2017中藥成分抗耐藥酶的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究

1、,,,,,,,,,Copyright © 2009 by Xuming Deng All rights reserved.,中藥成分抗耐藥酶的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究,,鄧旭明,,吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,2017.08.27 鄭州,,背景介紹,,病原微生物,固有耐藥性2. 突變耐藥性（誘導(dǎo)突變、自發(fā)突變）3. 獲得耐藥性（轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、轉(zhuǎn)座）,遺傳變異,細(xì)菌耐藥性是微生物的一種天然抗生現(xiàn)象,,1. 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,

2、,1. 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,絕大多數(shù)抗生素進(jìn)入臨床后期都會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的耐藥菌,被殺死的病原菌,存活的病原菌,抗生素,耐藥菌,,,1. 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,抗生素的不合理使用促進(jìn)了耐藥性的產(chǎn)生,,新藥研發(fā)的速度趕不上耐藥性發(fā)生和發(fā)展的速度,,耐藥性的發(fā)展終將導(dǎo)致人類無(wú)藥可用,超級(jí)耐藥菌,1. 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,僅通過研發(fā)新的抗生素難以應(yīng)對(duì)愈演愈烈的耐藥性,1. 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,合理使用抗生素控制耐藥性的發(fā)展降低耐藥菌的毒力是控制耐藥菌

3、的另一策略針對(duì)耐藥機(jī)制進(jìn)行抑制劑研發(fā),,2. 細(xì)菌耐藥性的機(jī)制,表型改變,,產(chǎn)生耐藥酶類,改變靶位結(jié)構(gòu),改變膜通透性,改變代謝途徑,,,靶位修飾后與抗菌藥親和力降低，如林可胺類合成替代靶蛋白，如耐甲氧西林金葡菌（MRSA）,2. 細(xì)菌耐藥性的機(jī)制 改變靶位結(jié)構(gòu)：,,降低細(xì)胞壁的滲透性和細(xì)胞膜的通透性（水通道蛋白缺乏）、轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)減少、主動(dòng)外排系統(tǒng)增加見于喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類等,2. 細(xì)菌耐藥

4、性的機(jī)制 改變膜通透性：,,二氫蝶酸合成酶生成增多、直接利用外源性葉酸見于磺胺類耐藥,2. 細(xì)菌耐藥性的機(jī)制 改變代謝途徑：,,耐藥酶是細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性最主要的方式常見的耐藥酶包括：β-內(nèi)酰胺酶(BLA)、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基糖苷類鈍化酶及修飾酶等,2. 細(xì)菌耐藥性的機(jī)制 產(chǎn)生耐藥酶：,,3.重要耐藥酶,,,,,以毒力因子

5、為靶標(biāo)的藥物研發(fā)受到關(guān)注,,祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為， 任何疾病的產(chǎn)生都離不開內(nèi)因和外因。《靈素節(jié)注類編》曰：“方脈所主，病證多端，總其綱要，不出外感、內(nèi)傷兩門?！眱?nèi)因主要是指人體正氣虛衰，臟腑失調(diào)，氣血失和以及七情內(nèi)傷；外因指六淫之邪和疫戾之氣，當(dāng)人體正氣虛衰，邪氣乘虛而入會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生。所謂“邪之所湊，其氣必虛”。 傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)雖無(wú)感染和抗感染一類現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)的文字記載,但有關(guān)衛(wèi)外機(jī)能不固，六淫、疫癘之氣等外邪引起的傷寒、時(shí)病和散寒、清熱、解

6、毒等治法實(shí)已包含有現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)感染和抗感染的內(nèi)容。,,2010年中國(guó)獸藥典共收錄成方制劑191個(gè)，其中103個(gè)具有不同程度抗感染的作用，占總數(shù)的53.9%。目前臨床常見的疾病以呼吸系統(tǒng)疾病和消化泌尿系統(tǒng)疾病為主，2010藥典收錄的成方中，總計(jì)73種成方針對(duì)這3類疾病，占抗感染方劑的70.9%,抗感染成方制劑,非抗感染成方制劑,一、背景,,抗感染方劑用藥212味,共有13類藥,藥物出現(xiàn)總頻次為756次。解表藥、清熱藥、祛濕藥、化痰止咳平喘

7、藥、補(bǔ)虛藥是構(gòu)成治療感染性疾病的主要藥物,出現(xiàn)頻率明顯高于其它種類的藥物。其中,僅在成方功能中提到清熱的就有54個(gè)方劑，占藥典方劑總數(shù)的28.3%，占抗感染方劑的52.4%。清熱藥又以清熱解毒、清熱燥濕、清熱瀉火、清熱涼血藥為主;祛濕藥以利濕藥為主;補(bǔ)虛藥以補(bǔ)氣藥為主。由藥物反推病證,可見目前對(duì)于感染性疾病的防治主要是從祛除表邪、熱邪、濕邪、化痰止咳平喘和改善機(jī)體狀態(tài)幾方面入手的，即在抵御外感的同時(shí)，調(diào)節(jié)內(nèi)因，提高機(jī)體正氣，達(dá)到治療疾

8、病的效果。因此中醫(yī)用藥主要包括調(diào)節(jié)機(jī)體主動(dòng)抗感染和藥物抗感染作用,著重體現(xiàn)中醫(yī)整體觀念和辨證施治的特征。,一、背景,,作用機(jī)制尚不明確,藥理效果明確,目前，中藥對(duì)病原微生物，尤其是細(xì)菌，的藥效學(xué)得到廣泛的研究，其主要研究熱點(diǎn)為抑制或殺滅病原微生物的活性，但是其作用機(jī)制尚不明確。,中藥抗細(xì)菌性感染的機(jī)制尚不明確,一、背景,,,,中藥抗感染機(jī)制可能不是依賴于其抑菌或殺菌途徑,抗感染,抑菌或殺菌活性？？？,,,中藥單體的血漿濃度,中藥單體對(duì)

9、病原菌的最小抑菌濃度,vs,,,中藥及其化學(xué)成分抗感染潛在策略：抗毒力,,宿主,病原菌,中藥,,,,Koster et al. (2014),耐藥酶,,,抑菌,殺菌,抗毒力,機(jī)體作用,,1、揭示了中藥耐藥性低的機(jī)制,傳統(tǒng)抗生素,有效，但選擇壓力大,,,,,,,表面蛋白,外毒素,耐藥基因,毒力因子非生命所必須成分，故選擇壓力小,Cegelski et al. (2008),Walsh et al. (2003),中藥,一、背景-中藥抗

10、病原菌感染的總結(jié),,中藥與免疫系統(tǒng)的雙重作用下更有效的清除病原菌,傳統(tǒng)抗生素,作用效果差,,,中藥,中藥,解除細(xì)菌耐藥性,抗毒力,免疫系統(tǒng),雙重作用,有效清除,2、抗毒力中藥可協(xié)同機(jī)體免疫系統(tǒng)防治耐藥菌感染,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,傳統(tǒng)抗生素,中藥（抗毒力）,直接以病原菌為靶標(biāo)，抑制或者殺滅病原菌為目的，效果更快，但更容易導(dǎo)致耐藥性的發(fā)生和發(fā)展,以病原菌的毒力因子為靶標(biāo)，降低細(xì)菌的耐藥性及致病力，使得宿主的免疫系統(tǒng)更有效和更

11、快的清除病原菌而發(fā)揮其干預(yù)感染過程的作用效果。,,,清除,,,3、揭示了中藥藥效比傳統(tǒng)抗生素慢的機(jī)制,病原菌,免疫系統(tǒng),一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,4、天然化合物作用效果具有特異性,針對(duì)不同耐藥酶，中藥復(fù)方或許需要作出相應(yīng)的改變,厚樸酚,,,抑制生物學(xué)活性,無(wú)任何干預(yù)作用,NDM-1,TEM-1,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,5、天然化合物作用靶標(biāo)具有多樣性,某些天然化合物可能具有抗不同耐藥酶的作用,化合物B,,,抑制活

12、性,NDM-1,MCR-1,抑制活性,小分子與耐藥酶結(jié)合：非化學(xué)鍵，結(jié)合力低，與空間結(jié)構(gòu)相關(guān),一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,,,中西聯(lián)合用藥,減少用藥量,,降低耐藥性,延長(zhǎng)使用壽命,In addition, these anti-virulence drugs could potentially be used in combination with established or novel antimicrobials

13、in a synergistic manner to extend the lifespan of these drugs.,Rasko DA, Sperandio V. Anti-virulence strategies to combat bacteria-mediated disease. Nat Rev Drug Discov. 2010 Feb;9(2):117-28.,6、為中西聯(lián)合用藥提供理論基礎(chǔ),一、背景-中藥抗病原

14、菌感染的總結(jié),,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展為針對(duì)特定病原菌的特定毒力因子設(shè)計(jì)抗毒力中藥提供可能,傳統(tǒng)中醫(yī),何種致病菌？何種毒力因子？,,中藥方劑,現(xiàn)代醫(yī)學(xué),,,致病菌耐藥機(jī)制和致病機(jī)制的透徹研究,抗毒力中藥,7、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展為抗毒力中藥臨床應(yīng)用提供可能性,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,8、為中藥新藥研發(fā)奠定了基礎(chǔ),藥效,作用機(jī)制,藥動(dòng),中藥單體血漿濃度,中藥單體對(duì)病原菌的MIC值,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,9、中藥抗毒力藥物未來(lái)應(yīng)

15、用前景,可行：1）沙門氏菌感染（雞白?。?）產(chǎn)氣莢膜梭菌感染（雞壞死性腸炎）3）肺炎（金葡菌或肺炎鏈球菌）部分可行4）NDM-1陽(yáng)性菌感染5）金葡菌或鏈球菌等革蘭氏陽(yáng)性菌感染6）奶牛乳房炎,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,10、客觀看待中藥抗細(xì)菌性感染的應(yīng)用,尚無(wú)證據(jù)表明中藥天然化合物對(duì)菌血癥或敗血癥有效,臨床應(yīng)用限制：黃酮類化合物水溶性差，口服生物利用度低,一、背景-中藥抗病原菌感染的總結(jié),,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作

16、用的研究,中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,1. 天然化合物對(duì)部分BLA抑制活性的研究,,β-內(nèi)酰胺酶(BLA)是最重要的一類耐藥酶，也是最早最經(jīng)典的耐藥形式，主要見于腸桿菌科細(xì)菌BLA首次發(fā)現(xiàn)于青霉素臨床應(yīng)用之前BLA能夠與β-內(nèi)酰胺環(huán)上的羰基共價(jià)結(jié)合，水解酰胺鍵，使β-內(nèi)酰胺類抗生素開環(huán)失活。,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,1. 天然化合物對(duì)部分BLA抑制活性的研究,,β-內(nèi)酰胺酶的分類：

17、Ambler法：根據(jù)氨基酸序列的同源性分為A-D的四類Bush-Jacoby-Medeiros法：根據(jù)底物和抑制劑的構(gòu)型分成1-4的四組,,,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),1. 天然化合物對(duì)部分BLA抑制活性的研究,,已成功篩選到部分抑制劑，可顯著抑制β-內(nèi)酰胺酶的生物學(xué)活性,除NDM-1外，本課題組還進(jìn)行了其他BLA抑制劑的篩選工作,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BL

18、A抑制劑篩選平臺(tái),,所得抑制劑與青霉素聯(lián)用可產(chǎn)生顯著的協(xié)同效果,（FICI≤1/2時(shí)為協(xié)同效果）,1. 天然化合物對(duì)部分BLA抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,Monolekha,2013,Michael P. S. Booth，2015,Alain,2016,David A, 2013,Class A,Class B,Class C,Class D,,NDM-1,,,,

19、,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,新德里β-內(nèi)酰胺酶-1（NDM-1）是2008年在印度新德里首次報(bào)道發(fā)現(xiàn)的一種金屬β-內(nèi)酰胺酶（MBLs），由位于質(zhì)粒的 blaNDM-1基因編碼。NDM-1活性中心含有一或兩個(gè)Zn2+，能水解除單環(huán)類（氨曲南）以外的全部β-內(nèi)酰胺類抗生素。,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,NDM-1基因可通過質(zhì)粒在不

20、同菌株之間傳播，使得大量原本對(duì)常規(guī)抗生素敏感的細(xì)菌也迅速獲得強(qiáng)大的耐藥性。且NDM-1通過突變可不斷產(chǎn)生新的MBLs，加劇了細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。,耐藥基因在不同菌株間迅速傳播,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,目前，攜帶NDM-1基因的耐藥菌對(duì)除替加環(huán)素、多粘菌素外的所有抗生素均具不同程度耐藥性,對(duì)絕大多數(shù)抗生素均不敏感的超級(jí)細(xì)菌,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)

21、NDM-1抑制活性的研究,,β-內(nèi)酰胺類抗生素是臨床中最為常用的抗生素,β-內(nèi)酰胺酶,,耐藥菌株,分泌,,治療失效,β-內(nèi)酰胺藥物,NDM-1的出現(xiàn)嚴(yán)重影響了β-內(nèi)酰胺類抗生素的應(yīng)用,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,碳青霉烯類抗生素是抗菌譜最廣、抗菌活性最強(qiáng)的非典型β-內(nèi)酰胺類抗生素，對(duì)絕大多數(shù)BLA穩(wěn)定，是治療腸肝菌科嚴(yán)重感染的“最后防線”。NDM-1的出現(xiàn)同樣威脅到碳青霉烯類抗

22、生素的使用。,抗生素在與細(xì)菌耐藥性的博弈中已處于下風(fēng),,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立NDM-1抑制劑篩選平臺(tái),篩選β-內(nèi)酰胺酶抑制劑,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,天然化合物,評(píng)價(jià)協(xié)同抑菌效果,與抗生素聯(lián)用,,,體外酶抑制試驗(yàn),,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,篩選得到厚樸酚作為NDM-1抑制劑,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,厚樸酚對(duì)NDM-1陽(yáng)

23、性大腸桿菌生長(zhǎng)無(wú)顯著影響,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,厚樸酚與美羅培南聯(lián)用能夠恢復(fù)抗生素的抗菌活性,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,受試化合物對(duì)NDM-1陽(yáng)性大腸桿菌MIC值（μg/mL）,美羅培南與厚樸酚聯(lián)用，其MIC值降低了四倍FICI指數(shù)=0.281，提示二者具有協(xié)同作用,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,厚樸酚聯(lián)用美羅培南可完全殺滅NDM-1陽(yáng)性菌,2.

24、 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,聯(lián)合用藥能夠顯著提高感染NDM-1陽(yáng)性大腸桿菌感染小鼠的存活率,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,降低感染小鼠肝臟（左）及脾臟（右）中的菌落定植數(shù),2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,聯(lián)合用藥能夠顯著緩解肝臟脾臟的病理?yè)p傷,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活

25、性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,分子動(dòng)力學(xué)模擬表明厚樸酚能夠直接結(jié)合至NDM-1活性中心，影響NDM-1與底物的結(jié)合而降低其活性,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,突變子與厚樸酚結(jié)合力顯著下降，說明上述氨基酸殘基為厚樸酚與NDM-1結(jié)合位點(diǎn),2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,根據(jù)分子動(dòng)力學(xué)模擬結(jié)果，選擇厚樸酚與NDM-1主要結(jié)合位點(diǎn)(K221、G219及H2

26、50)進(jìn)行定點(diǎn)殘基突變，測(cè)定突變子與厚樸酚的結(jié)合自由能及結(jié)合常數(shù)（KA）,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,厚樸酚對(duì)NDM-1突變子抑制活性顯著降低,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,,,,厚樸酚對(duì)NDM-1的表達(dá)及穩(wěn)定性無(wú)顯著影響,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,小結(jié)：1.通過硝噻

27、吩水解試驗(yàn)，篩選得到厚樸酚這一NDM-1酶抑制劑；2.體外實(shí)驗(yàn)證明厚樸酚通過對(duì)NDM-1的抑制作用能夠恢復(fù)美羅培南的抑菌活性；3.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明二者聯(lián)用可顯著提高感染小鼠的存活率、降低肝脾菌落定植數(shù)，緩解病理?yè)p傷；4.分子動(dòng)力學(xué)模擬表明，厚樸酚能夠結(jié)合到NDM-1的活性中心，進(jìn)而抑制其生物學(xué)活性。,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,2. 天然化合物對(duì)NDM-1抑制活性的研究,以上結(jié)果表明厚樸酚可能是一種潛在的NDM-1酶抑制劑

28、，通過其與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的聯(lián)合應(yīng)用，能夠恢復(fù)抗生素的抗菌活性。,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,我國(guó)多地采集的不同樣本中均檢測(cè)到質(zhì)粒攜帶的MCR-1基因,Lancet Infect Dis 2016;16: 161–68,,SHP45,Mobile Colistin Resistance gene (MCR-1),,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究

29、,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,,隨后，在全球范圍內(nèi)多個(gè)國(guó)家均檢測(cè)到MCR-1基因,Lancet Infect Dis 2017; 17: 400–10,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,MCR-1基因陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)存在于多種不同型的質(zhì)粒上,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,,Lancet Infect Dis 2017; 17: 400–10,

30、MCR-1的發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致多粘菌素耐藥性的產(chǎn)生,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,我國(guó)和歐洲已經(jīng)針對(duì)多粘菌素的使用采取措施,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,多粘菌素主要耐藥機(jī)制,,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,MCR-1在功能上與磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶相同,LptA,MCR-1,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3.

31、MCR-1抑制劑作用的研究,,細(xì)菌耐多粘菌素的機(jī)制尚不完全清楚,？,？,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,MCR-1與產(chǎn)多粘菌素類芽孢桿菌磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶EptA同源性很高,,Lancet Infect Dis 2016;16: 161–68,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,3. MCR-1抑制劑作用的研究,含有MCR-1質(zhì)粒的W3110大腸桿菌脂質(zhì)體A的組成發(fā)生明顯改變,,,,,二

32、、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3. MCR-1抑制劑作用的研究,,多粘菌素,化合物,MCR-1產(chǎn)生“耐藥”,完全殺菌,對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)無(wú)影響,化合物針對(duì)特定靶點(diǎn)，結(jié)合抗生素殺滅耐藥菌,,,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3. MCR-1抑制劑作用的研究,發(fā)現(xiàn)MCR-1抑制劑，可顯著提高攜帶MCR-1質(zhì)粒細(xì)菌的敏感性,,抑制劑,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功

33、建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3. MCR-1抑制劑作用的研究,化合物z對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)無(wú)影響，不會(huì)造成耐藥性,,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3. MCR-1抑制劑作用的研究,初步驗(yàn)證抑制劑聯(lián)合多粘菌素可殺滅耐藥菌,,0 8 32 /(μg/mL),,,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3

34、. MCR-1抑制劑作用的研究,成功建立動(dòng)物模型，化合物Z聯(lián)合多粘菌素B具有一定的保護(hù)效果,,,,,二、中藥對(duì)耐藥酶作用的研究,,,成功建立BLA抑制劑篩選平臺(tái),,3. MCR-1抑制劑作用的研究,繼續(xù)開展MCR相關(guān)研究…,以上研究受到國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：31130053）、國(guó)家自然科學(xué)基金國(guó)際重點(diǎn)合作項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)： 31620103918 ）、973計(jì)劃（項(xiàng)目編號(hào)：2013CB127200）、863計(jì)劃（項(xiàng)目編號(hào)：

35、 2012AA020303 ）和的資助，在此表示感謝?。?！,,,汪洋 教授,劉鐘杰 教授,合作者：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)汪洋教授和劉鐘杰教授,,,近年來(lái)主要從事：1）抗細(xì)菌感染新靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)及先導(dǎo)結(jié)構(gòu)的篩選；2）天然藥物及抗菌藥物的抗炎作用及其機(jī)制和3）細(xì)菌細(xì)胞及分子感染機(jī)制及免疫調(diào)控等研究；主持承擔(dān)國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目聯(lián)合首席科學(xué)家）、國(guó)家自然科學(xué)基金國(guó)際重點(diǎn)合作項(xiàng)目、國(guó)家自然基金重點(diǎn)項(xiàng)目和973計(jì)劃課題等10余項(xiàng)；獲教育部高等學(xué)校自

36、然科學(xué)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)1項(xiàng)，國(guó)際/國(guó)內(nèi)授權(quán)專利5項(xiàng)；在領(lǐng)域內(nèi)知名期刊Plos pathogens，Journal of Infectious Diseases，Biochemical pharmacology，F(xiàn)ront Cell Infect Mi，The Journal of Biological Chemistry，Antimicrobial Agents and Chemotherapy和Scientific Reports等發(fā)表SCI

37、論文130余篇。代表性論文如下：,后記,,Xiang H, Feng Y, Wang J, Liu B, Chen Y, Liu L, Deng X, Yang M. Crystal structures reveal the multi-ligand binding mechanism of Staphylococcus aureus ClfB. PLoS pathogens 2012; 8:e1002751.(Impact Fa

38、ctor:7.003 )(通訊作者) Qiu J, Niu X, Dong J, Wang D, Wang J, Li H, Luo M, Li S, Feng H, Deng X. Baicalin protects mice from Staphylococcus aureus pneumonia via inhibition of the cytolytic activity of alpha-hemolysin. The Jo

39、urnal of infectious diseases 2012; 206:292-301. (Impact Factor:6.344 )(通訊作者)Wang JF, Qiu JZ, Tan W, Zhang Y, Wang HS, Zhou X, Liu S, Feng HH, Li WH, Niu XD, Deng XM. Fisetin Inhibits Listeria monocytogenes Virulence by

40、Interfering With the Oligomerization of Listeriolysin O. Journal of Infectious Diseases 2015; 211:1376-87. ( Impact Factor: 6.344) (通訊作者),后記,,4. Wang J, Zhou X, Liu S, Li G, Zhang B, Deng X, Niu X. Novel inhibitor discov

41、ery and the conformational analysis of inhibitors of listeriolysin O via protein-ligand modeling. Scientific reports 2015; 5:8864. ( Impact Factor: 5.228) (通訊作者) 5. Li H, Zhao X, Wang J, Dong Y, Meng S, Li R, Niu X, De

42、ng X. beta-sitosterol interacts with pneumolysin to prevent Streptococcus pneumoniae infection. Scientific reports 2015; 5:17668. ( Impact Factor: 5.228) (通訊作者) 6. Wang JF, Liu BW, Teng ZH, Zhou X, Wang XY, Zhang B, Lu

43、 GJ, Niu XD, Yang YJ, Deng XM. Phloretin Attenuates Listeria monocytogenes Virulence Both In vitro and In vivo by Simultaneously Targeting Listeriolysin O and Sortase A. Front Cell Infect Mi 2017; 7. (Impact Factor: 5.21

44、8)(通訊作者),后記,,7. Li H, Chen Y, Zhang B, Niu X, Song M, Luo Z, Lu G, Liu B, Zhao X, Wang J, Deng X. Inhibition of sortase A by chalcone prevents Listeria monocytogenes infection. Biochemical pharmacology 2016; 106:19-29. (

45、 Impact Factor: 5.091) (通訊作者)8. Dong J, Qiu J, Zhang Y, Lu C, Dai X, Wang J, Li H, Wang X, Tan W, Luo M, Niu X, Deng X. Oroxylin A inhibits hemolysis via hindering the self-assembly of alpha-hemolysin heptameric transm

46、embrane pore. PLoS computational biology 2013; 9:e1002869.(Impact Factor:4.587 )(通訊作者)9. Dong J, Zhang Y, Chen Y, Niu X, Zhang Y, Li R, Yang C, Wang Q, Li X, Deng X. Baicalin inhibits the lethality of ricin in mice by

47、inducing protein oligomerization. The Journal of biological chemistry 2015; 290:12899-907. ( Impact Factor: 4.258) (通訊作者),后記,,10. Dong J, Zhang Y, Chen Y, Niu X, Zhang Y, Yang C, Wang Q, Li X, Deng X. Baicalin inhibits t

48、he lethality of Shiga-like toxin 2 in mice. Antimicrobial agents and chemotherapy 2015; 59:7054-60. ( Impact Factor: 4.415) (通訊作者) 11. Xinxin C, Chi C, Xiao C, Xue X, Yongjun Y, Junqing C, Xuming D. Florfenicol inhibit

49、s allergic airway inflammation in mice by p38 MAPK-mediated phosphorylation of GATA 3. Clinical immunology 2011; 138:231-8.(Impact Factor:4.034 )(通訊作者)12. Zhao X, Li H, Wang J, Guo Y, Liu B, Deng X, Niu X. Verbascoside

50、 Alleviates Pneumococcal Pneumonia by Reducing Pneumolysin Oligomers. Molecular pharmacology 2016; 89:376-87.（Impact Factor：3.931）(通訊作者),后記,,13. Niu XD, Qiu JZ, Wang X, Gao XH, Dong J, Wang JF, Li HG, Zhang Y, Dai XH, Lu

51、 CJ, Deng XM. Molecular insight into the inhibition mechanism of cyrtominetin to alpha-hemolysin by molecular dynamics simulation. Eur J Med Chem 2013; 62:320-8.(Impact Factor:3.902 )(通訊作者)14. Qiu J, Feng H, Lu J, Xian

52、g H, Wang D, Dong J, Wang J, Wang X, Liu J, Deng X. Eugenol reduces the expression of virulence-related exoproteins in Staphylococcus aureus. Applied and environmental microbiology 2010; 76:5846-51.（Impact Factor：3.823）

53、(通訊作者） 15. Chu X, Wei M, Yang X, Cao Q, Xie X, Guan M, Wang D, Deng X. Effects of an anthraquinone derivative from Rheum officinale Baill, emodin, on airway responses in a murine model of asthma. Food and chemical toxi

54、cology 2012; 50:2368-75.(Impact Factor:3.584 )(通訊作者),后記,,16. Song BC, Wang ZN, Liu Y, Xu S, Huang GR, Xiong Y, Zhang S, Xu LL, Deng XM, Guan S. Immunosuppressive Activity of Daphnetin, One of Coumarin Derivatives, Is Med

55、iated through Suppression of NF-kappa B and NFAT Signaling Pathways in Mouse T Cells. PloS one 2014; 9. ( Impact Factor: 3.057) (通訊作者) 17. Qiu J, Niu X, Wang J, Xing Y, Leng B, Dong J, Li H, Luo M, Zhang Y, Dai X, Luo

56、Y, Deng X. Capsaicin protects mice from community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus pneumonia. PloS one 2012; 7:e33032.(Impact Factor:3.057 )(通訊作者)18. Ci X, Chu X, Wei M, Yang X, Cai Q, Deng X. Dif