分，可以得到Ｓ－構(gòu)型的活性成分。,二、酚樹脂的合成,酚樹脂是一種廣泛應(yīng)用的酚類聚合物，

23、可以用作黏合劑、化學(xué)定影劑等?！　　±备^氧化物酶在二氧六環(huán)與水混溶的均一介質(zhì)體系中，可以催化苯酚等酚類物質(zhì)聚合，生成酚類聚合物。,三、導(dǎo)電有機(jī)聚合物的合成,辣根過氧化物酶可以在與水混溶的有機(jī)介質(zhì)（如丙酮、乙醇、二氧六環(huán)等）中，催化苯胺聚合生成聚苯胺?！　【郾桨肪哂袑?dǎo)電性能，可以用于飛行器的防雷裝置，以免受到雷電的襲擊；用于衣物的表面，起到抗靜電的作用；用作雷達(dá)、屏幕等的微波吸收劑等。,四、發(fā)光有機(jī)聚合物的合成,新型光學(xué)材料雜激光技

24、術(shù)、全色顯示系統(tǒng)、光電計(jì)算機(jī)等方面都有重要應(yīng)用，是當(dāng)今材料科學(xué)與工程領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。　　辣根過氧化物酶可以在有機(jī)介質(zhì)中催化對(duì)苯基苯酚合成聚對(duì)苯基苯酚，將這種聚合物制成二極管，可以發(fā)出藍(lán)光。,五、食品添加劑的生產(chǎn),香蘭素是一種廣泛應(yīng)用的食品香料，可以從天然植物中提取分離得到，但是產(chǎn)量有限?！　】上韧ㄟ^微生物發(fā)酵得到香蘭酸（３－甲氧基－４－羥基苯甲酸），再通過脫氫酶在有機(jī)介質(zhì)中，將香蘭酸還原為香蘭素（ ３－甲氧基－４－羥基苯甲醛）。

25、,六、生物柴油的生產(chǎn),目前生物柴油主要是用化學(xué)法生產(chǎn)，采用酸、堿催化油脂與甲醇之間的轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，而生成脂肪酸甲酯。反應(yīng)時(shí)間短，成本低。但在反應(yīng)過程中使用過量的甲醇，而使后處理過程變得較為繁雜。能耗高；色澤深，在高溫下容易變質(zhì)；酯化產(chǎn)物難于回收；生產(chǎn)過程有廢堿液排放新方法：生物酶法，在有機(jī)介質(zhì)中，脂肪酶可以催化油脂與小分子醇類的酯交換反應(yīng)，生成小分子的酯類混合物。條件溫和，醇用量小、無污染排放。缺點(diǎn)：對(duì)甲醇及乙醇的轉(zhuǎn)化率低，一般僅為40%

26、～60%，酶的使用壽命短。,1、不是井里沒有水，而是你挖的不夠深。不是成功來得慢，而是你努力的不夠多?！　?、孤單一人的時(shí)間使自己變得優(yōu)秀，給來的人一個(gè)驚喜，也給自己一個(gè)好的交代?！　?、命運(yùn)給你一個(gè)比別人低的起點(diǎn)是想告訴你，讓你用你的一生去奮斗出一個(gè)絕地反擊的故事，所以有什么理由不努力!　　4、心中沒有過分的貪求，自然苦就少。口里不說多余的話，自然禍就少。腹內(nèi)的食物能減少，自然病就少。思緒中沒有過分欲，自然憂就少。大悲是無淚的，

27、同樣大悟無言。緣來盡量要惜，緣盡就放。人生本來就空，對(duì)人家笑笑，對(duì)自己笑笑，笑著看天下，看日出日落，花謝花開，豈不自在，哪里來的塵埃!　25、你不能拼爹的時(shí)候，你就只能去拼命！　　26、如果人生的旅程上沒有障礙，人還有什么可做的呢?！　?7、我們無法選擇自己的出身，可是我們的未來是自己去改變的。勵(lì)志名言：比別人多一點(diǎn)執(zhí)著，你就會(huì)創(chuàng)造奇跡　　28、偉人之所以偉大，是因?yàn)樗c別人共處逆境時(shí)，別人失去了信心，他卻下決心實(shí)現(xiàn)自己的目標(biāo)。

28、　　29、人生就像一道漫長(zhǎng)的階梯，任何人也無法逆向而行，只能在急促而繁忙的進(jìn)程中，偶爾轉(zhuǎn)過頭來，回望自己留下的蹣跚腳印?！　?0、時(shí)間，帶不走真正的朋友；歲月，留不住虛幻的擁有。時(shí)光轉(zhuǎn)換，體會(huì)到緣分善變；平淡無語，感受了人情冷暖。有心的人，不管你在與不在，都會(huì)惦念；無心的情，無論你好與不好，只是漠然。走過一段路，總能有一次領(lǐng)悟；經(jīng)歷一些事，才能看清一些人?！　?1、我們無法選擇自己的出身，可是我們的未來是自己去改變的?！　?2、

29、命好不如習(xí)慣好。養(yǎng)成好習(xí)慣，一輩子受用不盡?！　?3、比別人多一點(diǎn)執(zhí)著，你就會(huì)創(chuàng)造奇跡。50、想像力比知識(shí)更重要。不是無知，而是對(duì)無知的無知，才是知的死亡?！　?1、對(duì)于最有能力的領(lǐng)航人風(fēng)浪總是格外的洶涌?！　?2、思想如鉆子，必須集中在一點(diǎn)鉆下去才有力量?！　?3、年少時(shí)，夢(mèng)想在心中激揚(yáng)迸進(jìn)，勢(shì)不可擋，只是我們還沒學(xué)會(huì)去戰(zhàn)斗。經(jīng)過一番努力，我們終于學(xué)會(huì)了戰(zhàn)斗，卻已沒有了拼搏的勇氣。因此，我們轉(zhuǎn)向自身，攻擊自己，成為自己最大的

30、敵人。　　54、最偉大的思想和行動(dòng)往往需要最微不足道的開始?！　?5、不積小流無以成江海，不積跬步無以至千里?！　?6、遠(yuǎn)大抱負(fù)始于高中，輝煌人生起于今日?！　?7、理想的路總是為有信心的人預(yù)備著?！　?8、抱最大的希望，為最大的努力，做最壞的打算?！　?9、世上除了生死，都是小事。從今天開始，每天微笑吧?！　?0、一勤天下無難事，一懶天下皆難事?！　?1、在清醒中孤獨(dú)，總好過于在喧囂人群中寂寞?！　?2、心里的感覺總

31、會(huì)是這樣，你越期待的會(huì)越行越遠(yuǎn)，你越在乎的對(duì)你的傷害越大。　　63、彩虹風(fēng)雨后，成功細(xì)節(jié)中。　　64、有些事你是繞不過去的，你現(xiàn)在逃避，你以后就會(huì)話十倍的精力去面對(duì)。　　65、只要有信心，就能在信念中行走?！　?6、每天告訴自己一次，我真的很不錯(cuò)?！　?7、心中有理想 再累也快樂　　68、發(fā)光并非太陽的專利，你也可以發(fā)光?！　?9、任何山都可以移動(dòng)，只要把沙土一卡車一卡車運(yùn)走即可?！　?0、當(dāng)你的希望一個(gè)個(gè)落空，你也要堅(jiān)

32、定，要沉著！　　71、生命太過短暫，今天放棄了明天不一定能得到?！　?2、只要路是對(duì)的，就不怕路遠(yuǎn)。　　73、如果一個(gè)人愛你、特別在乎你，有一個(gè)表現(xiàn)是他還是有點(diǎn)怕你。　　74、先知三日，富貴十年。付諸行動(dòng)，你就會(huì)得到力量?！　?5、愛的力量大到可以使人忘記一切，卻又小到連一粒嫉妒的沙石也不能容納。　1、這世上，沒有誰活得比誰容易，只是有人在呼天搶地，有人在默默努力。　　2、當(dāng)熱誠變成習(xí)慣，恐懼和憂慮即無處容身。缺乏熱誠的人

33、也沒有明確的目標(biāo)。熱誠使想象的輪子轉(zhuǎn)動(dòng)。一個(gè)人缺乏熱誠就象汽車沒有汽油。善于安排玩樂和工作，兩者保持熱誠，就是最快樂的人。熱誠使平凡的話題變得生動(dòng)。　　3、起點(diǎn)低怕什么，大不了加倍努力。人生就像一場(chǎng)馬拉松比賽，拼的不是起點(diǎn)，而是堅(jiān)持的耐力和成長(zhǎng)的速度。只要努力不止，進(jìn)步也會(huì)不止。　　4、如果你不相信努力和時(shí)光，那么時(shí)光第一個(gè)就會(huì)辜負(fù)你。不要去否定你的過去，也不要用你的過去牽扯你的未來。不是因?yàn)橛邢Ｍ湃ヅ?，而是努力了，才能看到希?/p>

34、。　　5、人生每天都要笑，生活的下一秒發(fā)生什么，我們誰也不知道。所以，放下心里的糾結(jié)，放下腦中的煩惱，放下生活的不愉快，活在當(dāng)下。人生喜怒哀樂，百般形態(tài)，不如在心里全部淡然處之，輕輕一笑，讓心更自在，生命更恒久。積極者相信只有推動(dòng)自己才能推動(dòng)世界，只要推動(dòng)自己就能推動(dòng)世界?！　?、人性本善，純?nèi)缜逑魉冬摖q。欲望與情緒如風(fēng)沙襲擾，把原本如天空曠蔚藍(lán)的心蒙蔽。但我知道，每個(gè)人的心靈深處，不管烏云密布還是陰淤蒼茫，但依然有一道彩虹，

35、亮麗于心中某處?！　?、每個(gè)人的心里，都藏著一個(gè)了不起的自己，只要你不頹廢，不消極，一直悄悄醞釀著樂觀，培養(yǎng)著豁達(dá)，堅(jiān)持著善良，只要在路上，就沒有到達(dá)不了的遠(yuǎn)方！　　8、不要活在別人眼中，更不要活在別人嘴中。世界不會(huì)因?yàn)槟愕谋г共粷M而為你改變，你能做到的只有改變你自己！　　9、欲戴王冠，必承其重。哪有什么好命天賜，不都是一路披荊斬棘才換來的?！　?0、放手如拔牙。牙被拔掉的那一刻，你會(huì)覺得解脫。但舌頭總會(huì)不由自主地往那個(gè)空空的牙

36、洞里舔，一天數(shù)次。不痛了不代表你能完全無視，留下的那個(gè)空缺永遠(yuǎn)都在，偶爾甚至?xí)惓炷?。適應(yīng)是需要時(shí)間的，但牙總是要拔，因?yàn)樘矗越K歸還是要放手，隨它去?！　?1、這個(gè)世界其實(shí)很公平，你想要比別人強(qiáng)，你就必須去做別人不想做的事，你想要過更好的生活，你就必須去承受更多的困難，承受別人不能承受的壓力?！　?2、逆境給人寶貴的磨煉機(jī)會(huì)。只有經(jīng)得起環(huán)境考驗(yàn)的人，才能算是真正的強(qiáng)者。自古以來的偉人，大多是抱著不屈不撓的精神，從逆境中掙扎奮

37、斗過來的。　　13、不同的人生，有不同的幸福。去發(fā)現(xiàn)你所擁有幸運(yùn)，少抱怨上蒼的不公，把握屬于自己的幸福。你，我，我們大家都可以經(jīng)歷幸福的人生?！　?4、給自己一份堅(jiān)強(qiáng)，擦干眼淚；給自己一份自信，不卑不亢；給自己一份灑脫，悠然前行。輕輕品，靜靜藏。為了看陽光，我來到這世上；為了與陽光同行，我笑對(duì)憂傷?！　?5、總不能流血就喊痛，怕黑就開燈，想念就聯(lián)系，疲憊就放空，被孤立就討好，脆弱就想家，不要被現(xiàn)在而蒙蔽雙眼，終究是要長(zhǎng)大，最漆黑的

38、那段路終要自己走完。21、每個(gè)人都有潛在的能量，只是很容易：被習(xí)慣所掩蓋，被時(shí)間所迷離，被惰性所消磨?！　?2、不論你在什么時(shí)候開始，重要的是開始之后就不要輕言放棄?！　?3、恨別人，痛苦的卻是自己?！　?4、每天醒來，敲醒自己的不是鐘聲，而是夢(mèng)想。　　25、你不能拼爹的時(shí)候，你就只能去拼命！　　26、如果人生的旅程上沒有障礙，人還有什么可做的呢?！　?7、我們無法選擇自己的出身，可是我們的未來是自己去改變的。勵(lì)志名言：比

39、別人多一點(diǎn)執(zhí)著，你就會(huì)創(chuàng)造奇跡　　28、偉人之所以偉大，是因?yàn)樗c別人共處逆境時(shí)，別人失去了信心，他卻下決心實(shí)現(xiàn)自己的目標(biāo)?！　?9、人生就像一道漫長(zhǎng)的階梯，任何人也無法逆向而行，只能在急促而繁忙的進(jìn)程中，偶爾轉(zhuǎn)過頭來，回望自己留下的蹣跚腳印?！　?0、時(shí)間，帶不走真正的朋友；歲月，留不住虛幻的擁有。時(shí)光轉(zhuǎn)換，體會(huì)到緣分善變；平淡無語，感受了人情冷暖。有心的人，不管你在與不在，都會(huì)惦念；無心的情，無論你好與不好，只是漠然。走過一段